禁用偶氮染料的测定

偶氮染料致癌问题的研究禁用偶氮染料的检测标准禁用偶氮染料的检测方法禁用偶氮染料的发展举例1895年德国的内科医生Rehn发现，很多长期从事品红生产的工人患上了膀胱癌。1905年德国卫生部门从染料品红、金胺和萘胺中确认了一些芳香胺的致癌作用。20世纪30年代，日本人Yoshida发现溶剂黄会引起老鼠肝细胞癌变。人们才意识到偶氮染料及其中间体在生产使用中的危害。20世纪60年代，据不完全统计，世界各国因从事染料化工生产而患上膀胱癌的病例已超过3000例。这之后各国开始关注起禁用偶氮染料。禁用偶氮染料的致癌问题所谓致癌性问题，是人们经过长期研究和临床试验证明某些偶氮染料中可还原出的芳香胺对人体或动物有潜在的致癌性。纺织品上的偶氮染料在与皮肤的长期接触中，在某些特殊的条件下，特别是在染色牢度不佳时，会从纺织品上转移到人的皮肤上，经人体的正常代谢过程，在分泌物的生物催化作用下发生分解还原，并释放出某些有致癌性的芳香胺，这些芳香胺被人体皮肤吸收后，在体内通过代谢作用而使细胞的脱氧核糖核酸(DNA)发生变化，成为人体病变的诱发因素，具有潜在的致癌致敏性。1、德国标准(1)§35LMBG82.02-2《日用品分析纺织日用品上使用某些偶氮染料的检测》(2)§35LMBG82.02-3《日用品分析皮革上禁用偶氮染料的检测》(3)§35LMBG82.02-4《日用品分析聚酯纤维上使用某些偶氮染料的检测》(4)DIN53316:1997《皮革检验皮革某些偶氮染料的测定》(5)§64LFBG82.02-9适用于印染纺织品和皮革2、欧盟标准(1)CENISO/TS17234:2003《皮革-化学测试-皮革中某些偶氮染料的测定》(2)EN14362-1:2003《纺织品某些源自偶氮染料的芳香胺的测定方法第1部分无需萃取的某些偶氮染料的测定》(3)EN14362-2:2003《纺织品某些源自偶氮染料的芳香胺的测定方法第2部分需从纤维中萃取的偶氮染料的测定》GB/T18885-2002《生态纺织品技术要求》，规定了纺织制成品中毒害物质的最高限量，其中就包括禁用偶氮染料的安全指标。GB18401-2003《国家纺织产品基本安全技术规范》也将禁用偶氮染料的测试作为重要检测项目。GB/T17592.1～3-1998《纺织品禁用偶氮染料检测方法(气相色谱/质谱法、高效液相色谱法、薄层层析法)》，其适用范围仅限于棉、麻、丝、毛、粘胶。2006年12月正式实施了GB/T17592-2006《纺织品禁用偶氮染料的测定》，其适用范围为经印染加工的纺织产品(采用着色剂、染料、颜料、涂料处理的及印花产品)。目前，欧盟禁用的致癌芳香胺有24种(在检测方法中我们会看到这24中芳香胺)，EN14362-1:2003规定的限量为30mg/Kg，它不是一个法定的极限值，也不是对定量分析法灵敏度的规定。此值的规定仅仅是出于分析上的原因，称之为“识别阀值”。GB/T17592—2006中规定的24中致癌芳香胺与欧盟的一致，但是目前只有§64LFBG82.02-9才能检测出4-氨基偶氮苯，这是因为4-氨基偶氮苯具有不稳定性，在新标准规定的测试条件下会发生分解。检测方法检测原理-----纺织样品在柠檬酸盐缓冲溶液介质中用连二亚硫酸钠还原分解以产生可能存在的禁用芳香胺(见下表)，用适当的液-液分配柱提取溶液中的芳香胺，浓缩后，用合适的有机溶剂定容，用配有质量选择检测器的气相色谱仪(GC/MSD)进行测定。必要时，选用另外一种或多种方法对异构体进行确认，用高压液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC/DAD)或气相色谱-质谱仪进行定量。检测过程取样处理萃取浓缩检测试剂与仪器试剂：所有试剂均采用分析纯，所有用水采用二级水。乙醚(使用前需要净化)，柠檬酸缓冲溶液(0.06mol/L，pH=6.0)，200mg/mL连二亚硫酸钠水溶液，甲醇，硅藻土，芳香胺标准物质(用以配置芳香胺标准储备溶液)，混合内标溶液(10μg/mL)，氯苯(涤纶纤维萃取时使用)，二甲苯(涤纶纤维萃取时使用)。仪器：可控温超声波发生器；真空旋转蒸发器；反应器(具有密闭塞，约65mL，由硬质玻璃之城管状)；恒温水浴；提取柱(主要添加硅藻土)；高效液相色谱仪，配有二极管阵列检测器(DAD)；气相色谱仪，配有质量选择检测器(MSD)。取样•直接裁剪，混合检测单色产品•有规律的印花、循环很大或无规律的印花、局部印花•按颜色取样印花产品处理非涤纶织物：取样后，剪成约5mm×5mm的小片，混合。从混合样中称取1.0g，精确至0.01g，置于反应器中，加入16mL预热到（70±2）℃的柠檬酸盐缓冲溶液，将反应器密闭，用力振摇，使所有试样浸于液体中，置于水浴中，并在（70±2）℃保温30min，使所有的织物充分润湿。然后打开反应器，加入3.0mL连二亚硫酸钠溶液，并立即密闭振摇，将反应器再于（70±2）℃水浴中保温30min，取出后2min内冷却至室温。涤纶产品的处理过程（1）样品预处理：取样后剪成合适的小片，混合。从混合样中称取1.0g（精确至0.01g），用无色纱线扎紧，在萃取装置的蒸汽室内垂直放置，使冷凝溶剂可从样品上流过。涤纶产品的处理过程（2）抽提：加入25mL氯苯抽提30min，或者用二甲苯抽提45min。提取液冷却至室温，在真空旋转蒸发器上45℃~60℃驱除溶剂，得到少量残留物，这个残留物用2mL的甲醇转移到反应器中。（3）还原裂解：在上述反应器中加入15mL预热到（70±2）℃的缓冲溶液，将反应器放入（70±2）℃的超声波浴中处理约30min，然后加入3.0mL连二亚硫酸钠溶液，并立即混合剧烈振摇以还原裂解偶氮染料，在（70±2）℃的水浴中保温30min，还原后2min内冷却至室温。萃取和浓缩萃取：用玻璃棒挤压反应器中试样，将反应液全部倒入提取柱内，任其吸附15min，用4×20mL乙醚分四次洗提反应器中的试样，每次需混合乙醚和试样，然后将乙醚洗液滴入提取柱中，控制流速，收集乙醚提取液于圆底烧瓶中。浓缩：将上述收集的盛有乙醚提取液的圆底烧瓶置于真空旋转蒸发器上，于35℃左右的低真空下浓缩至近1mL，再用缓氮气流驱除乙醚溶液，使其浓缩至近干。GC/MS定性分析准确移取1mL甲醇或者其他合适的溶液加入浓缩至近干的圆底烧瓶中，混匀，静置。然后分别取1μL标准工作溶液与试样溶液注入色谱仪，按以下条件操作。通过比较试样与标样的保留时间及特征离子进行定性。必要时，选用另外一种或多种方法对异构体进行确认。分析条件：毛细管色谱柱：DB-5MS(HP-5)30m×0.25mm×0.25μm，或相当者；进样口温度：250℃柱温：50℃（0.5min）---20℃/min升至150℃（8min）---20℃/min升至230℃（20min）---20℃/min升至260℃（5min）质谱接口温度：270℃；质量扫描范围：35amu~350amu;进样方式：不分流进样；载气：氦气（≥99.999%），流量：1.0mL/min;进样量：1μL；离化方式：EI；离化电压：70eV。HPLC/DAD定量分析操作条件：色谱柱：ODBC18（5μm），250mm×4.6mm，或者相当者；流量：1.0mL/min;柱温：30℃；进样量：15.0μL；检测器：二极管阵列检测器（DAD）;检测波长：240nm，280nm，305nm;流动相A：甲醇；流动相B：0.575g磷酸二氢氨+0.7g磷酸氢二钠+100mL甲醇溶于1000mL二级水中，pH=6.9；梯度：见表1HPLC/DAD定量分析操作方法：准确移取1mL甲醇或其他合适的溶液加入浓缩至干的圆底烧瓶中，混匀，静置。然后分别取1μL标准工作溶液与试样溶液注入色谱仪，按以上条件操作，用外标法定量。外标法的计算和表示：其中，--试样中分解出芳香胺的i的含量，mg/kg；--样液中芳香胺i的峰面积（或者峰高）；--标准工作液中芳香胺i的峰面积（或者峰高）；--标准工作液中芳香胺i的浓度，mg/L；V--样液最终体积，mL；m--试样量，g。GC/MS内标法定量操作方法：准确移取1mL内标溶液加入浓缩至近干的圆底烧瓶中，混匀，静置。然后分别移取1μL标准工作溶液与试样溶液注入色谱仪，按刚才的条件进行操作，可选用离子选择方式进行定量。内标定量分组如下表GC/MS内标法定量内标法的计算和表示：其中，Xi—试样中分解出芳香胺i的含量；Ai—样液中芳香胺i的峰面积（或者峰高）；--标准工作液中芳香胺i的浓度，mg/L；V--表示样液最终体积，mL；m--表示试样量，g。Aisc—标准溶液中内标的峰面积；Ais—标准工作液中芳香胺i的峰面积（或者峰高）；Aiss—样液中内标的峰面积。试验结果以各种芳香胺的检测结果分别表示，计算结果表示到个位数。低于检测低限时，试验结果为未检出。本方法的检测低限是5mg/Kg。本课结束谢谢！