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TIANGENBIOTECH(BEIJING)CO.,LTD.TIANGENBIOTECH(BEIJING)CO.,LTD.植物基因组植物基因组植物基因组植物基因组植物基因组植物基因组植物基因组植物基因组DNADNA提取提取提取提取提取提取提取提取基因组基因组基因组基因组DNA提取原则提取原则提取原则提取原则基因组基因组基因组基因组DNA提取方法提取方法提取方法提取方法植物基因组提取注意事项植物基因组提取注意事项植物基因组提取注意事项植物基因组提取注意事项基因组基因组基因组基因组DNA的检测的检测的检测的检测植物基因组植物基因组植物基因组植物基因组DNA提取常见问题分析提取常见问题分析提取常见问题分析提取常见问题分析内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要基因组基因组基因组基因组基因组基因组基因组基因组DNADNA提取原则提取原则提取原则提取原则提取原则提取原则提取原则提取原则保证保证保证保证DNA的纯度的纯度的纯度的纯度保证保证保证保证DNA结构的完整性结构的完整性结构的完整性结构的完整性基因组基因组基因组基因组DNA提取原则提取原则提取原则提取原则基因组基因组基因组基因组DNA提取方法提取方法提取方法提取方法植物基因组提取注意事项植物基因组提取注意事项植物基因组提取注意事项植物基因组提取注意事项基因组基因组基因组基因组DNA的检测的检测的检测的检测植物基因组植物基因组植物基因组植物基因组DNA提取常见问题分析提取常见问题分析提取常见问题分析提取常见问题分析内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要基因组基因组基因组基因组基因组基因组基因组基因组DNADNA提取方法提取方法提取方法提取方法提取方法提取方法提取方法提取方法适用于动物组织适用于动物组织适用于动物组织适用于动物组织、、、、植物植物植物植物、、、、血液血液血液血液、、、、细菌等细菌等细菌等细菌等适用于动物组织适用于动物组织适用于动物组织适用于动物组织、、、、植物植物植物植物、、、、血液血液血液血液、、、、细菌等细菌等细菌等细菌等适用于植物适用于植物适用于植物适用于植物、、、、真菌等真菌等真菌等真菌等适用于植物适用于植物适用于植物适用于植物、、、、真菌等真菌等真菌等真菌等物理方式物理方式物理方式物理方式：：：：机械剪切机械剪切机械剪切机械剪切、、、、超声波破碎超声波破碎超声波破碎超声波破碎物理方式物理方式物理方式物理方式：：：：机械剪切机械剪切机械剪切机械剪切、、、、超声波破碎超声波破碎超声波破碎超声波破碎酶法酶法酶法酶法：：：：蛋白酶蛋白酶蛋白酶蛋白酶酶法酶法酶法酶法：：：：蛋白酶蛋白酶蛋白酶蛋白酶KKCTABCTAB法法法法法法法法其它方法其它方法其它方法其它方法其它方法其它方法其它方法其它方法SDSSDS法法植物基因组提取方法植物基因组提取方法植物基因组提取方法植物基因组提取方法植物基因组提取方法植物基因组提取方法植物基因组提取方法植物基因组提取方法SDSSDS法法法法－－－－－－－－法法法法－－－－－－－－动物基因组提取经典方法动物基因组提取经典方法动物基因组提取经典方法动物基因组提取经典方法动物基因组提取经典方法动物基因组提取经典方法动物基因组提取经典方法动物基因组提取经典方法CTABCTAB法法法法－－－－－－－－法法法法－－－－－－－－植物基因组提取经典方法植物基因组提取经典方法植物基因组提取经典方法植物基因组提取经典方法植物基因组提取经典方法植物基因组提取经典方法植物基因组提取经典方法植物基因组提取经典方法CTABCTAB法原理法原理法原理法原理法原理法原理法原理法原理CTABCTAB（（（（十六烷基三甲基溴化铵十六烷基三甲基溴化铵十六烷基三甲基溴化铵十六烷基三甲基溴化铵（（（（十六烷基三甲基溴化铵十六烷基三甲基溴化铵十六烷基三甲基溴化铵十六烷基三甲基溴化铵），），），），），），），），是一种阳离子去污剂是一种阳离子去污剂是一种阳离子去污剂是一种阳离子去污剂，，，，是一种阳离子去污剂是一种阳离子去污剂是一种阳离子去污剂是一种阳离子去污剂，，，，可溶解细胞膜可溶解细胞膜可溶解细胞膜可溶解细胞膜，，，，并与核酸形成复合物并与核酸形成复合物并与核酸形成复合物并与核酸形成复合物可溶解细胞膜可溶解细胞膜可溶解细胞膜可溶解细胞膜，，，，并与核酸形成复合物并与核酸形成复合物并与核酸形成复合物并与核酸形成复合物高盐溶液中高盐溶液中高盐溶液中高盐溶液中（（（（高盐溶液中高盐溶液中高盐溶液中高盐溶液中（（（（0.7mol/L0.7mol/LNaClNaCl），），），），该复合物可溶的该复合物可溶的该复合物可溶的该复合物可溶的），），），），该复合物可溶的该复合物可溶的该复合物可溶的该复合物可溶的有机溶剂抽提有机溶剂抽提有机溶剂抽提有机溶剂抽提，，，，去除蛋白去除蛋白去除蛋白去除蛋白、、、、多糖多糖多糖多糖、、、、酚类等杂质酚类等杂质酚类等杂质酚类等杂质有机溶剂抽提有机溶剂抽提有机溶剂抽提有机溶剂抽提，，，，去除蛋白去除蛋白去除蛋白去除蛋白、、、、多糖多糖多糖多糖、、、、酚类等杂质酚类等杂质酚类等杂质酚类等杂质上清加入乙醇沉淀上清加入乙醇沉淀上清加入乙醇沉淀上清加入乙醇沉淀上清加入乙醇沉淀上清加入乙醇沉淀上清加入乙醇沉淀上清加入乙醇沉淀DNADNA。。。。。。。。CTABCTABCTABCTABCTABCTABCTABCTAB溶液在低于溶液在低于溶液在低于溶液在低于溶液在低于溶液在低于溶液在低于溶液在低于1515151515151515℃℃℃℃℃℃℃℃时会形成沉淀析出时会形成沉淀析出时会形成沉淀析出时会形成沉淀析出，，，，因此在将其加入冰冷的因此在将其加入冰冷的因此在将其加入冰冷的因此在将其加入冰冷的时会形成沉淀析出时会形成沉淀析出时会形成沉淀析出时会形成沉淀析出，，，，因此在将其加入冰冷的因此在将其加入冰冷的因此在将其加入冰冷的因此在将其加入冰冷的植物材料之前必须预热植物材料之前必须预热植物材料之前必须预热植物材料之前必须预热，，，，且离心时温度不要低于且离心时温度不要低于且离心时温度不要低于且离心时温度不要低于植物材料之前必须预热植物材料之前必须预热植物材料之前必须预热植物材料之前必须预热，，，，且离心时温度不要低于且离心时温度不要低于且离心时温度不要低于且离心时温度不要低于1515151515151515℃℃℃℃℃℃℃℃。。。。。。。。SDSSDS法原理法原理法原理法原理法原理法原理法原理法原理SDS阴离子去垢剂阴离子去垢剂阴离子去垢剂阴离子去垢剂高温高温高温高温（（（（55～～～～65℃℃℃℃））））裂解细胞裂解细胞裂解细胞裂解细胞，，，，蛋白变性蛋白变性蛋白变性蛋白变性，，，，染色体离析染色体离析染色体离析染色体离析高盐高盐高盐高盐(KAc或或或或NH4Ac)或降低温度或降低温度或降低温度或降低温度（（（（冰浴冰浴冰浴冰浴））））使蛋白质及多糖杂质沉淀使蛋白质及多糖杂质沉淀使蛋白质及多糖杂质沉淀使蛋白质及多糖杂质沉淀,有机溶剂抽提有机溶剂抽提有机溶剂抽提有机溶剂抽提上清加入酚氯仿进行抽提上清加入酚氯仿进行抽提上清加入酚氯仿进行抽提上清加入酚氯仿进行抽提上清加入酚氯仿进行抽提上清加入酚氯仿进行抽提上清加入酚氯仿进行抽提上清加入酚氯仿进行抽提水相加入乙醇沉淀水相加入乙醇沉淀水相加入乙醇沉淀水相加入乙醇沉淀水相加入乙醇沉淀水相加入乙醇沉淀水相加入乙醇沉淀水相加入乙醇沉淀DNADNA。。。。。。。。植物基因组植物基因组DNADNA提取试剂盒提取试剂盒(DP305)(DP305)特别适合多糖、多酚含量高的植物和干粉材料特别适合多糖、多酚含量高的植物和干粉材料新型植物基因组新型植物基因组DNADNA提取试剂盒提取试剂盒(DP320)(DP320)无需酚、氯仿抽提，操作安全无需酚、氯仿抽提，操作安全快捷型植物基因组快捷型植物基因组DNADNA提取系统提取系统(DP321)(DP321)可以灵活调整实验材料的起始量可以灵活调整实验材料的起始量适合大量提取植物基因组的实验适合大量提取植物基因组的实验基因组基因组基因组基因组DNA提取原则提取原则提取原则提取原则基因组基因组基因组基因组DNA提取方法提取方法提取方法提取方法植物基因组提取注意事项植物基因组提取注意事项植物基因组提取注意事项植物基因组提取注意事项基因组基因组基因组基因组DNA的检测的检测的检测的检测植物基因组植物基因组植物基因组植物基因组DNA提取常见问题分析提取常见问题分析提取常见问题分析提取常见问题分析内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要内容纲要材料选择及保存材料选择及保存材料选择及保存材料选择及保存材料选择及保存材料选择及保存材料选择及保存材料选择及保存材料选择材料选择材料选择材料选择材料选择材料选择材料选择材料选择1.1.一般选择健康的幼叶或嫩芽；一般选择健康的幼叶或嫩芽；2.2.细胞数量多、核酸含量丰富、次生代谢物少的部位。细胞数量多、核酸含量丰富、次生代谢物少的部位。材料保存材料保存材料保存材料保存材料保存材料保存材料保存材料保存1.1.建议现取现提，有助于提高产量，同时保证提取效果；建议现取现提，有助于提高产量，同时保证提取效果；2.2.暂时不能提取的，建议置于液氮或－暂时不能提取的，建议置于液氮或－7070℃℃保存；保存；样品保存期间避免反复冻融。样品保存期间避免反复冻融。样品前处理样品前处理样品前处理样品前处理样品前处理样品前处理样品前处理样品前处理处理样品量处理样品量处理样品量处理样品量处理样品量处理样品量处理样品量处理样品量根据提取植物材料的状态不同，起始量也稍有差异，一般新根据提取植物材料的状态不同，起始量也稍有差异，一般新鲜的植物组织建议为鲜的植物组织建议为100mg100mg，而干燥的植物叶片或种子，一，而干燥的植物叶片或种子，一般建议提取量不超过般建议提取量不超过30mg30mg；；组织样品预处理组织样品预处理组织样品预处理组织样品预处理组织样品预处理组织样品预处理组织样品预处理组织样品预处理新鲜新鲜新鲜新鲜、、、、新鲜新鲜新鲜新鲜、、、、干重组织干重组织干重组织干重组织：：：：干重组织干重组织干重组织干重组织：：：：直接取直接取100mg100mg的新鲜组织或的新鲜组织或30mg30mg干重植物组干重植物组织，加入液氮研磨成粉末状；织，加入液氮研磨成粉末状；样品处理样品处理样品处理样品处理样品处理样品处理样品处理样品处理Q&AQ&AQQ--11：：：：：：：：样品量是否越多越好？样品量是否越多越好？AA--11：：：：：：：：不是。在试剂盒规定内增加处理起始量效果不好；如增加样不是。在试剂盒规定内增加处理起始量效果不好；如增加样品起始量，则后续实验中各溶液量均要相应按比例增加。品起始量，则后续实验中各溶液量均要相应按比例增加。QQ--22：：：：：：：：为何加入研磨的样品后变成褐色了？为何加入研磨的样品后变成褐色了？AA--22：：：：：：：：这是酚被氧化的缘故。建议在研磨样品之前准备好已加入裂这是酚被氧化的缘故。建议在研磨样品之前准备好已加入裂解缓冲液的试管，样品研磨完毕加入其中即可避免样品跟空解缓冲液的试管，样品研磨完毕加入其中即可避免样品跟空气接触而被氧化。气接触而被氧化。DNADNADNADNADNADNADNADNA洗涤和洗脱洗涤和洗脱洗涤和洗脱洗涤和洗脱洗涤和洗脱洗涤和洗脱洗涤和洗脱洗涤和洗脱DNADNA洗涤洗涤洗涤洗涤洗涤洗涤洗涤洗涤洗涤液洗涤液PWPW洗涤完后，将吸附柱洗涤完后，将吸附柱CB3CB3置于室温放置数分钟，置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。因为：漂洗液中乙醇以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。因为：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCRPCR等）实验。等）实验。DNADNA洗脱洗脱洗脱洗脱洗脱洗脱洗脱洗脱aa）洗脱体积不能太少，否则会影响洗脱效率；）洗脱体积不能太少，否则会影响洗脱