错误数据对于患者来说比没有数据来得更危险必须记住:质量控制是检验质量的根本保证如果将推测性的医学决定给(错)了患者那么最好的检验结果也可能是十分有害的必须记住:(一)研究表明:不必要重复检查占1.9%采集标本不规范占6.8%采集时间不对占2.2%标本收集后未及时送检占22.1%标本不合格占2.3%一、分析前的主要问题ISO/IEC15189文件:按照时间顺序,从临床医生开出医嘱开始,到分析检验程序开始前的步骤,包括检验申请、患者准备、原始样品的采集、运送到实验室并在实验室进行传输。从该定义不难看出,这个过程大部分工作都是患者、医生、护士、卫生员在实验室外完成的,实验室工作人员很难控制。准确性?有效性血K+VS溶血主要影响因素患者:状态、饮食、药物医生、护士送检人员1、状态不可变的生物因素:如年龄、性别等可变的生物因素:情绪、运动、生理节律变化采取标本时:体位:立位、卧位止血带的使用等年龄与性别:部分检验结果与年龄和性别而有所不同:红细胞总数:男:(4.0-5.7)×1012/L女:(3.7-5.1)×1012/L新生儿:(5.2-6.4)×1012/L婴儿:(4.0-4.3)×1012/L儿童:(4.0-4.5)×1012/L血清碱性磷酸酶:儿童:<500U/L成人:40-150U/L情绪:原则上患者应在平静、休息状态下采集标本,特别是血液标本。有研究指出,患者处于激动、兴奋、恐惧状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。运动:ALT、AST、LDH、CK等一时升高;还可引起血中钾、钠、钙、白蛋白、血糖等成分的变化。当剧烈运动或输注肾上腺素时,Ⅷ因子活性会快速上升。劳累或受冷、热空气刺激,往往可见白细胞的增高。分析物峰值时间谷值时间范围(日均值的%)钾14-1623-14-6铁14-182-450-70磷酸盐2-48-1230-40血红蛋白6-1822-248-15促甲状腺素20-27-135-15甲状腺素8-1223-310-20生长素21-231-21300-400泌乳素5-710-1280-100醛固酮2-412-1460-80从立位到卧位时:Hgb下降4%;Hct下降6%;K下降1%;Ca下降4%;ALT下降7%;AST下降9%;ALP下降9%;IgG下降7%;IgA下降7%;IgM下降5%。一顿标准餐后,可使血中甘油三酯增高50%、血糖增高15%。进食高碳水化合物食物,可引起血糖增高;进食高蛋白或高核酸食物,可引起血中尿素氮及尿酸的增高;进食高脂肪食物,可引起血脂的大幅度增高。餐后采集的血液标本,其血清常出现乳糜状,影响到许多检验测定的正确性。咖啡:可使AST、ALT、ALP、TSH、Glu等升高。酒:可使Glu降低,使TG、G-GT、HDL-Ch升高。尼古丁:可使儿茶酚胺、胃泌素、皮质醇、生长激素、碳氧血红蛋白、血球压积、癌胚抗原升高;使免疫球蛋白降低。药理作用对测定方法产生影响阿斯匹林、潘生丁和抵克立得等药物能抑制血小板聚集。口服避孕药会使血小板粘附功能、血小板聚集功能、纤维蛋白原、凝血酶原以及凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ因子活性呈明显增高,并且有统计学意义。青霉素苯唑氨苄羧苄头孢头孢硫酸硫酸G钾青霉素青霉素青霉素噻酚钠噻肟三嗪链霉素庆大霉素WBC↓↓_↓↑–↓–RBC↓↓↓↓↓–↓↓Hgb↓–↓–↓–↓–PLT↓↓↓↓↓–↓–ALT↑–↑↑↑↑↑↑AST↑↑↑↑↑↑↑↑ALP–↑–↑↑↑–↑CK––↑↑––––LDH–––↑––↑↑Bil↑↑––↑–↑↑BUN↑↑––↑–↓↑安定利眠宁苯巴比妥奋乃静苯妥英钠氯丙嗪WBC↓↓↓↓↓?RBC––↓–↓?Hgb––↓–↓?PLT–↓↓–↓?ALT––↑––↑AST–↑↑–––ALP↑↑↑–↑–Glu––––↑–Bil↑↑↑↑↑↑尿蛋白–––––↑尿糖↓–––?–输血/输液影响被分析物趋向电解质钾/钠/镁升高葡萄糖葡萄糖升高无机磷/钾降低淀粉酶/胆红素降低右旋糖苷凝血酶原时间降低总蛋白升高血细胞分析假性凝集Y-球蛋白病原性微生物感染期血清学检验假阳性输血血pH降低血凝试验抑制项目红细胞/血浆溶血标本/正常标本Cl0.501.05Na0.110.81K22.71.91Ca0.100.96ALT6.72.2AST40.03.59LDH180.08.04Cr1.631.94UA0.550.5GLU0.820.91BUN0.821.14被分析物分布非均一性;血清/血浆中水分被取代可达10%左右;对吸光度的干扰;物理化学机制的干扰.如标本中的脂蛋白可整合亲脂成分,降低与抗体的结合,并影响电泳和层析。抗凝剂、防腐剂的影响;静脉血、动脉血、毛细血管血的差异;容器洁净度或无菌程度;采集静脉血时止血带宽紧及时间的影响;采集标本运送间隔时间运送条件等等。(一)检验项目选择的原则1.针对性;2.有效性主要应考虑该项检验对某病诊断的敏感度及特异度,侧重点可能有所不同.人群筛查时,应考虑敏感度较高的检验项目;为了确诊,应选用特异度较高的试验;3.时效性强调及时性;4.经济性成本/效益关系。三、标本采集前的准备(二)患者的准备:1、饮食方面:饮食对检验标本的影响很大,多数检验要求采集空腹12小时后的标本,肝肾功能、血脂、血糖等。2、情绪状态方面:多数检验在标本采集前应避免剧烈运动、情绪紧张,处于安静状态下采集标本。3、药物治疗方面:最好在用药之前,已用药的应按规定停用一段时间再采集,不能停药的应在下次给药之前采集,并在检验申请单上注明用药情况。(三)工作人员的准备:1、标本采集时间:血浆皮质醇晨高晚低;嗜酸性粒细胞白天低,夜间高,上午波动大,下午较恒定的特点;血糖饭后1-2小时明显增高,2小时后可恢复正常水平一般来说,血液生化标本应在早晨空腹采血,血脂标本必须在空腹12小时以上抽血,痰液标本一般在早饭前进行,精液标本应在禁欲一周后采集,细菌学检验的标本应在抗生素治疗之前采集,有些特殊检验的标本应按规定的时间采集,如血丝虫应在夜间采血,查找致热原应在发热1-2天内采集或发热高峰时采集等.2、标本的采集部位:同一标本若部位不同,其物质含量是不同的,故应根据检验项目选择适应的采集部位。如血标本一般采集静脉血,婴儿可采股动脉血,只需微量全血时可以取耳垂血或指尖血。在动静脉血及毛细血管血之间,血气分析结果有一定的差别;耳垂血和手指血血细胞分布也有差异。采血时患者的体位可造成血液动力学的改变,其血液内的成份含量亦有变化,故观察病情或疗效时应固定采集血液标本的部位、时间及病人的体位。骨髓采集部位亦有多处,当结果与疾病难以解释时,应考虑采集的部位。3、标本的采集方法:标本采集方法不同,所得标本质量也不同。常用的标本采集方法有真空采集法、注射器采集法、微时采集法、拭子法、涂片法等。无论用何种方法都应严格进行消毒,避免污染和交叉感染,并尽可能的避免过多损伤周围组织。真空采血器或注射器应清洁、干燥无菌、不漏气。采集血气标本及厌氧菌培养标本时应注意隔绝空气。血管紧张素、醛固酮标本采集后须立即冰水保存。部分检验项目的标本采集时需要使用抗凝剂或防腐剂。常用的抗凝剂有草酸盐、枸橼酸盐、EDTA盐、肝素和肝素钠等。常用的防腐剂有叠氮钠、甲醛、浓盐酸等。必须根据不同的标本要求选用不同的抗凝剂或防腐剂。(一)、血液标本的采集与送检真空采血技术简介:1943年,美国BD公司发明了真空采血技术(又称一次性封闭式采血技术)。从此实验室能采集到优质血样,血样采集技术和血液标本检验前处理得以标准化和规范化。1980年以后,真空采血技术由于其简便快捷、准确可靠、安全有效的特点已在英、法、日、德等医学发达的国家普遍采用,成为采血的标准器械。而我国于上世纪90年代方开始引进使用该项技术。真空采血技术的创造发明是建立在传统的采血方法基础之上的,它将针头、针筒和试管重新设计组合巧妙地形成全封闭的真空采血系统。其主要由两部分组成:(1)由采血针、穿刺针和软管组成的双向无菌针,一端通过皮肤穿刺入静脉,另一端连接真空管。与注射针头不同,采血针尖斜面成15°角,表面特殊润滑更锋利,进针更方便,一次静脉穿刺后,可以抽取单个或多个血样。若患者需采集多管标本,建议采用以下顺序:血培养管或血培养瓶黄头管(分离胶)浅蓝头管(血凝分析)含添加剂的其它采血管B-D标本采集系统血培养瓶黄头管浅蓝头管绿头管黑头管紫头管推荐采血顺序内壁硅化-----防止血细胞附壁导致离心困难及溶血不含添加剂,惰性胶体促凝剂垂直静置1小时后离心。用途:用于血清肝肾功生化,免疫学试验及血库相关实验。血清生化免疫试验管添加剂:含抗凝剂-----枸橼酸钠、血小板稳定剂--潘生丁、嘌呤、腺苷添加剂与血液比例自动保持为准确的1:9。采血后立即温和颠倒混匀8次,六小时内试验。用途---用于PT、APTT、凝血因子试验等血凝试验。血液学凝血试验管含抗凝剂-----肝素锂采血后立即颠倒混匀8次,可立即离心试验。用途:用于快速血浆生化试验或急诊试验。血氨测定鲎试验血浆生化试验管添加剂:液态K3EDTA或固体均匀喷雾态K2EDTA采血后立即颠倒混匀8次,试验前需混匀血样用途:用于血常规、血液学全血试验,直接上机。血液学常规试验管添加剂:抗凝剂------枸橼酸钠添加剂与血液比例自动保持为准确的1:4。采血后立即温和颠倒混匀8次,六小时内试验,试验前需混匀血样。用途:血细胞沉降率试验。血液学血沉试验管血液标本常见溶血原因注射器、针头或容器不干燥;压脉带捆扎时间太久,淤血过久;穿剌不畅,损伤组织过多;抽血速度太慢或太快;血液注入容器时未取下针头;抗凝血混合时,振荡力量过大;血液未完全凝固前进行振荡;血液存放时间过长;静脉采血时,为增加血流而挤压采血部位;血液标本在送检验或运输过程中,挤压或振动过大等。血气分析抽血后应立即送检,一般从标本采集到完成测定,时间不超过30min。遇特殊情况不能立即测定时,应放在含有冰水的容器中,但保存时间不超过2h。葡萄糖耐量试验试验前应禁食12小时;试验前3天,禁服影响试验的药物,停用胰岛素治疗;整个试验过程中,患者不得喝茶、喝咖啡、抽烟、进食。标本采集:(1)清晨空腹抽血2ml作空腹血糖测定;(2)将75g无水葡萄糖溶于200-300ml水中,5分钟内饮完,对儿童可按1.75g/公斤体重计算葡萄糖用量;(3)服糖后准确于30min、1h、2h和3h各取静脉血2ml立即送检,测定血糖浓度;(4)将各标本测定结果,绘成曲线与正常曲线比较。1、适应症:一般患者出现以下一种体征时可作为采血的重要指征:发热(≥38℃)或低温(≤36℃),寒战,白细胞增多(计数大于10.0×109/L,特别有“核左移”时),皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭,血压降低,C反应蛋白升高及呼吸加快,血液病患者出现粒细胞减少,血小板减少等,或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血液培养。新生儿可疑菌血症,应该同时做尿液和脑脊液培养。对入院危重感染患者应在未进行抗菌药物治疗之前,及时做血培养。(二)血培养操作规范皮肤消毒程序:严格执行以下三步法:75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。1%~2%碘酊作用30s或10%碘伏60s,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。75%酒精脱碘:对碘过敏的患者,用75%酒精消毒60s,待酒精挥发干燥后采血。3、培养瓶消毒:75%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞,作用60s,待干后4、静脉穿刺和培养瓶接种程序:在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手套固定静脉,不可接触穿刺点。用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头,直接注入血培养瓶,或严格按厂商推荐的方法采血。血标本接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。立即送检,切勿冷藏。注意:不建议从动脉采血,不宜从导管采血,除怀疑导管相关血流感染,若必须从导管处采血,不要弃去初段血,不用抗凝剂5、采血量:单瓶成人采血量是8~10ml,儿童1~5ml。当采血量不足20ML,应先注入需氧培养瓶,这样首先满足需氧培养瓶的采血量,可以更好的分离出真菌、假单胞菌、窄食单胞菌。6、