重点内容1.动植物发育的异同点植物是一种形态学上简单的有机体,动物的组成则比较复杂;植物细胞具有全能性,动物细胞则不具有;植物既可以用孢子,也可以用配子进行生殖,动物只能形成配子进行生殖;高等植物中具有双受精现象,动物中则不存在这种情况;植物胚胎发生完成于休眠种子的形成,而动物则与之既然不同动物的胚胎发生没有休眠过程。;高等植物的胚形成两个具有不同发育命运的器官系统,动物则没有;植物具有无限的发育程序,动物则没有;植物的形态建成在没有细胞移动的情况下进行,动物细胞在胚胎发育中可移动位置;环境因子在植物发育中扮演主要的角色,动物则在环境中可自由移动,有一定逃避不良环境的能力。2.模式动物、模式植物应该具备哪些特性其生理特征能够代表生物界某一大类群;容易获得并易于在实验室内饲养,繁殖;容易进行试实验操作,特别是遗传分析;生命结构都很简单。个体小,生育期短,生殖能力强、染色体组成简单,染色体数目少,基因组少,且测序完成3.发育生物学研究的主要方法:显微观察、细胞谱系追踪、突变体构建、图位克隆、基因表达分析、转基因、新一代测序技术生物统计和生物信息学,表达谱构建和分析显微观察:使用显微设备进行细胞、组织、结构研究。细胞谱系追踪:细胞间在发育中世代相承的亲缘关系犹如人类家族的谱系称为“细胞谱系”。随着现代分子生物学技术发展,一些新的技术也运用到细胞谱系的研究中去。例如:基因陷阱是一种基于报告基因表达的方法,用在某些器官特异表达的或者35S启动子连接GUS等报告基因来研究细胞谱系,也有人用X射线照射来研究细胞谱系,荧光原位杂交(florescencein-situhybridization,FISH)是一种非放射性原位杂交方法。突变体构建:(重要且基本的实验材料)利用自然发生或人工诱导发生的突变体研究突变基因的结构及其在植物体发育过程中的功能和调控等。图位克隆:又称定位克隆,是新型分离和克隆植物基因的方法之一,在不知道基因的表达产物,在未知基因的功能信息又无适宜的相对表型用于表型克隆时,最常用的基因克隆技术就是图位克隆法。图位克隆是通过分析突变位点与已知分子标记的连锁关系来确定突变表型的遗传基本。原理:用该方法分离基因是根据功能基因在基因组中都有相对稳定的基因座,再利用分子标记技术对目的基因进行精确定位的基础上,用与目的基因紧密连锁的分子标记筛选DNA文库,从而构建目的基因区域的物理图谱,再利用此物理图谱通过染色体步移逐步逼近目的基因或通过染色体登陆的方法,最终克隆目的基因并通过遗传转化实验可以研究目的基因的功能。基因表达分析:是通过快速和详细分析成千上万个EST(expresssequencedtags)来寻找出表达丰富度不同的SAGE标签序列。在此方法中,通过限制性酶切可以产生非常短的cDNA(10-14bp)标签,并通过PCR扩增和连接,随后对连接体进行测序。转基因:是指运用科学手段从某种生物体中提取所需要的基因,将其转入另一种生物中,使与另一种生物的基因进行重组,再从结果中进行数代的人工选育,从而获得特定的具有变异遗传性状的物质。与杂交不同,该技术利用转基因技术可以创造新染色体,改变动植物性状,培育新品种,具有更大的随机性、不确定性。新一代测序技术:4.以拟南芥为例的植物开花调控网络、特别是EMF,FT基因,FLC基因以及CO基因的功能拟南芥开花调控概略图:光周期途径自主途径春化途径赤霉素途径抑制抑制促进抑制COFLCFLCclade促进抑制抑制促进抑制促进(FDFT)SOC1促进促进促进促进促进SEP3FULAP1LYF促进开花emf1对光周期和春化均不敏感,对所有迟开花突变体均具上位性,因此,EMF1是最基本的组成性开花抑制基因,可能编码一种转录抑制因子。EMF2,编码一种多梳蛋白。当EMF突变后,会提前开花,形成胚胎花,而且会由无限花序变为有限花序。FT基因转录翻译产生FT蛋白,即“成花素”。FLC基因是一个转录调节器和强大的抑制开花基因。,可以结合在FT、SOC1.LFY的启动子区域的CArGobox上。CO基因的主要功能是感受长日照信号,参与诱导FT基因的表达,其本身并不能诱导植物茎尖花芽的分化。但FT基因的产物可以在茎尖诱导植物开花。5.植物花型决定的ABCDE模型正常花器官的结构的形成是由A、B、C、D、E5类基因的共同作用而完成的,每一轮花器官的特征的决定分别依赖A、B、C、D、E5类基因中一类或两类基因的正常表达。如果其中任何一类或更多类的基因发生突变或丧失功能,则花的形态发生将出现异常。A类基因控制第1、2轮花萼和花瓣的发育;B类基因控制2、3轮花瓣和雄蕊的发育;C类基因控制第3、4、5雄蕊,心皮,胚珠轮的发育;D类基因控制第5轮胚珠的发育;E类基因调控第1轮以外其他4轮的发育。D突变体缺乏胚珠,E突变体的全部花器官发育为萼片6.植物花粉发育中的关键事件,雄性不育产生的机理及应用胚胎发育的关键事件:极性建立(合子):(1)胚胎发育发生在一个具有高度极性化环境中。卵细胞具有极性,它的极性决定于顶端(核仁)和迹部(液泡)不同细胞器的分布;(2)基顶轴的形成:合子不对称分裂后分裂成基—顶细胞,在第三轮细胞分裂后(16细胞器),顶细胞形成原胚,基细胞形成胚柄。细胞命运决定:合子经过胚胎发育过程中分化出了性质不同的,处于特定位置的细胞群并形成特定的器官原基和组织。细胞程序性死亡:基细胞分裂产生的子细胞,除胚根原细胞之外,其它细胞均不参与胚的形成,而是共同构成胚柄,将胚胎与珠孔端的母体组织连在一起,并在心形胚后期开始进入程序化衰老而退化。基因表达调控:(1)基顶轴极性中wox2/wox8,9调控途径;(2)外层细胞(AtML1和ACR4共同决定)和内层细胞(MPT和MO7)调控基因。花粉发育的关键事件:从造孢细胞小孢子母细胞四分体小孢子花粉主要是两个阶段,阶段一:小孢子发生,第二个阶段:花粉粒形成并释放。这两个阶段主要发生了:小孢子经一次不对称的有丝分裂产生一个营养核一个精核,精细胞再经过一次有丝分裂形成两个精子雄性不育产生的机理及应用:雄性不育:植株由于不能产生正常的花药、花粉或雄配子而导致不育的现象。主要类型:细胞质雄性不育(玉米的T型胞质)。细胞核不育:显性核不育隐性核不育。应用·:利用雄性不育进行杂交育种,3系选育7.植物自交不亲和性类型及决定方式(重点掌握十字花科与蔷薇科)配子体型不亲和(gamatophyticselfincompatibility,GSI,即受花粉本身的基因控制)。GSI发生在花柱中,表现为花粉管生长停顿、破裂;孢子体型不亲和(sporphyricselfincompatibilitySSI,即受花粉亲本基因控制)。SSI发生于柱头表面,表现为花粉管不能穿过柱头。8.拟南芥(或者荠菜)胚胎发育的一般模式及关键事件;胚乳发育中的基因组印迹拟南芥(或者荠菜)胚胎发育的一般模式:伸长期合子;合子经过第一次分裂,产生1个顶细胞(绿色)和一个基细胞(粉红色);四分体胚;16细胞球形胚;早期心形胚;心形胚;成熟胚。关键事件:极性建立(合子):(1)胚胎发育发生在一个具有高度极性化环境中。卵细胞具有极性,它的极性决定于顶端(核仁)和迹部(液泡)不同细胞器的分布;(2)基顶轴的形成:合子不对称分裂后分裂成基—顶细胞,在第三轮细胞分裂后(16细胞器),顶细胞形成原胚,基细胞形成胚柄。细胞命运决定:合子经过胚胎发育过程中分化出了性质不同的,处于特定位置的细胞群并形成特定的器官原基和组织。细胞程序性死亡:基细胞分裂产生的子细胞,除胚根原细胞之外,其它细胞均不参与胚的形成,而是共同构成胚柄,将胚胎与珠孔端的母体组织连在一起,并在心形胚后期开始进入程序化衰老而退化。基因表达调控:(1)基顶轴极性中wox2/wox8,9调控途径;(2)外层细胞(AtML1和ACR4共同决定)和内层细胞(MPT和MO7)调控基因。胚乳发育中的基因组印迹:是一种非孟德尔遗传现象,它是指在配子,合子发生期间来自亲本的等位基因或染色体产生专一性的加工修饰导致后代细胞中两个亲本来源的等位基因有不同的表达活性,又称遗传印记或亲代印记或配子印记。9.根尖及茎尖发育调控机制及异同点,SAM与RAM;植物根的发育(主根,侧根与根毛)根尖及茎尖发育调控机制及异同点,SAM与RAM:植物根的发育(主根,侧根与根毛):植物在根部不同的位置产生不同的侧生根,主根在胚胎的下胚轴的基部就已经形成,然后在主根上形成侧根,但根尖并不形成侧根。主根的中拄鞘侧向生长形成侧根。在根的某些地方形成根毛,但并不形成中柱鞘。侧根在预期的地方膨胀,侧根通常与木质部毗连。侧根继续膨胀,穿过内皮层,表皮形成侧根。在根部分化区,表皮细胞伸长产生根毛,在细胞达到分化区之前,细胞开始膨胀,当根毛长到一定长度以后,表皮细胞停止继续伸长,根中分化为根毛得细胞称为毛状细胞。10.植物幼苗光形态建成的分子机制当光被植物体吸收后,光感受器将与别的信号传导因子相互作用,这可以引起许多分子和形态学上的反应。植物通过光合作用将光能转化成化学能储存起来,光还能以信息的形式作用于植物从而调节植物的分化、生长、发育,使其能够更好地适应外界环境。这种调节通过生物膜系统结构、透性的变化和基因表达的变化促成了细胞的分化及其结构和功能的改变,最终汇集成组织和器官的建成,这就是光形态建成(photomorphogenesis),亦即光调控发育过程。从表型上看,植物在光下的形态结构变化主要表现在4个方面:下胚轴不伸长(hypocotel),子叶伸展(cotyledon),去白化(de-etiolate),SAM开始激活。分子机制:植物体内存在光受体,它能识别光信号并接受光信号,然后通过一系列的光信号传导途径将光信号传导到植物体内。然后调控植物机体从而表现出以上我们描述的形态上的变化。目前存在的光受体主要有光敏色素(phytochromes),隐花色素(cryphtochrome)和趋光性(phototropin)三种光受体。光敏素存在两种形式,且随吸收红光或远红光而互相转化——活化态(Pf)r或钝化态(Pr),当其处于活化态时才能起作用。高等植物体内存在两种类型的光敏色素分子,即光敏素Ⅰ(phyⅠ)和光敏素Ⅱ(phyⅡ)。phyⅠ是一种易溶于水的浅蓝绿色蛋白质,以二聚体形式存在于细胞质中;phyⅡ主要存在于绿色组织中,吸收红光(R)转换为活化态(Pfr)后稳定存在,且在光下、暗中均可合成,phyⅡ也是以二聚体的形式存在。phyⅠ类光敏素,主要接收波长700~750nm的远红光;phyⅡ类光敏素,主要接收波长600~700nm的红光。隐花色素(cryptochrome)在发育过程中则可以调控植物的伸长生长,开花时间以及生物体的生理节奏。隐花色素包括功能相似的CRY1和CRY2两种类型,其中CRY2的C-端较CRY1的短。而它们却都可以阻止下胚轴伸长、诱导CHS基因表达、促进花青素合成,并可以吸收将光敏色素吸收的红光。第三种类型是趋光性受体(丝氨酸/色氨酸激酶),这中类型的光受体可以调控植物的一系列运动反应,包括趋光性、叶绿体运动及气孔开启。到目前为止对于这一对激酶人们已经在植物中发现了两种即Phot1和Phot2。11.植物侧生器官的形成,叶片发育中的极性形成,侧枝发育的激素调控;株高调控;理想株型植物侧生器官的形成:SAM可以产生一系列的植物营养体单位,由叶、腋生SAM和节间组成,最终发育成一些侧生器官,包括叶,侧枝等。叶形成于茎顶端分生组织SAM产生的叶原基侧枝形成过程:SAM产生腋生SAM,腋生SAM分化产生侧芽原基,侧芽原基生长为侧芽,侧芽继续发育成侧枝。叶片发育中的极性形成:叶片的极性包括以下3方面:1、近-远轴:从叶的上表面指向下表面;PHB/PHV选择性的在近轴面表达是叶片近-远轴极性获得的关键。2、中-边轴:从叶的主脉指向边缘;先中脉后叶片,从中肋向边缘。3、基-顶轴:由叶的基部指向尖部KN1影响基-顶轴形成,显性的kn1突变会导致沿着叶片侧生脉的组织形成结,原因:叶的基-顶轴可能是由SAM产生