真菌镜检的实验室操作

真菌镜检的实验室操作----标本采集的质量控制及注意事项郭兵申河北医科大学第二医院皮肤科2015年12月16日真菌镜检的实验流程采集标本标本处理真菌镜检审核报告标本的采集原则躯干四肢创伤性采集头皮及毛发大小新旧位置小新相对内侧柔软细腻避免摩擦一般皮损的选取标本的采集方法第一步：消毒采集刀采集部位二次消毒（采集前、后）1、防止采集部位感染2、预防交叉感染3、确保真菌培养环境第二步：采集皮损界限清楚皮损界限模糊（腹股沟、手掌、脚掌、指/趾甲）特殊部位生理盐水（黏膜部位、创伤较大处）头皮及毛发1、断发2、结痂3、鳞屑4、脓液发内、外孢子、菌丝、糠秕孢子创伤性采集1、疥疮2、水泡丘疹性皮损3、毛囊虫手缝、手掌、手腕屈侧（对应脚部）皮损内侧（水疱型）、分泌物（毛囊炎）面部（鼻翼）背部（脊柱旁）标本处理10％-15％KOHθ溶解角质细胞加盖玻片，压薄涂片如果有必要可酒精灯上微热促溶压片厚角质未溶真菌镜检审核报告真菌镜检的报告为临床定性实验镜下只有糠秕孢子无菌丝的标本应慎重痰类标本应判断“痰标本是否合格”口腔标本应排除长杆菌及放线菌的干扰醋酸白试验方法：用5％冰醋酸水溶液涂抹待检部位，3-5分钟观察，尖锐湿疣病变处可观察到均匀的白色，以此作为一种筛查试验来鉴别不典型病变及亚临床的皮疹。要点：1、醋酸白试验并非HPV感染的特异性试验，有假阳、阴性。（非特异性龟头包皮炎、上皮增厚、外伤擦伤、尿道口炎）2、醋酸白试验的特异性及敏感性尚未确定结果判读醋酸白试验阳性结果：涂抹处白色均匀白色部位界限清楚临近正常皮肤对比阴性结果：排除患者中途部位变化不能排除HPV感染真菌培养真菌鉴定真菌药敏真菌-D-葡聚糖检测（G试验）真菌半乳甘露聚糖检测（GM试验）梅毒TPHA梅毒RPR支、衣原体、淋球菌检测醋酸白试验HPV分子学诊断北大真菌室开展项目