乙肝

乙肝疫苗的研究现状目录乙肝疫苗的背景和研究历史1乙肝疫苗的分类及工艺2市场现状3乙肝疫苗的展望4什么是乙肝乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus,HBV）引起，主要通过血液及体液传播，具有慢性携带状态的一种传染病。乙肝临床表现多样化，表现为食欲减退、恶心、厌油、巩膜黄染、黄色尿、肝脏肿大、肝区痛等。易发展为慢性肝炎、肝硬化，部分病例可转化为原发性肝细胞癌（HCC），是当前严重危害人类身体健康的传染病。HBV感染过程临床检测方法乙型肝炎病毒免疫学标记一共3对，即表面抗原和表面抗体、e抗原和e抗体、核心抗原和核心抗体。由于核心抗原在血中不易测到，试剂盒也不过关，所以还剩两对半抗原抗体。乙肝两对半是国内医院最常用的乙肝病毒(HBV)感染检测血清标志物。其用来排查机体有无感染乙肝病毒，对于乙肝传染性强弱仅能做一个初步的估计指标。平常所说的大三阳，为急性或慢性乙肝，病毒复制活跃，传染性强。小三阳为急性或慢性乙肝，但传染性较弱。HBV-DNA检查可检查乙肝患者体内的乙肝病毒数量、复制指标，能够精确的判断出乙肝病毒在体内的复制、传染强弱情况。乙肝疫苗的分类血源性疫苗此疫苗是用无症状的HBsAg携带者的血液制成并提纯，然后采用胃酶、尿素、甲醛三步化学灭活制备而成。重组乙肝疫苗由重组酵母或重组CHO工程细胞表达的乙型肝炎表面抗原，经纯化、灭活及加入佐剂吸附制成的疫苗。血源性乙肝疫苗血源乙肝疫苗的制备：是以密度梯度离心为主，结合盐析和超滤为辅的综合纯化方法。23以无菌术采集无严重疾病及传染病的无症状HBs纯携带者血浆，进行细菌学、外源性病毒、AIDS检查及HBsAg滴度（1:8）测定。1合格血浆加钙脱纤维，然后加入饱和硫酸铵进行盐析去除血清中的白蛋白，达到初步提纯的目的。再用不同介质和密度的梯度液超速离心，得到较纯的HBsAg颗粒。用胃蛋白酶消化去除剩余杂蛋白，再用尿素和福尔马林破坏隐匿其中的细菌或病毒，最后对样品过滤除菌。将纯化的HBsAg吸附于大颗粒的氢氧化铝上后分装，即为血源性乙肝疫苗成品。血源性乙肝疫苗缺点为防止可能存在的某些病原体在制备过程中逃避灭活，采用了严格、复杂且费时的物理与化学方法纯化HBsAg抗原与灭活措施，使制备成本提高而疫苗产量不高。随着乙肝疫苗长期而广泛的使用，无症状HBsAg携带的数目势必逐渐减少，最终将难以再用他们的血液制备疫苗。重组乙肝疫苗1、重组酵母乙肝疫苗工艺路线生产菌种一代扩增发酵罐收集细胞三级发酵提取HBV表面的抗原基因原始菌种导入宿主细胞目的基因插入质粒扩增接种分离纯化AL（OH）3吸附无菌过滤分装筛选克隆重组酵母乙肝疫苗优点系统操作简单，表达量高，可用于大规模的工业化生产，成本低廉;可以装配成表面抗原颗粒，具有良好的免疫原性。但是酵母表达系统也存在一些不足之处，如表达产生的HBsAg无糖基化，不能外分泌，产物的分离纯化较困难。缺点重组乙肝疫苗2、重组CHO乙肝疫苗工艺路线HBsAg表面的s基因片段重组载体CHO细胞收集细胞液盐析、离心、纯化除菌过滤AL（OH）3吸附甲醛灭活分装转染培养重组ＣＨＯ乙肝疫苗优点CHO细胞表达的重组HepB是高等真核细胞表达产物，其天然结构较低等的真核细胞酵母表达的HBsAg蛋白更适合人体吸收，生产过程中不同于酵母使用硫氰酸盐处理，安全性好。由于哺乳动物细胞对培养条件等方面要求比较高，尤其是传代细胞使用过程中存在的不安全因素，如潜在的致癌因子等，以及哺乳动物细胞系统表达的产品在质量控制方面比较严格，导致成本上升，其推广受到了一定的限制。缺点市场现状（国际）LederleGSKMerckPMSV目前，全球约有20家企业被世界卫生组织认定为疫苗生产商，然而疫苗市场实际上被4家跨国企业所垄断，这4家公司掌握着全球约3／4的疫苗市场。市场现状（国内）引进酵母基因工程乙肝疫苗葛兰素史克默克北京天坛生物（北京生物技术研究所）（3600万只/年)深圳康泰公司(3000万只/年）.上海生物技术研究所（2000万只/年）引进市场现状（国内）1991年中国预防医学科学院病毒学研究所联合长春生物技术研究所等单位研制成功哺乳动物（CHO）细胞表达的基因工程疫苗，已有长春生物技术研究所、华北制药集团、北京华尔盾公司、兰州生物技术研究所、武汉生物技术研究所和成都生物技术研究所获得生产批文，这6家合计年产量估计约为200－600万支。目前国内从事生产CHO细胞乙肝疫苗的6家生产单位中，华北制药的生产技术水平处于绝对领先地位，该企业乙肝疫苗年产量居国内第3位。自主研发市场现状因采用的毒株和培养工艺不一样，所以会引起：产生抗体数量的多少，防疫时间的长短，副反应的大小等方面的差异。国内的疫苗一般可维持5年左右的免疫（保护）作用，进口的可以达到15年以上（这里所讲不是保护性抗体存在15年，而是人体的细胞记忆）。价格相差很大：北京生产的疫苗每针价格在三四十元左右，深圳康泰生产的疫苗每针价格也在三四十元左右，大连生产的疫苗每针价格在七八十元左右。进口的儿童肝炎疫苗价格在284元左右。国产与进口疫苗的区别乙肝疫苗的展望传统疫苗传统疫苗受制作工艺的限制，其保存、使用和接种副反应等方面都容易出现一些问题。联合疫苗治疗疫苗（DNA疫苗、基因工程蛋白疫苗、DC疫苗）乙肝疫苗的展望联合疫苗可减少针剂次数，减轻儿童痛苦，提高疫苗免疫覆盖率。复合物抗原可比单纯抗原更有效地刺激T细胞增殖，诱导细胞介导免疫，产生高水平的抗-HBs，从而降低或清除体内HBV。乙肝DNA疫苗是将乙肝病毒部分蛋白抗原的基因克隆在真核表达载体（如质粒）上，直接注入人体内，使其抗原在体内表达后激发机体产生免疫反应的疫苗。由于它能克服传统疫苗的缺陷，制备简单，安全，有效。同时诱发持久的特异性细胞及体液免疫应答,打破免疫耐受，并可兼作预防和治疗性疫苗，是未来新型疫苗的发展方向，在乙肝的防治中有广阔的应用前景。