临床医学检验红细胞的检查以及临床意义

红细胞检查红细胞（redbloodcell,RBC;erythrocyte）血液中数量最多的有形成分主要成分：血红蛋白主要功能：呼吸载体直径：6.7~9.5um，平均7.2um形状：双凹圆盘状RBC红细胞的生成StemcellEpo原始红细胞早幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞网织红细胞成熟红细胞释放入血72h48h平均寿命120d红细胞计数（redbloodcellcount，RBC）定义：单位体积（每升）血液内的红细胞数量原理：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池，于显微镜下计数一定体积范围的红细胞数，并换算得每升血液中红细胞数(/L)红细胞稀释液稀释液：保护计数细胞，破坏非计数细胞，同时抗凝，要求不含杂质红细胞稀释液：Hayem液，由氯化钠、结晶硫酸钠、氯化高汞组成作用：氯化钠调节渗透压，结晶硫酸钠防止细胞粘连，氯化高汞防腐计数方法手工法：取样→稀释→计数→计算仪器法：电阻抗分析或激光分析手工法10uL末梢血+2ml稀释液混匀稀释充池计数计算成年男性（4.0-5.5）×1012/L成年女性（3.5-5.0）×1012/L初生儿（6.0-7.0）×1012/L外周血红细胞参考值思考手工法VS仪器法？血红蛋白测定（hemoglobin，Hb）血红蛋白的组成珠蛋白（globin）（4条肽链）亚铁血红素（heme）（1个）血红蛋白珠蛋白具有种属特异性，含有两条α链和两条非α链正常成人的Hb包括：HbAα2β2（90%以上）HbA2α2δ2（2~3%）HbFα2γ2（2%以下；新生儿占70%）受激素调节红细胞生成素：直接雄激素：直接和间接自身调节血红素过多氧化为高铁血红素负反馈血红蛋白的合成血红蛋白的代谢珠蛋白氨基酸血红素胆色素（胆绿素、胆红素、胆素原及胆素）血红蛋白还原血红蛋白（reducedhemoglobin，Hbred）氧合血红蛋白（oxyhemoglobin，HbO2）高铁血红蛋白（hemiglobin，Hi）碳氧血红蛋白（HbCO）硫化血红蛋白（SHb）血红蛋白的种类血红蛋白的测定定义指单位体积血液中所含血红蛋白的量参考值成年男性：120-160g/L成年女性：110-150g/L初生儿：170-200g/LHb测定方法分光光度计比色氰化高铁血红蛋白测定法（HiCN）（国际标准参考方法）十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SDS-Hb）（次选方法）叠氮高铁血红蛋白测定法（HiN3）碱羟血红蛋白测定法（AHD575）目视比色沙利法、测铁法、测氧法、比重法、折射仪法、光谱分析法仪器法氰化高铁血红蛋白测定法（HiCN）为国际标准参考方法步骤：取样加转化液（溶血、转化）比色原理：血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白，通过比色根据吸光度测得血红蛋白的浓度。方法：计算：有三种方法求得Hb浓度1.A×367.72.得A值后，在标准曲线上直接查找3.A×KK＝ΣHb/ΣA转化液5ml+血20ul(5min)，比色读吸光度（A）(540nm)标准曲线的绘制用一组已知浓度的HiCN参考液，在分光光度计上分别测定A值，以A为纵座标，血红蛋白参考值为横座标，绘制标准曲线。例如：HiCN参考品Hbg/L：50100150200A：0.140.270.410.54如果标本A为0.32，则标本Hb=0.32×370.37=118.52（g/L）K＝ΣHb/ΣA=370.37优点操作简单呈色快且稳定除SHb外均可检测根据吸光度直接定值方法学评价缺点KCN有剧毒HbCO转化较慢高WBC和高球蛋白血症可致溶液浑浊红细胞计数与血红蛋白测定的临床意义生理变化年龄与性别新生儿：RBC高，两周后下降，6-7岁最低男性：25-30岁高峰女性：13岁-15岁达高值，21岁-35岁低水平，以后渐渐增高精神因素肾上腺素RBC剧烈体力劳动或运动相对缺氧EpoRBC气压降低缺氧代偿性RBC妊娠中后期血液稀释RBC老年人造血功能减退RBC病理变化红细胞和血红蛋白增多相对增多：血浆中水分丢失，血液浓缩所致，如呕吐、腹泻绝对增多：原发性—真性红细胞增多继发性—低氧血症Epo（如心血管病、肺疾病、异常血红蛋白病）—肾上腺皮质功能亢进红细胞生成素代偿性增加生理性：新生儿高原居民病理性：严重慢性心、肺疾患、异常血红蛋白病红细胞生成素非代偿性增加：某些肿瘤或肾脏疾患红细胞和血红蛋白量减少主要见于贫血：由于各种原因引起的全身血循环中红细胞总数、血红蛋白和红细胞比积减少，低于该地区、该年龄及性别组的参考范围低限时称贫血。贫血病因生成减少破坏过多失血过多1）骨髓造血功能减退药物、物理因素、慢性肾衰、再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移2）造血原料不足缺铁（缺铁性贫血）、缺乏VitB12或叶酸（巨幼细胞性贫血）3）红细胞破坏增加溶血性贫血（输血不合、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症）4）红细胞丢失过多各种原因的失血（如消化性溃疡、痔疮、钩虫病）注意问题Hb测定对贫血程度的判断优于RBC计数在某些病理情况下，Hb和RBC的浓度不一定能正确反映全身红细胞的总容量，如：急性失血、水潴留、失水等发生大细胞贫血或小细胞低色素贫血时，RBC计数与Hb浓度不成比例红细胞形态检查红细胞形态观察大小及均匀程度红细胞形状血红蛋白含量细胞内结构红细胞大小改变直径例如小红细胞6um缺铁性贫血大红细胞10um巨幼细胞贫血巨红细胞15um巨幼细胞贫血大小不均增生性贫血ACBA：normalB：megalocyteC：anisocytosis红细胞形状改变球形红细胞遗传性或获得性椭圆形红细胞遗传性靶形红细胞珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病口形红细胞遗传性镰形红细胞异常血红蛋白S（HbS）棘形红细胞遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症新月形红细胞阵发性睡眠性血红蛋白尿症泪滴形红细胞贫血、骨髓纤维化症缗钱状形成纤维蛋白原和球蛋白增高裂红细胞DIC、微血管病性溶血性贫血红细胞形态不整巨幼细胞性贫血spherocyteElliptocyte人为假椭圆红细胞TargetcellstomatocyteSicklecell镰形红细胞acanthocytemeniscocyteTeardropcellRouleauxformationschistocytepoikilocytosis血红蛋白含量改变正常色素性急性失血、再障、白血病低色素性缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血高色素性巨幼细胞性贫血嗜多色性溶血性或急性失血性贫血细胞着色不一铁粒幼红细胞性贫血normochromichypochromichyperchromicpolychromatic人为面包圈红细胞铁粒幼红细胞性贫血细胞内的异常结构●嗜碱性点彩红细胞：RNA，铅中毒●染色质小体（豪焦小体）：核残余物，巨幼细胞贫血、脾切除后●卡波环：脂蛋白变性，巨幼细胞贫血、铅中毒●寄生虫：疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫●有核红细胞：溶血性贫血、造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤、慢性骨髓增生性疾病、脾切除后BasophilicstipplingcellHowellJolly’sbodyCabotring疟原虫（malarialparasite）有核红细胞红细胞的各种改变红细胞比容测定（Hematocrit，HCT）定义：抗凝血在一定条件下离心沉淀，求出单位体积血液中红细胞占的体积百分比（L/L）。与红细胞数量以及红细胞大小有关温氏法（常量，中速离心）微量法——首选常规方法放射性核素法——参考方法折射计法、黏度法、比重法、电阻抗法（仪器）测定方法参考值温氏法：男性0.4~0.54女性0.37~0.47微量法：男性0.42~0.52女性0.37~0.48仪器法：男性0.40~0.52女性0.37~0.48离心法EDTA抗凝离心PlasmPLTWBCRBC-redRBC-O2诊断贫血并判断其严重程度，结合有关指数变化可推断贫血病因，并对贫血进行分类；评估血浆容量有无增减或稀释浓缩程度，有助于补液量的控制。●增高：血液浓缩、原发性或继发性红细胞增多症●降低：贫血、稀释血症（充血性心力衰竭、妊娠、输液过多）临床意义红细胞平均指数通过RBC计数、Hb测定、HCT测定可计算出红细胞平均指数定义：每个红细胞的平均体积。以飞升（fL）为单位计算：MCV=HCT/RBC例如：RBC为3.50×1012/L，Hct为0.36，则：MCV=0.363.50×1012/L=103fL参考值：手工法80~92fL仪器法80~100fL红细胞平均容积（meancorpuscularvolume,MCV）红细胞平均血红蛋白量（meancorpuscularhemoglobin，MCH）定义：每个红细胞内所含平均血红蛋白的量，以皮克（pg）为单位计算：MCH=Hb/RBC例如：RBC为3.50×1012/L，Hb为120g/L，则：MCH=120g/L3.50×1012/L=34.20pg参考值：手工法27~31pg仪器法27~34pg红细胞平均血红蛋白浓度(meancorpuscularhemoglobinconcentration,MCHC）定义：单位容积红细胞的平均血红蛋白浓度，以g/L为单位计算：MCHC=Hb/Hct例如：Hb为120g/L，Hct为0.36，则：MCHC=120g/L0.36=333g/L参考值：320~360g/L临床意义MCV、MCH、MCHC可从不同侧面反映红细胞的病理变化，有利于分析病人红细胞形态特征，进行贫血分类、诊断和鉴别诊断。贫血分类MCVMCHMCHC常见病因正常细胞性正常正常正常再障、急性失血、急性溶血、白血病大细胞性增高增高正常巨幼细胞性贫血单纯小细胞性减低减低正常慢性感染、尿毒症小细胞低色素性减低减低减低缺铁性贫血、地中海贫血、慢性失血贫血的红细胞形态学分类红细胞体积分布宽度（RBCVolumeDistributionWidth，RDW）定义红细胞体积分布宽度是由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出，反映周围血红细胞体积异质性的参数，是反映红细胞大小均一程度的客观指标，常用变异系数（CV）或标准差（S）表示。临床意义与MCV结合进行贫血分类：这种分类法更能反映贫血的病理变化，对贫血的鉴别诊断有一定的价值。诊断缺铁性贫血：IDA的病人95%以上RDW增高，可与β-珠蛋白生成障碍性贫血（88%RDW正常）鉴别。贫血类型常见疾病大细胞均一性部分再障大细胞不均一性巨幼细胞性贫血正细胞均一性急性失血正细胞不均一性再障、部分溶贫小细胞均一性地中海贫血小细胞不均一性缺铁性贫血思考某女性病人，测得红细胞为2.8*1012/L，血红蛋白为65g/L，血细胞比积0.20。1.计算：MCV、MCH、MCHC2.该病人属于哪种类型的贫血3.下一步检测的方向网织红细胞计数（reticulocyte，Ret）Ret是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞，其胞质中残存嗜碱性物质（核糖体和RNA），可被某些染料（如煌焦油蓝等）活体染色呈蓝色网状或颗粒状结构，故而得名。直径：8~9.5um骨髓中网织红细胞数比外周血高约3倍定义根据Ret的形态特征和成熟程度分为五型：0型（花冠型）：有核网织红细胞Ⅰ型（丝球型）：红细胞几乎被网织物充满Ⅱ型（网型）：红细胞中央线团样结构开始松散Ⅲ型（破网型）：网织结构稀小，呈不规则枝点状排列Ⅳ型（点粒型）：呈分散的细颗粒、短丝状ICSH将网织红细胞分为I~IV型方法学选择手工法（manual）染料：新亚甲蓝、煌焦油蓝等新亚甲蓝对Ret染色力强且稳定，为WHO推荐染料。煌焦油蓝应用历史长，但易产生沉淀。原理：RNA带负电荷，与带正电荷的染料形成复合物，呈深染的颗粒状或彼此连缀成网状结构。凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞，即为Ret。玻片法10g/L煌焦油蓝乙醇溶液加染液