小球藻的培养和保存技术新

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小球藻的培养和保存技术如何培养和保存小球藻,是繁殖小丑鱼的另一个关键。小球藻可以买成品的,也不贵。也可以自己培养,但比较麻烦。下面是用小球藻培育和保存的经验。一、小球藻种的获得小球藻种可以从活体小球藻种液获得。初次可以从渔友那取得种液,也可从淘宝商家购买,一般一套(小球藻、小球藻、营养液)100元左右。二、小球藻的有关知识小球藻属于绿藻门,绿藻纲,绿球藻目,卵囊藻科,小球藻属,繁殖时,每个细胞形成2、4、8或16个似亲孢子,似亲孢子经母细胞壁破裂释放。小球藻细胞内含有丰富的叶绿素,光合作用非常强,是其他植物的几十倍。其含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质、食物纤维、核酸及叶绿素等,特别是含有令人注目的生物活性物质糖蛋白、多糖体以及高达13%的核酸等物质。小球藻的直径只有3~8微米,必须用600倍以上的显微镜才能看见,且形状呈圆球形,所以被称为小球藻(绿藻)。小球藻可以生息在淡海水中,它借助阳光、水和二氧化碳,以每隔20小时分裂出4个细胞的旺盛繁殖能力,不停地将太阳能量转化生成蕴涵多种营养成分的藻体,并在增值中释放出大量的氧气。它的光合能力高于其他植物10倍以上,繁殖能力比陆地上的高等植物强100倍以上。小球藻生于热带、温带淡水和海水中,以细胞分裂进行无性繁殖,并可产生配子进行有性繁殖。适宜温度为20-23℃,温度过低会影响小球藻的繁殖。海水小球藻适宜盐度20-30‰。适宜光照5000-10000LX,太弱会抑制光合作用,影响生长和繁殖。适宜水质为pH=8,氮磷钾、二氧化碳含量高的海水。含量太低会抑制生长和繁殖。三、轮虫繁殖用活体小球藻的培育条件温度与繁殖缸相近即可,我用室温8-26℃。盐度与繁殖缸一样,我用30‰,比重1.02。合适的光线,我用自然光,必要时加照明。合适的营养液,可购买或自己配制(方法后面介绍)四、准备一容器做培养缸,可以是玻璃或透明塑料的,容积可根据要繁殖的轮虫的数量确定,我是用食用油瓶改制培养缸,我繁殖轮虫只用5升的就够了。准备加热棒、照明、气泵,根据需要使用。收到活体小球藻后,测出比重(一般较低,1.01左右),然后据此比重调整培养缸的海水比重,加入合适的营养液,初次培养用新配的海水和小球藻种液。然后将种液倒入,放光亮处繁殖。每天搅拌几次,也可用气泵加气,不要加沙头,就像孵化丰年虾一样。当培养缸海水颜色从淡变深绿时(一般7天左右,生长太快的小球藻营养低)就可以使用了。倒出一部分做藻种长期保存(方法后面介绍),剩下的添加海水继续培养3天左右(变深绿色)。五、循环培养。正常培养缸在室温8-26℃时可不加温,不加气,用自然光,节约能源。培养完成后部分把小球藻连水抽出喂养轮虫,每天不断添加海水(可以用滤完轮虫的海水,我是用高质量的沙头过滤轮虫),一周后只剩很少的小球藻了(水变成淡绿色),喂养周期结束,然后调整好比重(一般加淡水),添加营养液,重新进入培养循环。一般5-6个循环小球藻就会遭到其他浮游生物的污染,就必须纯化藻种了(方法后面介绍),有些人藻液被蓝藻(有毒)污染,会造成轮虫和小丑鱼的死亡。六、时间节奏的调整。小球藻培养要掌握节奏,最好轮虫重新培养时达到最深颜色(培养一周左右)。小球藻太多时可连水抽出放低温处(冰箱冷藏室)保存几十天没有问题,还可以用下面方法调整。减慢小球藻增殖的方法:减少照明,降低温度。加快小球藻增殖的方法:增加供气,增加营养液,增加照明,提高温度。一般调整得好,可以和公子小丑鱼产卵和孵化同步,我的公子小丑隔15天产卵一次,小球藻培养8天喂7天,也是15天循环一次。七、小球藻种的保存1。液体保存。用第一次培养好后倒出的一部分藻液(深绿色)做藻种,用水族呼吸袋包装好后再用橡筋扎紧密封,然后放入透气的塑料盒中,再放入冰箱的冷藏室保存即可。使用时取出摇匀(会有沉淀)让温度慢慢升到室温就可以当藻种用了。我最长保存过近一年,还可以正常繁殖。更长的时间就没有试过了。八、小球藻种的保存2.干法保存。在加过营养液的海水中加入琼脂,加热融化后冷却成果冻状,切成小块,然后放入第一次培养好后倒出的一部分藻液(深绿色)中,几天后果冻表面会长有一层小球藻,呈绿色,取出后放入透气的塑料盒中,再放入冰箱的冷藏室保存即可。使用时取出,让温度慢慢升到室温就可以当藻种用了。我最长保存过近一年,还可以正常繁殖。更长的时间就没有试过了。每次从冰箱取出一部分即可,使用和保存比液体更方便。九、小球藻种的浓缩。1、小球藻在光照和营养盐缺乏的情况下会产生沉淀。在培养时,当营养盐较低的时候(生长条件正常,但小球藻不增殖,即浓度不变化),把小球藻装入瓶内,放入冰箱冷藏室,1-3天后就会沉淀,倒出上层清液,即可取得浓缩小球藻液体。用前面介绍的呼吸袋效果更好,小球藻的活力更高。营养盐还可以用离子交换树脂吸附来降低。2、用电泳或阳离子絮凝剂如明矾、聚合氯化铝、聚合硅酸硫酸铝等可以让小球藻沉淀,此方法会引入其他盐类。3、用蛋白分离器打出浓缩小球藻,此方法容易破坏小球藻活性,还会富集其他蛋白质。九、营养液的配制。配方一(适合保存藻种和精细培养)A液:NaNO3150g/LK2HPO44g/LMgSO47.5g/LCaCl3.6g/LNa2CO3100g/LB液:Citricacid0.6g/500mLFerricammoniumcitrate0.6g/500mLEDTANa20.1g/500mLC液:H3BO30.286g/100mLMnCl2·4H2O0.186g/100mLZnSO4·7H2O0.022g/100mLNa2MoO4.2H2O0.039g/100mLCuSO4.5H2O0.008g/100mLCo(NO3)2.6H2O0.005g/100mL使用时,每1000mL海水添加A液10mL,B液5mL,C液1mL即可,即用即配,配后海水不能长期保存,否则营养会失效。配方二(适合一般使用)A:三氯化铁50毫克、氯化锰1.8毫克、硼酸168毫克、乙二胺四乙酸四钠225毫克、磷酸二氢钾100毫克、和硼酸钠500毫克B:氯化锌0.5克、氯化钴0.5克、钼酸铵0.25克、和硫酸铜0.5克将AB倒入1000毫升的海水中,再加入适量维生素B1和B12即可配成营养液。此营养液要即用即配,不能长期保存。配方三(适合临时添加使用)营养液母液配方:硝酸钠50克、磷酸二氢钾5克、柠檬酸铁铵0.5克。将以上营养盐加入1000毫升海水中即可。使用时每1000毫升海水加母液10毫升。此配方容易使小球藻产生沉淀和白化。配方四(适合有经验的使用)蛋分打出污水经加热冷却后使用或经过1微米的物理过滤后使用。一般每1000毫升海水添加10毫升蛋分水(可根据蛋分水的浓度不同作适当的调整)。此配方经济环保,就是打气容易产生气泡和容易引入有害污染。十、小球藻生长慢、沉淀、发白和突然死亡小球藻在温度过低或过高、盐度过高、光照过低、太高或太低、营养盐太低、二氧化碳太低时生长和繁殖很慢甚至死亡。只要保持合适的条件就能保证小球藻的正常生长。小球藻小部分沉淀是正常的,而大量沉淀一般是密度太高或温度过低,还有就是不小心混入促沉淀的化合物(如搞卫生)。一般应每天搅拌几次和加盖,但不能隔绝空气。小球藻发白一般是营养缺乏,及时适量添加营养液即可。小球藻突然死亡的原因一般是温度过高、盐度过高和pH值变化太大。特别是夏天,因温度高,部分小球藻死亡,然后死亡的小球藻又使水酸化,进一步加剧小球藻死亡,最后造成小球藻突然死亡的表象。故夏天温度高时要降温,并充气。

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