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专题八现代生物科技专题训练15基因工程和细胞工程一、单项选择题1．(2012·四川卷，2)将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是()A．发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物B．大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传C．大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等D．生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶2．某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似，只是其热稳定性较差，进入人体后容易失效。现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗食物消化不良，最佳方案是()A．替换此酶中的个别氨基酸，以改善其功能B．将此酶与人蛋白酶进行拼接，形成新的蛋白酶C．重新设计与创造一种蛋白酶D．减少此酶在片剂中的含量3．下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是()A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因组成相同4．(2011·浙江卷，2)培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。若要培育成功，下列叙述正确的是()良种母山羊――→甲卵母细胞良种公山羊――→采集精子――→乙受精卵――→丙早期胚胎――→丁代孕母羊――→繁育试管山羊A．甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使其超数排卵B．乙过程的目的之一是促进卵母细胞和精子的成熟C．丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液D．丁过程中早期胚胎须移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内5．(2011·四川卷，5)北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是()A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达6．(2011·浙江卷，6)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是()A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子7．下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中关于单克隆抗体制备的相关叙述，错误的是()①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞⑥从小鼠腹水中提取抗体⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合A．实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥B．③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆C．⑦过程获得的细胞均可无限增殖D．利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选8．单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基喋呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞混合，加入PEG促融后，再加入含氨基喋呤的培养液。若将这些混合物分装于细胞培养板的小孔中培养(如图所示)，则小孔中的培养物不可能出现的结果是()A．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阴性B．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阳性C．没有活细胞，产生抗体D．没有活细胞，不产生抗体二、多项选择题9．某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导入大肠杆菌细胞，使其表达，产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是()A．导入大肠杆菌的质粒不一定为重组质粒B．RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D．在含氨苄青霉素的培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌10．下列有关植物体细胞杂交的叙述，正确的是()A．有可能把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上B．需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁C．利用聚乙二醇可以促进原生质体融合D．植物体细胞杂交就是将不同的植物体细胞融合成杂种细胞11．关于动物细胞培养，下列叙述错误的是()A．用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B．将所取的组织先用唾液淀粉酶等进行处理使其分散成单个细胞C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D．动物细胞培养只能传至50代左右，所培育的细胞会衰老死亡三、非选择题12．(2012·江苏卷，32)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列。图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由____________________连接。(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是______末端，其产物长度为_______________________________________________________________________。(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有__________种不同长度的DNA片段。(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是______。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加__________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是______________________________。13．据图回答下列问题：(1)图中①～⑤过程所示的生物工程为____________。图示④所示过程中碱基互补配对方式有________种。(2)基因表达载体中的________是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。在上述过程中，不能将目的基因直接导入受精卵中的原因是______________________________________。过程⑤中只用同一种限制酶切割含目的基因的DNA片段或载体，将会______________________(任答一点)。(3)若使预期蛋白质通过乳腺反应器生产，则在图中过程⑨之前要对精子进行筛选，保留含性染色体为________________的精子。在过程⑧⑨中为避免多精入卵的两道屏障依次是________________________________________________________________________。(4)为获得较多的受精卵作为研究材料，图中过程⑥一般注射促性腺激素使供体________。为提高培育成功率，进行过程⑩之前，要对________动物进行________处理。若图中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则在⑧之前须进行体外培养到____________期方能受精。14．如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答下列问题：(1)图中②所示的结构名称是________________。(2)图中过程③④所示的生物技术名称分别是________________、____________。(3)过程③通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它________________________________。(4)过程④通常用②作受体细胞的原因是________________________________________。(5)与一般的异体移植相比，图示方法最大的优点是____________，该种基因治疗所属类型为__________。答案1．B2．A3．D4．A5．B6．C7．C8．C9．AD10．ABC11．BD12．(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖(2)平537bp、790bp、661bp(3)4(4)BamHⅠ抗生素B同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接13．(1)蛋白质工程3(2)标记基因目的基因在受体细胞中不能稳定存在和表达导致自身环化(或目的基因和载体发生任意连接)(3)X透明带反应和卵黄膜封闭作用(4)超数排卵供体、受体同期发情减数第二次分裂中14．(1)内细胞团(胚胎干细胞)(2)核移植技术转基因技术(基因工程、DNA重组技术)(3)含有促进细胞核全能性表达的物质(4)这些细胞分化程度低，全能性高，可以定向诱导分化为各类细胞(5)没有排斥反应体外基因治疗