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1策略8瞭望科技前沿，巧答耳目一新的选修(一、三)高考简答题集训八规范答题步步抢分（30分钟）一、生物技术实践(选修Ⅰ)1．(北京丰台期末)纤维素酶在洗涤剂、棉织品水洗抛光整理和制浆造纸等行业上有巨大的应用价值。科研人员做了如下实验，请分析回答下列问题。(1)图甲的①中接种的是造纸厂附近土壤，②培养基中的碳源应为________。⑤～⑨中分别培养的是通过________染色鉴定法选取透明圈较大的5个菌株。(2)将这5个菌株进行发酵产生的酶，加入到纤维素溶液中，测定______________，由图乙可知3号菌株酶活力最高。(3)对破壁前后的酶活力进行了比较，测得未破壁的酶活力为3540U/mL，已破壁的酶活力为94U/mL。由此可知，该菌所产纤维素酶为________酶。(4)要测定该酶的热稳定性，应采取的实验方案是____________________________________________________________________________________。2．(山东临沂质量检查考试)酵母菌等微生物在人类的日常生活中发挥着越来越大的作用。请回答下列问题。(1)利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现________色。在发酵过程中，随着酒精度的提高，发酵液逐渐呈现深红色，原因是____________________________________________________________________________________。2(2)从野生酵母群中分离纯化酵母菌，最常使用的接种方法是________和________两种。酵母菌适合生活在偏酸性环境中，而放线菌则适合生活在偏碱性环境中，分离二者所用的培养基称为________。(3)对野生酵母菌进行诱变可筛选出具有耐高糖和耐酸性的高产突变菌株，利用PCR技术可大量获得突变菌所携带的特殊基因，在PCR扩增反应中加入引物的作用是________________________，加入DNA聚合酶的作用是________________________________________________________________。(4)使用固定化酶和固定化细胞技术可以提高固定化酶活性，还可以反复使用。目前，常用的方法有________法、________法和物理吸附法。3．(辽宁大连双基测试)请回答下列关于微生物的问题。(1)酸甜香脆的泡菜，能令人胃口大开。在泡菜制作过程中起作用的主要是________菌，其发酵作用的反应式是__________________；制泡菜时，要用白酒擦拭泡菜坛的目的是________，加入陈泡菜水的目的是________。(2)欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入________制成选择培养基进行分离；若想对初步筛选得到的目的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是________。若三位同学用该法测定同一土壤样品中的细菌数量，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下统计结果：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210，240和250，取平均值233；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21，212和256，取平均值163。在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，请指出另两位同学的统计为什么不正确？_______________________________________________。(3)微生物培养的过程中，获得纯培养物的关键是______________________________________________________________________________________。其中对培养皿进行灭菌常用的方法是_______________________________。(4)分析下面培养基的配方：NaNO3，KH2PO4，NaH2PO4，MgSO4·7H2O，KCl，H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述________成分。4．(山东烟台诊断性检测)据某些医学研究机构调查表明，适量饮用红葡萄酒、葡萄汁，对人体有着非同小可的意义。随着人们物质文化生活水平的提高，国内红葡萄酒、葡萄汁的产、销量均逐年增长。请回答下列问题。3(1)在葡萄酒的自然发酵过程中，菌种的来源主要是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。提高果酒的品质，可以直接在果汁中加入人工培养的纯净酵母菌。要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为________；在实际制酒的过程中，先让酵母菌在有氧条件下________，然后在无氧条件下进行________。(2)在微生物的实验室培养中常要进行消毒和灭菌的工作，常用的消毒方法有：______________________(写出2种)；灭菌是指用________杀死环境和物体内外________。(3)为提高果汁的出汁率及使果汁变得澄清，在果汁生产中常用到________酶。(4)为提高果酒的品质及节约生产成本，厂家已尝试选用海藻酸钠作________包埋酵母细胞，这种技术叫做__________________________。二、现代生物科技专题(选修Ⅲ)5．(北京海淀期中)研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂——内皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法，请分析回答下列问题。(1)从肝细胞中分离总RNA，经________获得cDNA，之后经过________扩增内皮抑素基因。(2)扩增的目的基因与pUC18质粒(如图所示)都用EcoRⅠ和BamHⅠ进行双酶切，然后用DNA连接酶进行连接，构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接，还减少了________的连接，提高了重组质粒的比例。(3)大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和Xgal时，Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入________物质。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成________颜色的菌落，原因是__________________。之所以选择大肠杆菌作为基因工程的受体菌，其突出的优点是：_____________________。4(4)从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养，获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板，37℃培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中，72h后在显微镜下观察细胞存活情况并________，实验结果如下表所示。粗提表达产物浓度/(μg·mL－1)0246810活的内皮细胞数目(×102)126210.50.5实验结果说明__________________________________________________________________________________________________________________。6．(2012·山东临沂)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图为抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答下列问题。(1)制备单克隆抗体过程中要用到________和________技术。(2)在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤所阻断，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径。①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的________(成分)具有筛选杂交瘤细胞的作用。②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_______________________________。③培养杂交瘤细胞的条件包括：无菌、无毒的环境，营养，________，____________。(3)哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能，这是因为_____________________________________________________________；在胚胎移植技术中收集到胚胎后要进行________、________以及移植后的检查等步骤；胚胎移植时可利用激素对受体进行________处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生________反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能。5(4)为了更多地生产出人HCG，有人构思采用胚胎分割技术，把一个胚胎分割成很多很多份数，进而培育出大量相同的转基因牛。你认为这种方法可行吗？________，为什么？________________________________________________。7．(2012·泰安期末)绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光。借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠，如图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程(见下图)。请根据上述材料回答下列问题。(1)用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必须有启动子、________、________和________等。图中过程②常用的方法是________；过程③利用的生物技术是________；在进行过程④前，利用________可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠。(2)GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达，也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能，且对细胞无毒性，因此GFP基因可以作为基因表达载体上的_______________________________________。(3)目前科学家们通过________工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程是直接改造GFP分子，还是改造GFP基因？________。该工程的基本流程是______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。参考答案1．(1)纤维素刚果红(2)还原糖含量(3)胞外(4)取五支装有等量菌液的试管，置于五种不同温度条件下，培养相同的时间，测定还原糖含量，若测得还原糖含量变化不大，则说明该菌的热稳定性较好2．(1)灰绿红葡萄皮的色素进入发酵液6(2)平板划线法稀释涂布平板法选择培养基(3)结合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位点(或使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸)催化合成DNA子链(4)包埋化学结合3．解析本题考查泡菜的制作及微生物的分离、培养与计数。泡菜中含有乳酸，因此通常起作用的是乳酸菌，制作中用白酒擦拭菜坛的目的是消毒，加入的陈泡菜水中含有所需的乳酸菌菌种。分离细菌的选择培养基应在培养基中加入与该菌代谢不同于其他细菌的物质，如题中的细菌可分解有机磷农药，而其他的细菌通常则不能分解有机磷农药，因此加入有机磷农药就可起到选择作用。稀释涂布平板法可对细菌进行纯化并计数。微生物培养中应特别注意外来杂菌的污染，对培养皿常用的灭菌方法是干热灭菌法。分解尿素的细菌可从尿素中获得氮源，因此所提供的培养基中不应加入NaNO3，而应加入尿素及葡萄糖，作为氮源和碳源。答案(1)乳酸C6H12O6――