第1页共17页南安一中2012届高中生物教材实验复习材料生物考试说明对教材实验要求:理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。学会使用显微镜实验目的:认识显微镜的结构,初步掌握使用显微镜的方法。一、光学显微镜的结构、呈像原理、放大倍数计算方法目镜无旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越小;物镜有旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越大。呈像原理:映入眼球内的是倒立放大的虚像。放大倍数:目镜和物镜二者放大倍数的乘积注:显微镜放大倍数是指直径倍数,即长度或宽度,而不是面积。二、显微镜的使用:置镜(装镜头)→对光→置片→调焦→观察1.安放:略偏左2.对光:选低倍镜→选较大的光圈→选反光镜(平面反光或凹面聚光)(左眼观察)注:调节视野亮度只可用遮光器和反光镜3.观察:侧面观察降镜筒→左眼观察找物像→细准焦螺旋调清晰(先低倍镜)4.低倍转高倍:顺序:移装片→转转换器→调反光镜或光圈→调细准焦螺旋注:换高倍物镜时只能移动转换器(调光圈),换镜后,只准调节细准焦和反光镜(或光圈)。问1:低倍镜换为高倍镜后,若看不到或看不清原来的像,可能原因?(ABC)A、物像不在视野中B、焦距不在同一平面C、载玻片放反,盖玻片在下面D、未换目镜故装片不能反放。问2:放大倍数与视野的关系:放大倍数越小,视野范围越大,看到的细胞数目越多,视野越亮,物镜与载玻片的距离越长放大倍数越大,视野范围越小,看到的细胞数目越少,视野越暗,物镜与载玻片的距离越短5.装片的制作和移动:制作:滴清水→放材料→盖片移动:物像在何方,就将载玻片向何处移。(原因:物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反)6.污点判断:1)污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上;2)污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;换物镜后消失,则位于物镜7.完毕工作:整理归位实验一:用显微镜观察多种多样的细胞(必修一P7)一.实验目的:1)使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点2)运用制作临时装片的方法二.实验原理:利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:可以看到叶绿体、线粒体等细胞器(部分需要染色),从而能够区别不同的细胞。三.方法步骤:第一步:在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央第二步:用转换器转过高倍物镜第三步:转动反光镜使视野明亮第四步:观察并用细胞准焦螺旋调焦至物像清晰。问(1)是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?为什么?第2页共17页加热提示:低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。问(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?提示:如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?提示:不行。用高倍镜观察,只需微调即可。转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。四:讨论:1.使用高倍镜观察的步骤和要点是什么?答:(1)首先用低倍镜观察,找到要观察的物像,移到视野的中央。(2)转动转换器,用高倍镜观察,并轻轻转动细准焦螺旋,直到看清楚材料为止。2.试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点,并描述它们之间的差异,分析产生差异的可能的原因?答:这些细胞在结构上的共同点是:有细胞膜、细胞质和细胞核,植物细胞还有细胞壁。各种细胞之间的差异和产生差异的可能原因是:这些细胞的位置和功能不同,其结构与功能相适应,这是个体发育过程中细胞分化产生的差异。实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二.实验原理:1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与()发生作用,可生成()的Cu2O沉淀。如:葡萄糖+Cu(OH)2葡萄糖酸+Cu2O↓(砖红色)+H2O,即Cu(OH)2被还原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成()(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。淀粉遇碘变()。3.蛋白质与()发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。)三.实验材料1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,易于观察。)2.做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。四、实验试剂斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。五、方法步骤:(一)可溶性糖的鉴定操作方法注意问题解释1.制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。第3页共17页2.取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量..混匀成斐林试剂;斐林试剂很不稳定4.沸水浴,观察到溶液颜色:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;(二)脂肪的鉴定操作方法注意问题解释花生种子浸泡、制片浸泡3~4小时时间过短,不易切片,时间过长,组织较软,不易成形。切薄,便于观察。在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。染色时间不宜过长。苏丹Ⅲ→橘黄色苏丹Ⅳ染液→红色用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精(),吸去酒精。洗浮色时间不宜过长不去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将脂肪颗粒溶解成油滴。低倍镜下找薄片的最薄处,可看到有染成橘黄色或红色圆形小颗粒装片不宜久放。时间一长,油滴会溶解在乙醇中。三、蛋白质的鉴定操作方法注意问题解释制备组织样液。(浸泡、去皮研磨、过滤。)黄豆浸泡1至2天容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定:加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。A液和B液要分开配制,储存。鉴定时先加A液后加B液。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供碱性的环境。A、B液同时加入,会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。若稀释不够,蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管也不易洗干净。附:淀粉的检测和观察:取2ml待测样液,加2滴碘液,观察颜色变化。碘液不要滴太多以免影响颜色观察答案:斐林试剂、砖红色、橘黄色、蓝色、双缩脲试剂、洗去浮色实验三观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)一.实验目的:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法二.实验原理:1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现(),吡罗红使RNA呈现()。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和第4页共17页RNA在细胞中的分布。2.盐酸能够改变()的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。三.方法步骤:操作步骤注意问题解释取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净,滴一滴质量分数为()溶液,用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞,将载玻片在酒精灯下()防止污迹干扰观察效果;保持细胞原有形态消毒为防止感染,漱口避免取材失败固定装片水解将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中,用300C水浴保温5min改变细胞膜通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s洗去残留在外的盐酸染色滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min染色观察先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰后才换用高倍物镜观察使观察效果最佳答案:绿色、红色、细胞膜、0.9%的NaCl、烘干实验四用高倍镜观察线粒体和叶绿体(必修一P47)一.实验目的:使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。二.实验原理:叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。()是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现()三.实验材料:观察叶绿体时选用:藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是:叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为实验的首选材料。若用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含()。四.方法步骤:步骤注意问题分析1.制片。用镊子取一片黑藻的小叶,放入载玻片的水滴中,盖上盖玻片。制片和镜检时,临时装片要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失水收缩,将影响对叶绿体形态和分布的观察。2.低倍镜下找到叶片细胞3.高倍镜下观察叶绿体的形态和分布4.制作人的口腔上皮细胞临时装片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液→用牙签取碎屑→盖盖玻片5.观察线粒体线粒体蓝绿色,细胞质接近()色。第5页共17页答案:健那绿染液、蓝绿色、叶绿体、无讨论:1、细胞质基质中的叶绿体,是不是静止不动的?为什么?答:不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动,这种运动能随时改变椭球体的方向,使叶绿体既能接受较多光照,又不至于被强光灼伤。2、叶绿体的形态和分布,与叶绿体的功能有什么关系?答:叶绿体的形态和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多,这可以接受更多的光照。实验五:观察植物细胞的质壁分离和复原(必修一P61“探究”)一、实验目的:1.学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。2.了解植物细胞发生渗透作用的原理。二.实验原理:1.质壁分离的原理:当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时(浓度差),细胞就会通过()作用而失水,细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁分离。2.质壁分离复原的原理:当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而吸水,外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。三、实验材料:紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈()色,易于观察。()的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。四、实验步骤:步骤注意问题分析1.制作洋葱表皮的临时装片:在载玻片上滴一滴水,撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平,盖上盖玻片。盖盖玻片应让一侧先触及载玻片,然后轻轻放平。防止装片产生气泡。2.观察洋葱细胞可看到:液泡大,呈紫色,()紧贴着细胞壁。液泡含花青素,所以液泡呈紫色。先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。3.观察质壁分离现象。从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。镜检。观察到:液泡(),颜色(),原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满()溶液。重复几次糖浓度不能过高蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度,细胞通过渗透作用失水,细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大,液泡和原生质层不断收缩,所以发生质壁分离。为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。否则,细胞严重失水死亡,看不到质壁分离的复原。4.观察细胞质壁分离的复原现象。从盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。镜检。观