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实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布P26实验原理：甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现出绿色，而吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。实验步骤：（在实验过程中材料死亡）步骤器材与试剂作用与原理（1）制片①将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴②载玻片烘干10.9%的NaCl溶液防止细胞破裂2维持细胞形态3烘干使细胞固定在载玻片上（2）水解8%HCl中30℃保温5分钟盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。（3）冲洗用蒸馏水缓流冲洗10分钟（4）染色2滴吡罗红甲基绿混合染色剂染色5分钟甲基绿使DNA染上绿色吡罗红使RNA染上红色（5）观察显微镜下观察实验结果：细胞核呈绿色,细胞质呈红色.分布：真核生物的DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。实验二检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质P18实验原理：还原糖与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀；脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或被苏丹Ⅳ染液染成红色；蛋白质与双缩脲试剂发生作用产生紫色反应。一、还原糖的检测还原性糖：有还原性基团——游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖。鉴定原理：游离的醛基与斐林试剂（新配置的Cu（OH）2）反应生成砖红色的Cu2O沉淀。非还原性糖：淀粉、纤维素、蔗糖、糖元。(1)材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。(2)试剂：斐林试剂(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，现配现用。(3)步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴（50℃—65℃）加热2min左右→观察颜色变化(浅蓝色→棕色→砖红色)二、脂肪的检测（该实验需使用显微镜）(1)材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。(2)步骤：制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央染色(滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)制作装片(滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)三、蛋白质的检测原理：在碱性条件下，Cu2+与肽键反应生成紫色络合物。(1)试剂：双缩脲试剂(A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液)(2)步骤：试管中加样液2mL→先加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→后加双缩脲试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)实验三用显微镜观察多种多样的细胞P71、显微镜的使用：取镜→安放→对光→压片→观察→收放。(1)低倍镜使用：(观察任何标本都必须先用低倍镜，且标本应薄而透明)(2)高倍镜使用：先使用低倍镜确定目标→移动装片，使目标位于视野中央→转动转换器，换用高倍镜→调焦(转动细准焦螺旋)(视野较暗,可调反光镜或光圈)2、显微镜使用注意事项：(1)成像特点：放大倒立的虚像。(2)放大倍数计算：物镜的放大倍数×目镜的放大倍数。放大倍数指的是物体的长或宽。(3)物像的移动方向与装片的移动方向相反。（移动装片时，移动方向应与物象所在位同向移动）(4)低倍镜下成像特点：物像小、细胞数目多、视野亮。高倍镜下成像特点：物像大、细胞数目少、视野暗。(5)物镜和目镜的判断方法：物镜有螺纹，目镜无螺纹。(6)放大倍数的判断方法：目镜：镜头长放大倍数小，镜头短放大倍数大。物镜：镜头长放大倍数大，镜头短放大倍数小。物镜与装片之间的距离：距离近放大倍数大，距离远放大倍数小。(7)显微镜的有关性能参数。最重要的性能参数是分辨率，而不是放大倍数。高倍镜的使用时注意(1)低倍镜使用过程中，下降镜筒时必须双眼侧视镜筒，防止镜头撞到玻片。(2)低倍镜找到物像后，换上高倍镜时，观察过程中只能使用细准焦螺旋。实验四用高倍镜观察线粒体和叶绿体P471、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞（实验过程中始终为活材料）2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。用健那绿染液（活体染色剂）染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。步骤操作方法目的与作用（1）取材①新鲜的藓类的叶②菠菜叶下表皮略带一些叶肉①藓类叶为单层细胞②下表皮容易撕取,要略带些叶肉（2）制片注意叶片不能太干了，保持有水的状以免影响细胞活性态（3）观察叶绿体呈椭圆形，可随细胞质的流动而流动。叶绿体在弱光下以最大面积（长轴）转向光源，在强光下以最小面积（短轴）转向光源。（1）取材漱口，口腔内侧壁上轻刮几下（2）染色将口腔细胞放在健那绿液滴上（3）观察盖上盖玻片，显微镜下观察，线粒体被染成蓝绿色问题1、为什么不用植物细胞来观察线粒体？植物线粒体相对较少，叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。2、如果观察发现染色不足，如何补色？在盖玻片一侧滴加健那绿液，另一侧用吸水纸吸实验七观察植物细胞的质壁分离和复原P61原理：①原生质层具有选择透过性②细胞液浓度细胞外溶液浓度时，细胞吸水;细胞液浓度细胞外溶液浓度时，细胞失水③细胞壁与原生质层的伸缩能力不同。1、条件：细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡2、材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡)，质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。（实验过程中始终为活材料）3、步骤：制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一側滴蔗糖溶液,另一側用吸水纸吸引（引流法）→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一側滴清水,另一側用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)（自身对照）4、结论:细胞外溶液浓度细胞内溶液浓度，细胞失水质壁分离细胞外溶液浓度细胞内溶液浓度，细胞吸水质壁分离复原应用：1、可以用于测定细胞液的浓度2、可以用于判断细胞的死活注意问题：1、细胞发生质壁分离后，细胞壁与细胞膜之间的空隙充满的是0.3mg/mL蔗糖溶液。（细胞壁是全透的）2、动物细胞能发生渗透作用但不会发生质壁分离。（无细胞壁）注意问题1、选材：选取紫色洋葱鳞片叶外表皮。其细胞液为紫色，在显微镜下与无色透明的细胞壁容易区分，观察到的质壁分离和复原效果明显。另外，取新鲜水绵、黑藻叶、南瓜表皮也可以做这个实验。2、试剂：选用0.3g/ml蔗糖糖溶液。浓度过高（如0.5g/ml蔗糖溶液），细胞质壁分离速度虽然很快，但不久就会将细胞杀死，细胞不能进行质壁分离复原;若浓度过低，则不能引起细胞质壁分离或速度太慢。另外，8%食盐溶液、5%的硝酸钾溶液、一定浓度的尿素、甘油……也可使植物细胞发生质壁分离，但在引起质壁分离后可自动复原。（实验中不宜选用）3、时间的控制：做完质壁分离的实验后，不久就要做质壁分离复原实验。避免使质壁分离的细胞长时间处于较高浓度的外界溶液中，细胞过度失水而导致死亡，从而观察不到质壁分离复原的现象。例题：下面是一组用新鲜洋葱表皮进行的实验处理和结果，请分析回答：实验分组处理方法实验结果第1组①将材料置于30%蔗糖溶液中①发生质壁分离②然后将材料移至蒸馏水中②发生质壁分离复原第2组③将材料置于60%蔗糖溶液中③迅速发生质壁分离④然后将材料移至蒸馏水中④质壁分离不能复原第3组⑤将材料置于7%的尿素溶液中⑤开始发生质壁分离，然后逐渐自动复原第4组⑥将材料放入100℃热水中3min后取出，重复第1组实验⑥不发生质壁分离(1)洋葱表皮细胞在第1、2、3组实验中均发生了质壁分离现象，其内部结构基础和外在条件分别是。(2)比较第1和第2组实验结果的差异，说明。(3)比较第1和第3组实验结果，出现实验结果差异性的原因是。(4)比较第1和第4组实验结果，出现实验结果差异性的原因是。答案：(1)内部结构基础是有原生质层和原生质层内外两个溶液体系的存在;外在条件是原生质层内外两个溶液体系存在浓度差(2)高浓度溶液加快质壁分离现象的出现，但由于引起细胞过度失水，导致细胞死亡，使质壁分离复原不能发生(3)尿素是可能被细胞主动吸收的小分子物质，随着尿素分子不断的进入细胞内部，当细胞内外浓度趋于一致时，质壁分离就会自动复原(4)高温致使细胞死亡，死亡的细胞原生质层失去选择透过性，不能发生质壁分离实验六探究影响酶活性的因素P83原理：淀粉遇碘后，形成蓝色的复合物。淀粉酶可以使淀粉水解成麦芽糖，麦芽糖遇碘后，不形成蓝色的复合物。1、材料：新配置的淀粉酶溶液，可溶性淀粉溶液；新鲜肝脏研磨液，过氧化氢溶液等。2、步骤：(1)探究温度对酶活性的影响操作注意问题解释取3支试管，编上号，然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液另取3支试管，编上号，然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，分别放入热水（约600C）、沸水和冰块中，维持各自的温度5min不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min保持各自温度时间不能太短，使反应充分进行。淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录碘液不能滴加太多防止影响实验现象的观察分析：在温度对酶活性的影响的实验中，60℃的温度条件下，酶活性最大，试管中的淀粉被分解，滴入碘液后不会变蓝。100℃条件下，淀粉酶已失去活性，O℃条件下，低温抑制淀粉酶的活性，但没有失活。所以100℃和O℃试管中的淀粉都没有被分解，滴上碘液后都会变蓝。实验可以证明：酶的催化作用需要适宜的温度条件，温度过高和过低都将影响酶的活性。注：该实验过程中不能用斐林试剂替代碘液，因为斐林试剂使用时需水浴，会改变实验的自变量。(2)探究pH对酶活性的影响实验原理：过氧化氢(H2O2)在过氧化氢酶的催化作用下，可以分解成水和氧气，可以放入带火星的木条，看能否复燃来检测是否有氧气产生。分析：2号试管内加入了盐酸，溶液的pH较低，3号试管内加入了氢氧化钠，溶液的pH较高，在过低或过高pH环境中，过氧化氢酶失去活性，不能使过氧化氢分解，没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱，溶液近似中性，过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气，使木条复燃。实验可以证明：酶的催化作用需要适宜的pH条件，pH过高和过低都将影响酶的活性，甚至使酶失去活性。步骤项目试管1试管2试管31加入过氧化氢溶液2mL2mL2mL2加入蒸馏水1mL——3加入盐酸溶液—1mL—4加入NaOH溶液——1mL5滴加肝脏研磨液2滴2滴2滴637℃水浴5min5min5min7检验放入带火星的木条复燃不复燃不复燃试管内气泡产生量有气泡产生没有气泡产生没有气泡产生实验八叶绿体色素的提取和分离P971、原理：(1)叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇(或丙酮)中，所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。(2)不同的色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢，因而可用层析液将不同色素分离。3、注意事项：研磨时，加SiO2为了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。提取叶绿体色素的关键是：①叶片要新鲜、浓绿；②研磨要迅速、充分；③滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以免滤液挥发。分离叶绿体色素的关键是：一是滤液细线要细且直，而且要重复划几次；二是层析液不能没及滤液线，否则会导致滤纸条上色素带不明显或没有分离开。4、结果分析：①从色素带的宽度可知色素含量的多少依次为：叶绿素a叶绿素b叶黄素胡萝卜素;②从色素带的位置可知色素在层析夜中溶解度大小依次是：胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素b;③在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a与叶绿素b，距离最远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。5、叶绿素主要吸收红光和蓝紫光，类胡萝卜素主要吸收蓝紫光