高中生物选修三专题一基因工程第一节小题片

专题1基因工程（1）基本工具（一）基因工程又叫___________________或___________________。原理是_______________，操作水平是________水平。优点：打破物种界限；_________地改造生物的____________。（二）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——__________________________（_________）（1）来源：主要从____________中分离纯化出来。（2）功能：使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的____________________断开。（3）特点具有_______性,能识别__________________________________，并在______________。（4）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：_____________和_________。2.“分子缝合针”——____________________（1）两种DNA连接酶（___________________和_____________）的比较：①相同点：都缝合_________________。②区别：前者只能连接_______末端；后者能缝合两种末端，但连接_______的之间的效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将_____________________加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，需要模板；DNA连接酶是连接________________的末端，形成磷酸二酯键，不需要模板。3.“分子运输车”——______（1）载体具备的条件：①能够稳定保存并_______；②有一至多个____________________，供外源DNA片段插入。③含有____________，便于鉴定和选择。④对受体细胞无害。（2）最常用的载体是______，化学本质是__________。（3）其它载体：_____________________。专题1基因工程（一）基因工程又叫___________________或___________________。原理是_______________，操作水平是________水平。优点：打破物种界限；_________地改造生物的____________。（二）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——__________________________（_________）（1）来源：主要从____________中分离纯化出来。（2）功能：使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的____________________断开。（3）特点具有_______性,能识别__________________________________，并在______________。（4）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：_____________和_________。2.“分子缝合针”——____________________（1）两种DNA连接酶（___________________和_____________）的比较：①相同点：都缝合_________________。②区别：前者只能连接_______末端；后者能缝合两种末端，但连接_______的之间的效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将_____________________加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，需要模板；DNA连接酶是连接________________的末端，形成磷酸二酯键，不需要模板。3.“分子运输车”——______（1）载体具备的条件：①能够稳定保存并_______；②有一至多个____________________，供外源DNA片段插入。③含有____________，便于鉴定和选择。④对受体细胞无害。（2）最常用的载体是______，化学本质是__________。（3）其它载体：_____________________。专题1基因工程（一）基因工程又叫___________________或___________________。原理是_______________，操作水平是________水平。优点：打破物种界限；_________地改造生物的____________。（二）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——__________________________（_________）（1）来源：主要从____________中分离纯化出来。（2）功能：使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的____________________断开。（3）特点具有_______性,能识别__________________________________，并在______________。（4）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：_____________和_________。2.“分子缝合针”——____________________（1）两种DNA连接酶（___________________和_____________）的比较：①相同点：都缝合_________________。②区别：前者只能连接_______末端；后者能缝合两种末端，但连接_______的之间的效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将_____________________加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，需要模板；DNA连接酶是连接________________的末端，形成磷酸二酯键，不需要模板。3.“分子运输车”——______（1）载体具备的条件：①能够稳定保存并_______；②有一至多个____________________，供外源DNA片段插入。③含有____________，便于鉴定和选择。④对受体细胞无害。（2）最常用的载体是______，化学本质是__________。（3）其它载体：_____________________。专题1基因工程（一）基因工程又叫___________________或___________________。原理是_______________，操作水平是________水平。优点：打破物种界限；_________地改造生物的____________。（二）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——__________________________（_________）（1）来源：主要从____________中分离纯化出来。（2）功能：使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的____________________断开。（3）特点具有_______性,能识别__________________________________，并在______________。（4）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：_____________和_________。2.“分子缝合针”——____________________（1）两种DNA连接酶（___________________和_____________）的比较：①相同点：都缝合_________________。②区别：前者只能连接_______末端；后者能缝合两种末端，但连接_______的之间的效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将_____________________加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，需要模板；DNA连接酶是连接________________的末端，形成磷酸二酯键，不需要模板。3.“分子运输车”——______（1）载体具备的条件：①能够稳定保存并_______；②有一至多个____________________，供外源DNA片段插入。③含有____________，便于鉴定和选择。④对受体细胞无害。（2）最常用的载体是______，化学本质是__________。（3）其它载体：_____________________。专题1基因工程（2）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因。2.基因文库包括基因组文库和cDNA文库。二者的区别：文库类型文库大小基因中是否有启动子基因中是否有内含子基因多少物种间基因交流cDNA文库小无无某种生物的部分基因可以基因组文库大有有某种生物的全部基因部分基因可以3.人工合成目的基因的两个条件：基因比较小；核苷酸序列已知。4.PCR技术扩增目的基因（1）PCR是多聚酶链式反应的缩写，原理DNA双链复制。（2）过程：第一步变性：加热至90～95℃，DNA解链，不需要解旋酶；第二步复性：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链。变性和复性利用了DNA的热变性原理；第三步延伸：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建基因表达载体的组成：除了目的基因外，还必须有启动子、终止子、标记基因等。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位。标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞常用的导入方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射法。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。第四步：目的基因的检测和鉴定1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是分子杂交技术。3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如：转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。参考答案专题1基因工程第一节：(一)基因拼接技术DNA重组技术基因重组分子定向遗传性状(二)1.限制性核酸内切酶限制酶原核生物磷酸二酯键特异性特定的核苷酸序列切割特定切点粘性末端平末端2.DNA连接酶E.coliDNA连接酶T4DNA连接酶磷酸二酯键黏性平末端单个的脱氧核苷酸两个DNA片段载体复制限制酶切点标记基因质粒DNAλ噬菌体的衍生物、动植物病毒