鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治

吉林农业科技学院学士学位论文论文题目：鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治年级专业：09动植物检疫学生姓名：李忠玲学号：0908611019指导教师：薛会明评阅教师：完成日期：2013年6月9日吉林农业科技学院鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治-I-鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治学生:李忠玲专业:动植物检疫指导教师:薛会明摘要吉林市周边一肉鸡养殖场饲养的28日龄肉鸡2000羽，突然发病，表现为高度虚弱、颤抖、水样腹泻，剖检可见法氏囊出现水肿，腺胃与肌胃交接处有出血带，肾脏肿大，有尿酸盐沉积。经过实验室诊断，采取琼脂扩散方法诊断为鸡传染性法氏囊病，同时进行细菌分离鉴定，分离到致病性大肠杆菌，最终确诊为鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染。经过高免卵黄抗体特异治疗，同时大肠杆菌药敏试验后采用高敏的丁胺卡那霉素配合氟苯尼考等综合治疗，最终控制疫情。关键词：法氏囊大肠杆菌混合感染；诊断；药敏试验鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治ThediagnosisofchickeninfentiousbursalandescherichiacolimixedinfectionName:ZhonglingLiMajor:AnimalandPlantQuarantineTutor:HuimingXueAbstractTereisaabroilerfarm28daysoldchicken2000feather,injilincity,suddenonset,showedahighdegreeofweakness,tremor,waterydiarrhea,necropsythebursaledema,proventriculusandgizzardjunctionalbleeding,renalenlargement,uricacidsaltdeposition.Afterthelaboratorydiagnosis,taketheagardiffusionmethodforthediagnosisofchickeninfectiousbursaldisease,andisolationandidentificationofbacteria,isolationofpathogenicEscherichiacoli,finaldiagnosisofchickeninfectiousbursaldiseasevirusmixedinfectionwithE.coli.Aftertheyolkantibodytherapy,whileEscherichiacoliafterdrugsensitivitytestsusingGaoMinamikacinwithflorfenicolintegratedtreatmentprograms,andultimatelycontroltheepidemic.KeyWords：BursalandEscherichiacolimixedinfection；Diagnosis；Drugsensitivitytest鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治目录摘要..................................................................IAbstract.................................................................II正文..................................................................1前言....................................................................11临床症状................................................................22病理变化................................................................23实验室诊断..............................................................23.1病毒分离鉴定......................................................23.1.1病原体分离...................................................23.1.2琼扩试验.....................................................33.1.3结果判定.....................................................33.2大肠杆菌的分离与鉴定..............................................33.3动物感染试验......................................................34治疗....................................................................44.1特异治疗..........................................................44.2对症治疗..........................................................44.2.1抗病毒治疗...................................................44.2.2抗菌治疗.....................................................44.2.3中药治疗.....................................................45预防....................................................................45.1法氏囊病的免疫程序................................................55.2大肠杆菌的预防....................................................5参考文献...............................................................6致谢....................................................................................................................................7鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治–1–正文前言鸡传染性法氏囊病是由法氏囊病毒引起的雏鸡的急性高度接触性传染病。特征是法氏囊肾脏肿大苍白、有尿酸盐沉积、腿肌和胸肌出血、肌胃和腺胃交界处条状出血。导致鸡免疫力下降或免疫抑制，常继发其他疾病。大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的一种非接触性疾病，常引起鸡气囊炎、关节滑膜炎、脐炎等不同病变。两者混合感染不仅影响鸡的生长发育，更导致鸡的发病率死亡率升高，给养殖业造成巨大的经济损失。传染性法氏囊病自然感染仅见于鸡，主要发生于2-15周龄的鸡，以3-6周龄最易感，本病发病突然，1-2d传遍全群，5-7d死亡达到高峰，以后开始下降。法氏囊病变明显，发病特点是发病突然，感染率高，尖峰死亡曲线，迅速恢复，死亡率差异大，3%-60%不等。部分病鸡的病程可拖延2-3周，但耐过鸡往往发育不良，生长缓慢[1]。暑期参加学校组织的顶岗实习，来到了九江朝鸡场，遇到了鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的病例，其中一栋的2000只4周龄的雏鸡，突然发病，表现为高度虚弱、颤抖、水样腹泻，经过剖检及实验室诊断，确诊为传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染。发病856只，经治疗死亡78只，治愈率为91.8%，具体发病情况及诊断治疗如下：鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治–2–1临床症状据养殖场技术员介绍，发病鸡早期有自啄肛门现象，发病前饮水增加，很快排白色粘稠如蛋清稀便或水样下痢有的带石灰样的蛋清样物，腹泻物中常含有尿酸盐，之后饮水量急剧下降，病鸡表现为精神沉郁，饮食欲减退，逐渐消瘦，畏寒、颈部躯干震颤，扎堆，羽毛逆立无光泽，蓬松脱水，步态不稳，行走摇晃，肛门周围羽毛被稀粪玷污，个别眼睑封闭，外观肿大，关节肿大，关节中积黄色或灰白色粘液，滑膜肿大增厚，有的病鸡生前或死后见肛门周围有血样分泌物，病鸡脱水明显，常因极度衰竭而死亡[2]。2病理变化大部分鸡呈现严重脱水，共剖检15只病死鸡，剖检现腿部和胸部有点状出血[11/15]；心包积液，心包膜浑浊增厚，内有纤维素性渗出物与心肌相粘连；肝脏有不同程度肿大、出血、被纤维性薄膜所包裹[8/15]。腺胃与肌胃交界处有出血斑或条状出血带[5/15]；肠道内黏液增加，盲肠扁桃肿大出血；脾脏轻度肿大，表面有弥漫性灰白的小点坏死灶；肾脏肿大呈苍白色，有尿酸盐沉积或输尿管有多量尿酸盐，并出现花斑肾[7/15]；大部分病鸡法氏囊明显肿大出血，个别的比正常鸡的法氏囊肿大2倍以上，重者囊内有血块，整个法氏囊呈葡萄状[7/15]，病程较长的法氏萎缩，囊内有干酪样坏死物[3][4/15]。3实验室诊断3.1病毒分离鉴定3.1.1病原体分离取病鸡法氏囊或脾脏研磨，用生理盐水做5-10倍稀释，离心沉淀，取上清液加入适量双抗作用1-2h再用其上清液经绒尿膜接种10-12d鸡胚。发现鸡胚在3-5d死亡，胚胎水肿出血[4]，说明有病毒感染。采取鸡胚中病毒液用PBS104倍稀释后以0.2mL/胚接种于10日龄SPF鸡胚的绒毛尿囊膜中，然后置37℃恒温箱中培养，弃去24h内的死胚，其余的继续培养至120h后转鸡传染性法氏囊与大肠杆菌混合感染的诊治–3–入4℃冷冻过夜，次日收集绒毛尿囊膜并观察膜的病变情况，如此进行反复传代至第3代，收集绒毛尿囊膜毒液[5]。3.1.2琼扩试验将制备的两个琼脂平板分为A、B两组。在琼脂板上按7孔1组的梅花形打孔。中间1孔，周围6孔，孔径约3mm，孔距2-5mm。将两个平皿孔径中的琼脂用8号针头斜向上面从右侧边缘插入，轻轻向左侧方向将琼脂挑出。用酒精灯轻烤平皿底部，至琼脂刚刚要融化为止，封闭孔的底部，以防侧漏。用微量移液器或带有6-7号针头0.25mL注射器吸取，将待测病毒液滴入A组中间孔，标准阳性血清分别加入外围的孔中，法氏囊病毒液滴入B组中间孔，标准阳性血清分别加入外围的孔中。每孔均以加满不溢出为度，每加1个样品应更换1个滴头。加样完毕后静止5-10min，然后将A、B组平皿轻轻倒置放入湿盒内，37℃温箱中作用。分别在24、48和72h观察并记录结果[6]。3.1.3结果判定将琼脂平板侧与强光下观察，B组法氏囊病毒与已知阳性血清形成一个清晰的白色沉淀圈，被检病毒与已知血清同样形成清晰致密的沉淀圈，且两圈孔径大小一致。3.2大肠杆菌的分离与鉴定将病鸡肝脏病料接种于伊红美蓝琼脂、麦康凯琼脂和营养肉汤培养基上，经培养，在伊红美蓝琼脂上出现特征性黑色，并闪有金属光泽；在麦康凯琼脂培养基上出现亮色菌落，并向培养基内凹陷生长，在肉汤培养基上浑浊，染色镜检，可见革兰氏阴性杆菌，取肉汤培养物接种于细菌生化微量鉴定管中做生化实验。结果该菌能发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖，不发酵蔗糖、靛基质和甲基红实验阳性，V-P实验阴性，可判定为大肠杆菌病。3.3动物感染试验取病死鸡的法氏囊研磨，生理盐水稀释成悬液，经口服或滴鼻人工感染三周龄左右的易感鸡，2-3d后出现症状，死后剖