高三一轮复习选修三基因工程经典习题

课时考点训练1．(2013年高考安徽卷)下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是()A．根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目B．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制C．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接D．放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置2．(2012年高考新课标全国卷)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：AATTC……GG……CTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是____________________________________________________________________。(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和________DNA连接酶。(4)反转录作用的模板是________，产物是________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。(5)基因工程中除质粒外，________和________也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是___________________________________________________________________________________________________。3．(2013年高考广东卷)从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是()A．合成编码目的肽的DNA片段B．构建含目的肽DNA片段的表达载体C．依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽D．筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽4．(2012年高考福建卷)肺细胞中的let－7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let－7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。图1图2请回答：(1)进行过程①时，需用________酶切开载体以插入let－7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let－7基因转录，该部位称为________。(2)进行过程②时，需用________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。(3)研究发现，let－7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let－7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中________________________________________________________________________一、选择题1．2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是()A．追踪目的基因在细胞内的复制过程B．追踪目的基因插入到染色体上的位置C．追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构2．(2013年高考大纲卷)下列实践活动包含基因工程技术的是()A．水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种B．抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦C．将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株D．用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆3．(2013年高考江苏卷)(多选)小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。下列相关叙述正确的是()A．设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B．用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列C．PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶D．一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞4．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是()A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞二、非选择题5．(2014年潍坊联考)为提高我国稻米的含铁量，通过农杆菌介导将菜豆的铁结合蛋白基因导入了一个高产粳稻品种中。获得了高含铁量转基因水稻株系，下图为培育过程。请分析并回答问题：(1)获取重组载体用到的“手术刀”是________________________________________________________________________。②过程用________法将重组载体导入愈伤组织细胞。(2)重组载体中的标记基因的作用是________。检测目的基因是否转录，需用________作探针。(3)图中①③④过程须在________条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加植物激素，作用是________。(4)过程④除了用秋水仙素或低温诱导来处理，还可以采用________技术，该技术常用的诱导剂是________。6．下图是利用基因工程方法培育抗虫棉的过程。请回答相关问题：Ti质粒—抗虫基因—――→A重组质粒――→B土壤农杆菌――→C含重组质粒的土壤农杆菌――→D棉花细胞――→E抗虫棉(1)从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具是________，此工具主要是从________生物中分离纯化出来的，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的________键断开。(2)构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有________，它能把目的基因整合到受体细胞________。(3)E过程是利用________技术完成的，要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做________实验。(4)将目的基因导入植物细胞，除采用上图中的方法外，还可采用________法和花粉管通道法。7．下图为利用农杆菌转化法培育转基因抗虫棉的技术流程图。请据图回答：(1)图中A为________，在构建该结构时，Bt毒蛋白基因与Ti质粒结合的部位是________。(2)①过程是________________，利用农杆菌的优点在于________________。(3)③过程为________，包括________和________过程。8．转基因生物可作为生物反应器，用来生产人们所需的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等，甲图是通过生物工程培育能产生人胰岛素的烟草的过程。(1)构建表达载体的A过程中，可选用不同限制酶，如乙图所示过程，采用EcoRⅠ和EcoRV酶切含有目的基因的DNA和质粒，这样可以防止酶切产物在加入DNA连接酶后，出现__________________________________________________________________；若在图中只使用一种DNA连接酶，应选用________(填“E·coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”)。(2)D过程采用的方法是________，如受体细胞是单子叶植物体细胞一般不采用该方法，原因是_______________________________________________________________；E过程体现的生物学原理是________。(3)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，F过程应该用________________________________________________________________________作为探针。9．(2014年上海奉贤区模拟)下图表示培育能产生人生长激素的工程菌的基本过程。图中pBR322是大肠杆菌的一种质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因；BamHⅠ位点是BamHⅠ限制酶的切割位点；A、B是含有特定抗生素的培养基。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了筛选出运载体导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌(受体细胞)，首先将大肠杆菌培养在通用培养基上，再将其菌落原位转移到A、B培养基上培养(如图中④)，得到如图结果：黑点表示菌落，A中空圈表示B的菌落在A中不能生长的位置。据此分析并回答：(1)“pBR322”的化学本质是________，在自然情况下可通过________过程进行扩增。(2)图中过程①表示的获得目的基因的方法是________，过程②中DNA连接酶的作用是_____________________________________________________________。过程③是________。(3)根据用途，右图中A、B所用培养基属于________。所需大肠杆菌的菌落位于________(填“A”或“B”)上，理由是_________________________________________________________________。(4)基因工程的理论基础是中心法则，根据右图遗传信息表达可用公式(图解)表示为_________________________________________________________________。10．下图为培育转基因抗虫棉的技术流程，请据图回答：(1)质粒上标记基因的作用是_________________________________________________________。(2)过程①是________，这是基因工程的核心步骤，其目的是___________________________________________________________________。(3)过程②采用最多的方法是________，检测抗虫基因是否整合到棉花细胞DNA分子上的方法是______________________________________________________________________________。(4)③过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂外，还需要添加________，④过程的实质是________。