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1“传统发酵技术的应用”知识归纳及试题例析一、知识归纳1、几种常用发酵菌种的比较菌种项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生产应用酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜发酵条件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧2、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较制作内容比较项目果酒果醋腐乳泡菜所用菌种酵母菌醋酸菌主要是为霉乳酸菌控制条件O2的有无无氧有氧有氧无氧最适温度18℃～25℃30℃～35℃15℃～18℃常温时间控制10～12天7～8天腌制8天左右腌制10天左右其他条件封闭充气口适时充气控制盐酒用量控制盐水比例相关反应式3、果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程的比较及亚硝酸盐含量的检测比较项目果酒和果醋制作腐乳的制作制作泡菜并检测亚硝酸盐含量制作原理果酒：无氧呼吸果醋：有氧呼吸多种微生物发酵泡菜制作：乳酸菌无氧呼吸亚硝酸盐检测：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料2实验流程图挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵↓↓果酒果醋让豆腐上长也毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制操作提示材料的选择与处理；防止发酵液被污染；控制好发酵条件。控制好材料的用量；防止杂菌污染。泡菜坛的选择；腌制的条件；测定亚硝酸盐含量的操作。二、相关试题1．在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是（）A．让发酵装置接受光照B．给发酵装置适时排气C．向发酵装置通入空气D．将发酵装置放在45℃处2．下列关于腐乳制作过程的说法，正确的是（）A．制作腐乳时只有毛霉发挥作用B．豆腐的表面长出青色物质则标志着腐乳制作完成C．在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与D．制作腐乳时加盐是为了促进毛霉的生长3．下列关于病毒、醋酸菌、毛霉的叙述，不正确的是（）A．病毒与后两者比较，没有细胞结构，遗传物质可能是DNA或是RNAB．醋酸菌是好氧菌，可以将葡萄糖分解成醋酸，其细胞结构中没有核膜和核仁C．在腐乳制作过程中，毛霉能产生蛋白酶，分解豆腐中的蛋白质为肽和氨基酸D．三者在培养过程中，只要培养基中有水、碳源、氮源和无机盐，都能正常生长繁殖4．下图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是（）A．过程①和②都只能发生在缺氧条件下B．过程①和③都发生在酵母细胞的线粒体中C．过程③和④都需要氧气的参与D．过程①～④所需的最适温度基本相同5．以下关于生物技术的说法不正确的是（）A．需借助胚胎移植技术才能获得克隆牛B．单倍体育种过程涉及脱分化和再分化C．用自身干细胞培育的器官，移植后一般不会产生免疫排斥反应D．果酒与果醋的制作过程需要保持缺氧状态6．小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图），恰当的做法是（双选）（）A．加入适量的酵母菌3B．一直打开阀b通气C．一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟D．把发酵装置放到4℃冰箱中进行实验7．下面是有关食醋和泡菜制作的实验。请回答：（1）食醋可用大米为原料经三步发酵来制作：第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成（填中间产物），然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用（填淀粉指示剂）来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。第二步：用菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是。第三步：用菌将乙醇转化成乙酸，这一过程氧气。（2）泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N—1—萘基乙二胺偶联成色化合物。进行样品测定时，还要取等量水进行同样的测定，目的是。8．生物技术的广泛应用给社会带来了较大的经济效益，受到了社会的广泛重视。请回答下列有关问题：（1）制作泡菜时需要测定亚硝酸盐的含量，其方法是。亚硝酸盐在特定的条件下会转变为，引起生物致癌。引起细胞癌变的原因是环境中的致癌因子使细胞中的发生。（2）1993年，美国科学家K.B.Mullis因发明了PCR技术而获得了诺贝尔化学奖。PCR技术和生物体内DNA的复制都必需的条件包括、模板DNA、能量、游离的脱氧核苷酸和；在生物体内DNA复制所必需的，而在PCR技术中不需要的成分是。（3）为获得一种能高效降解农药的细菌（目的菌），向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是；实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后再倒掉，这样做是为了。“微生物的培养与应用”知识归纳及试题一、知识归纳1、培养基的分类和应用划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、分类、鉴定固体培养基加凝固剂，如琼脂微生物分离、鉴定、活菌计数化学组成天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确（用化学成分已知的化学物质配成）分类、鉴定目的用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物2、消毒与灭菌的区别比较项目消毒灭菌条件使用较为温和的理化方法使用强烈的理化因素结果杀死物体表面或内部一部分对人体有害的杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢4微生物（不包括芽孢和孢子）和孢子适用实验操作的空间、操作者的衣服和手微生物的培养器皿、接种用具和培养基等常用方法煮沸消毒法（如在100℃，煮沸5～6min）、巴氏消毒法（如在80℃，煮15min）；使用酒精、氯气、石炭酸等化学药剂进行消毒灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌3、三种常用灭菌方法的比较灭菌方法灭菌条件灭菌时间适用材料或用具灼烧灭菌酒精灯火焰的充分燃烧层直至烧红接种环、接种针或其他金属工具干热灭菌干热灭菌箱内，160～170℃1～2h玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等高压蒸汽灭菌100kPa，121℃15～30min培养基等4、微生物的纯化培养包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段，纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。5、微生物的分离和计数（1）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。②测定微生物数量的常用方法：统计菌落数目和显微镜直接计数。③土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。（2）分解纤维素的微生物的分离①实验原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。②流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。二、相关试题1．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（）A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数52．下列对四种微生物相关的叙述，错误的是（）A．CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化B．CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能C．糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解D．葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源3．酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基（）A．牛肉膏蛋白胨培养基B．麦芽汁琼脂培养基C．蛋白胨酵母膏培养基D．MS培养基4．下列关于微生物的培养和运用的叙述，错误的是（）A．通过消毒不能杀死物体内所有的微生物B．利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目C．平板划线法和稀释涂布法常用于微生物的接种D．微生物所用的培养基成分和植物组织培养用的培养基成分不同5．下列有关微生物的培养或纯化的叙述，错误的是（）A．微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种B．培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径C．分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法D．分离自养型微生物的方法是用纤维素作为唯一碳源的培养基6．（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑、和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、、等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌处理，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是；操作者的双手需要进行清洗和；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能。（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的。（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的。（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。7．生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。（1）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供，培养基灭菌采用的最适方法是法。（2）测定培养液中微生物数量，可选用法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用技术使脂肪酶能够6重复使用。（3）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的技术。8．从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是，获得图B效果的接种方法是。（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行，接种前要进行，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。“植物的组织培养技术”知识归纳及试题一、知识归纳1、菊花茎的组织培养与月季的花粉培养的比较比较项目菊花茎的组织培养月季的花药培养理论依据细胞的全能性基本过程脱分化、再分化影响因素选材、营养、激素、pH、温度、光照等选材、营养、激素、pH、温度等比较材料选取生长旺盛的嫩枝单核靠边期的花粉pH5.85.8温度18～22℃25℃光照每日光照12h开始时不需要光照，幼小植株形成后才光照操作流程制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育2、植物激素（生长素和细胞分裂素）对实验结果的影响影响因素实验结果植物激素的浓度根据生长素作用的两重性：低浓度促进生长，高浓度抑制生长，甚至杀死植物植物激素用量生长素＞细胞分裂素有利于根的分化、抑制芽的形成生长素＜细胞分裂素有利于芽的分化、抑制根的形成生长素≈细胞分裂素促进愈伤组织的形成使用顺序先生长素，后细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先细胞分裂素