传出神经系统药物对离体肠肌的影响

机能实验—传出神经系统药物对离体肠肌的影响实验目的1、掌握离体平滑肌的实验方法。2、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用教学时数2学时实验原理一、离体实验1、所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验2、特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量药物的筛选。3、要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。（1）温度：38±0.5℃（2）通氧气：1－2气泡/s（3）营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不同。二、离体肠管实验1、肠管的选择：根据实验目的的不同进行选择（1）小肠：十二指肠、空肠、回肠（2）自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。（3）空肠多做定性实验，回肠多做定量实验2、肠内受体及作用原理（1）受体：家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。（2）作用：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。（3）药品对受体的作用：1、氯化乙酰胆碱（Ach）：M受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收缩幅度增加，蠕动加强。2、阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，可阻断M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降低。3、氯化钙（Bacl2）：①Ba2+进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩，②Ba2+可使细胞膜发生去极化。所以加入Bacl2肠管会发生强直性收缩，Bacl2并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。实验材料1．动物：家兔2．药品①5X10-4氯化乙酰胆碱②0.5％硫酸阿托品③20％BaCL23、器材：RM6240多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586计算机、张力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“L”型通气钩、高位吊瓶、量筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、注射器、台式营养器。实验方法一、首先调试RM6240系统，使进入肌张力测定状态．此时肌张力测试调试完毕。二、调节仪器：将超级恒温水浴温度调至38.5±0.5℃，向麦氏浴槽中加30ml台氏液，通入氧气(1～2个气泡／秒)并制备家兔肠管标本。三、正式试验：将肠管标本两端用缝针各穿一线，一端打一空结(约lcm小套)，另一端穿上长线打结，用眼科镊钳住空结固定于通气钩上，放入麦氏浴槽中，将另端长线的尽端打一空结，挂在张力换能器的小钩上，调节换能器高度，使前负荷为1g，稳定标本20分钟。在主菜单下按键选择〈记录状态〉，先描记一段正常曲线，然后按下列顺序给药。①向麦氏浴槽内加入5X10-4MAch0.2ml同时用标记框在屏幕上作给药标记，观察肠段反应。当反应最明显时，用暂停键，将计算机转入“示波状态”。用台氏液冲洗肠管3遍，稳定标本15分钟，加入下列药物。②将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加0．5％阿托品0．2ml并作标记，观察曲线变化，1分钟后加5X10-4MAch0．2ml并标记，观察肠段反应。将计算机转入“示波状态“后，用台氏液冲洗肠管3遍。稳定标本15分钟③将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后向麦氏浴槽中加0．01％Adr0.1ml并作标记，观察曲线变化。将计算机转入“示波状态”下冲洗肠管，稳定标本，加下列药物。④将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加20％BaCl20．2ml并作标记，观察曲线变化。在主菜单下选择“结束实验”，激活工具栏，系统进入分析状态。注意事项1、操作时应避免牵拉肠管，造成肠管活性不好。2、肠管两端穿线采用十字交叉法，肠管不易扭曲，便于营养液的流通。3、每次给药前均应冲洗肠管3次，中间间隔1分钟。4、BaCl2可使肠管产生强直性收缩，不能恢复，所以最后加BaCl2。5、给药时将药液直接加入药液，不要碰线，也不要碰壁。12345678