食叶草提取SOD探索

1食叶草提取SOD探索北京军信泉盛环境科学技术研究院农业课题组食叶草提取SOD：SOD也叫超氧化物歧化酶，是一种源于生命体的活性物质，是一种含有金属元素的活性蛋白酶。能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。SOD是一种广泛存于动物、植物和微生物的生物酶，国外药用SOD系从血中提取，国内SOD已开发的品种已超过20种，证明我国对SOD的研究和应用已进入新时期。用食叶草提取SOD来源丰富，成本低，提取和纯化较方便SOD的应用技术：SOD是中国卫生部批准的具有延缓衰老功能的物质之一。可抑制心脑血管疾病、抗衰老作用、自身免疫性疾病、肺气肿、辐射病及辐射防护、老年性白内障等。食叶草SOD提取及测定：一、实验目的1、掌握食叶草细胞SOD提取和活力测定方法。2、熟悉有关生化技术的基本原理和基本操作。二、实验原理：食叶草和悬浮培养的食叶草细胞中含有丰富的SOD，通过组织或细胞破碎后，可用PH为7.8的磷酸缓冲液提取出。由于SOD不溶于丙酮，可用丙酮将其沉淀析出。三、实验步骤：1、细胞组织破碎：称取5克食叶草，置于研砵中研磨。2、SOD提取：破碎后的组织中加入2～3倍体积的0.05mol/L磷酸缓冲液（PH值=7.8），继续研磨20min，使SOD充分溶解到缓冲液中在5000rpm下离心15min,取上清液。3、除去杂蛋白：上清液加入0.25体积的氯仿-乙醇混合液搅拌15min,5000r/min离心15min,得到的上清液为粗酶液。4、SOD分离：粗酶液中加入等体积的冷丙酮，搅拌15min,5000r/min离心15min,得到SOD沉淀。25、测SOD酶的活性①取约0.2gSOD测酶活，剩下的放入真空干燥机内干燥。②取10ml缓冲液溶解，取2只离心管离心，取上清液，编号为0,1,2。③在3个离心管中分别家人200ul酶液。④在0号管加400ulTCA，1、2号管分别加200u底物，从加入时开始计时，放入37℃水浴箱中10min。⑤在0号管中加200ul底物，在1、2号管分别加400ulTCA，静置5分钟。⑥将3只离心管离心5分钟，在OD420nm可见光处测吸光值分别为：离心管012吸光值0.0040.0670.0776、所需材料和试剂：（1）食叶草鲜草；（2）0.05mol/L磷酸缓冲液（PH=7.8）；（3）氯仿-乙醇混合液：氯仿：无水乙醇=3:5；（4）丙酮：用前需预冷至4～10℃。7、结果分析：食叶草质量/gSOD质量/g产品得率301.28634.29%注明：由于酶具有专一性，没有测酶活。试验结束语：本试验仅对食叶草SOD提取进行探索，不作为任何专业性的依据。