钼锑抗比色法测定有效磷

钼锑抗比色法测定有效磷1．试剂配制1.12,6一二硝基酚[C6H5OH(NO3)2指示剂:0.25g2,6一二硝基酚溶于100mL水中(饱和液)。1.2无磷活性炭l.2.1含磷量少的活性炭直接用0.5mol碳酸氢钠(NaHCO3)浸24h。在布氏漏斗上抽气过滤，每次用少量蒸馏水淋洗多次，直至检查滤液无磷为止，然后烘干装瓶待用。1.2.2含磷量多的活性炭首先用2mol/L盐酸(HCl)浸泡过夜，用蒸馏水冲洗多次后再用0.5mol碳酸氢钠(NaHCO3)浸泡处理。1.3钼锑抗贮存液浓硫酸(H2SO4)(分析纯)153mL缓缓地倾人约400mL蒸馏水中，搅拌、冷却。10.0g钼酸鞍(分析纯)溶于约60℃的300mL水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓滴人钼酸鞍溶液中，再加人100mL0.5%酒石酸锑钾溶液[K(SbO)C4H4O6·1/2H2O分析纯:，最后用水稀释至1L，盛于棕色瓶中。1.4钼锑抗显色剂:称1.5g抗坏血酸(C6H8O6,，左旋比旋光度+21～22℃分析纯)，溶于100ml钼锑抗贮存液中。此液随配随用，有效期1d。1.55mg/I磷标准液:称取在105℃烘箱中烘2h后冷却的磷酸二氢钾(KH2PO4、分析纯)0.439g溶于200ml水中，加人5mL浓硫酸(H,SO,)，转人1L容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度即为100mg/L磷标准液，可长期保存备用。取此溶液准确稀释20倍即为5mg/L磷标准液，此溶液不宜久放。1.6配制10%硫酸(H2SO4),10%氢氧化钠(NaOH),2操作步骤2.1将发酵液加人适量活性炭脱色，离心，吸取上清液2-10mL(含5-25ug磷)于50mL工容量瓶中，用水稀释至20mL，加2,6一二硝基酚指示剂2滴，用10YO氢氧化钠或稀硫酸溶液调节pH至溶液刚呈微黄色(小心缓加，边加边摇，防止产生的二氧化碳把溶液喷出瓶口)，然后加人钼锑抗显色剂5ml,摇匀，定容至刻度。在室温20℃-25℃下放置30min后在分光光度计上用波长680-700nm(红色滤光片)比色，以空白试验溶液为参比液调零点。读取数值，在工作曲线上查出显色液磷的读数，颜色在8h内可保持稳定2.2工作曲线的绘制分别吸取5mg/L磷标准溶液0,2,3,4,5,6mL于50ml容量瓶中，加水稀释至约20ml，加人钼锑抗显色剂5mmL，摇匀定容，即得0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6mg/L磷标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读出数值。在方格坐标纸上以测得数值为纵坐标，磷mg/L数为横坐标，绘制成工作曲线3结果计算有效磷按式(C1)计算式中:显色液磷(尸)读数—从工作曲线上查得显色液磷的读数;显色液体积-50mL;分取倍数—发酵液体积(三角瓶)(mL)/吸取发酵液(mL)