银丹心脑通片生产工艺的研究资料及文献资料,辅料来源及质量标准

中药注册分类8申报资料12生产工艺的研究资料及文献资料，辅料来源及质量标准(银丹心脑通片)课题名称银丹心脑通片研究单位xxxx制药有限公司试验负责人xxx试验参加人试验时间20xx.11.2至20xx.12.11原始资料保有地xxxx制药有限公司申报单位xxxx制药有限公司联系人xxx联系方式Tel:Fax:生产工艺的研究资料及文献资料，辅料来源及质量标准一、生产工艺的研究资料银丹心脑通片YindanXinnaotongPian【处方】银杏叶500g丹参500g灯盏细辛300g绞股蓝300g山楂400g大蒜400g三七200g天然冰片10g倍他环糊精15g辅料适量制成1000片【制法】以上八味药材，三七30g粉碎成极细粉，其余粉碎成粗粉备用；天然冰片研成极细粉；大蒜水蒸气蒸馏提取大蒜油，倍他环糊精包结后备用；银杏叶加乙醇回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，回收乙醇，加水静置12小时，滤过，滤液上聚酰胺树脂柱，依次用水、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩至相对密度为1.20（50～60℃）的清膏，减压干燥，粉碎成极细粉。丹参加乙醇回流提取二次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.20(50～60℃)的清膏，减压干燥，粉碎成极细粉，药渣备用；其余灯盏细辛等三味药材与丹参药渣及三七粗粉，加水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩，加入乙醇使醇量达70%，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎成极细粉；将上述极细粉、淀粉、预胶化淀粉充分混匀，制粒，外加大蒜油的倍他环糊精包结物、天然冰片极细粉、硬脂酸镁，混匀，压片，包薄膜衣，即得。【工艺流程图】丹参乙醇回流滤液回收乙醇浓缩清膏干燥粉碎极细粉绞股蓝山楂灯盏细辛药渣三七极细粉粗粉水煎煮滤过滤液浓缩醇沉上清液回收乙醇浓缩稠膏干燥粉碎极细粉粉碎15%85%银杏叶乙醇回流提取液滤液水沉滤过聚酰胺树脂柱水，乙醇洗脱乙醇洗脱液浓缩干燥极细粉大蒜水蒸气蒸馏挥发油倍他环糊精包结包结物冰片混合制粒颗粒素片压片包薄膜衣淀粉粉碎成品（一）．药材的分拣去杂质及质量验收处方各中药材，经分拣去杂质，干燥，按中国药典20xx年版一部有关规定检验，符合规定者备用。（二）．配料符合规定的药材根据生产批量大小，按处方称量配伍，将不同方法提取的药材及粉碎的药材分别配料，分开放置。（三）．三七与天然冰片粉碎工艺考查三七用WF-320A型吸尘微粉碎机组粉碎即可,天然冰片采用研磨法粉碎即可。三批中试粉碎工艺试验数据批号三七天然冰片投料量(g)细粉量(g)收率(%)投料量(g)细粉量(g)收率(%)xx1206300293.397.710099.199.1xx1207300295.198.410098.898.8xx1208300295.498.510099.399.3（四）．银杏叶提取方法考查原工艺采用药典中银杏叶提取物的制备方法，经考查符合要求。三批中试银杏叶提取工艺试验数据批号投料量（g）浸膏极细粉量（g）出膏率总黄酮含量（%）xx1206500065.11.3%24.3xx1207500060.41.2%24.1xx1208500062.61.3%24.4（五）．大蒜挥发油工艺选择1、提取工艺选择取大蒜药材适当破碎，按处方量称取，制备工艺正交试验用样品。每正交试验样品药材重400g。将大蒜400g加入3000ml烧瓶中，加水20xxml，水蒸气蒸馏，分别在1小时、2小时、3小时测定挥发油量，结果如下表：水蒸气蒸馏时间1小时2小时3小时挥发油量（ml）0.9ml1.5ml1.5ml由上述结果看出，回流提取2小时后挥发油量不再增加，故大蒜挥发油提取工艺为大蒜加约5倍量水提取2小时。确证实验（n=3）：将大蒜400g加入3000ml烧瓶中，加水20xxml水蒸气蒸馏2小时，挥发油量分别为：1.5ml、1.6ml、1.5ml。说明该工艺稳定可行。2、包结工艺选择因为大蒜挥发油直接喷入颗粒压片容易在生产贮存过程中损失并与薄膜衣层反应，所以将挥发油采用倍他环糊精包结工艺包结后备用。（1）实验材料大蒜挥发油：自制（水蒸汽蒸馏）倍他环糊精xxxxxx有限公司，xxxxxx有限公司无水乙醇xxxxxx有限公司（分析纯）ZRD—6A型溶出度仪北京瑞利分析仪器有限公司UV-1100紫外分光光度仪北京瑞利分析仪器有限公司（2）大蒜挥发油标准曲线的制备精密量取0.1ml挥发油，置10ml量瓶中，加50%乙醇至刻度，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加50%乙醇至刻度，即得0.5%的挥油溶液。按表2精密量取不同体积的0.5%挥发油溶液，置10ml量瓶中，加50%乙醇至刻度，制成不同浓度的挥发油溶液，在UV—1100紫外分光光度仪上扫描测定UV吸收图谱（见图1）和300.5nm波长处的吸收度。大蒜挥发油标准曲线测定结果0.5%的挥油体积（ml）0.20.51.02.02.5溶液浓度（%）0.0100.0250.0500.1000.125吸收度0.1910.5000.9341.7712.069回归方程A＝16.41C+0.075相关系数r=0.9997大蒜挥发油UV图谱（3）挥发油包结预试验：根据文献报道，倍他环糊精包结挥发油的条件多为倍他环糊精：油=6∶1；包结温度45℃；包结时间：60分钟；搅拌速度：200转/分钟。所以我们根据此条件进行预试验如下：a称取3.0g倍他环糊精，加入50ml50%乙醇溶液，振摇，滤过，取续滤液扫描测定UV图谱，结果在300.5nm处无吸收，说明倍他环糊精对测定无影响。b精密量取0.5ml挥发油，精密称定重（W油）。c称取3.0g倍他环糊精，加入50ml水中，制成过饱和溶液；精密加入0.5ml大蒜挥发油，在45℃水浴中，以200转/分钟的转速搅拌包结60分钟，置4℃以下冷藏24小时，滤过，滤液置100ml量筒中，用水洗涤容器和包结物至滤液达50ml，用无水乙醇30ml左右分次洗涤容器和包结物，洗涤液滤至同一量筒中，转移至100ml量瓶中，用少量无水乙醇洗涤量筒，加无水乙醇至刻度；精密量取5ml，置25ml量瓶中，加50%乙醇至刻度，在UV-1100分光光度仪测定300.5nm处的吸收度，根据回归方程计算滤液中挥发油含量及包结率。倍他环糊精包结物在60℃以下干燥，称重，计算收得率。A－0.0750.5－×516.41包结率=×100%0.5W包结物收得率=×100%W倍他环糊精+W油结果包结率为54.26%，收得率为62.95%。（4）大蒜挥发油的倍他环糊精包结正交试验根据预试验结果，包结率和收得率都较低，故以预试验条件为下限设计正交试验。因素水平表，正交试验设计表见下表L9（34）正交表头水平因素A油：倍他环糊精B搅拌速度（r/min）C包结时间（h）D包结温度（℃）1231：101001501：81502551：6200360正交试验设计表试验号因素ABCD123456789111222333123123123123231312123312231按正交试验设计表条件，取倍他环糊精，精密称定，进行包结试验，包结混合液在4℃下冷藏24小时，滤过，包结物在60℃干燥，精密称定重量（W包），计算收得率。滤液按预试验的方法，测定在300.5nm波长处的吸收度，计算包结率。结果见大蒜挥发油包结正交结果评价表试验号因素包结率（%）收得率（%）ABCD12345678911122233312312312312323131212331223134.7855.8077.7438.7950.8069.0227.4038.0038.1874.1368.1068.5583.3164.4265.3864.6263.9969.66包结率K1168.32100.97141.80123.76K2158.61144.60132.77152.22K3103.58184.94155.94154.53K151.1133.6647.2741.25k252.8748.2044.2650.74k334.5361.6551.9851.51R18.3427.997.7210.26收得率K1210.78222.06203.50208.21K2213.11196.51221.07198.10K3198.27203.59197.59215.85K170.2674.0267.8369.40k271.0465.5073.6966.03k366.0967.8665.8671.95R4.958.527.835.92结果表明，搅拌速度是影响包结率的主要因素，有差异(P0.010)，倍他环糊精和挥发油的比例影响次之，最佳工艺应为A1B3C3D3。对收得率而言，四种因素影响都不显著，最佳工艺应为A2B1C2D3。结合二个方面，我们选择A1B3C3D3，即油∶倍他环糊精=1∶10，搅拌速度：200转/分钟，包结时间：3小时，包结温度：60℃。（5）倍他环糊精包结大蒜挥发油最佳工艺条件的验证实验为了验证正交试验结果，我们按照优选出的最佳工艺条件进行挥发油包结验证实验，即精密称取5g倍他环糊精，加入50ml水中，制得饱和溶液，精密加入0.5ml大蒜挥发油，在60℃水浴中，以200转/分钟的搅拌速度包结3小时，4℃以下冷藏24小时，滤过，用水洗涤容器和包结物至滤液50ml，用无水乙醇30ml分次洗涤容器和包结物，洗液、滤液移至100ml量瓶中，加无水乙醇至刻度；精密量取2ml，置10ml量瓶中，加50%乙醇至刻度，测定在300.5nm波长处的吸收度，计算包结率。包结物在60℃干燥，称定重量，计算收得率。验证实验（n=3）结果表明，平均包结率为79.2%，平均收得率为95.6%，包结率和收得率高于正交实验中的任何一个实验，说明该工艺稳定可行。（六）．丹参药材提取工艺选择取丹参适当粉碎，按处方配伍量称取，制备正交试验工作样品，每正交试验工作样品重500g。因素水平表L9（34）正交表头试验号因素A加溶剂量（倍）B回流次数（次）C回流时间（小时）D乙醇浓度%123108612311.52957550正交试验设计表试验号因素A加溶剂量（倍）B回流次数（次）C回流时间（小时）D乙醇浓度%12345678910101088866612312312311.521.521211.5957550509575755095取每正交样品500g，按上述正交试验设计表设计加水量、回流次数、回流时间，分别回流提取，滤过(200目筛)，滤液合并，静置，取上清液浓缩成稠膏，置烘箱内干燥至恒重。取干膏适量,研细,取约0.1g，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至近刻度，超声处理30分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，混匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。精密吸取20μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。以干膏中含丹参素的总量为评价指标。正交试验数据表正交号干膏量（g）丹参素含量（mg/g）丹参素总量（mg）124.7612.46308.51235.2312.89454.11340.327.12287.10422.388.16182.62535.9112.96465.39635.0111.17391.06731.2512.01375.31826.636.38169.89935.7612.57449.50正交试验结果分析表试验号因素丹参素总量(mg)ABCD12345678910101088866612312312311.521.521211.5957550509575755095308.51454.11287.10182.62465.39391.06375.31169.89449.50K11049.72866.44869.461223.40K21039.071089.391086.231220.48K3994.701127.661127.80639.61k1349.91288.81289.82407.80k2346.36363.13362.08406.83k3331.57375.89375.93213.20R18.3487.0879.41194.60以干膏中含丹参素的量