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版权所有：中华资源库酶的存在与简单制作方法。2.酶活力测定的一般原理和方法。3.酶在食品制造和洗涤等方面的应用。4.制备和应用固相化酶。5.植物的组织培养。6.蛋白质的提取和分离。7.PCR技术的基本操作和应用。1．判断下列有关酶的研究与应用的叙述(1)多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层(2011·江苏，15D)(×)(2)嫩肉粉是以蛋白酶为主要成分的食品添加剂。就酶的作用特点而言，室温下先与肉片混匀放置一段时间再炒熟的使用方法最佳(2009·广东文基，72D改编)(√)(3)用含蛋白酶的洗衣粉去除油渍，效果比其他类型的加酶洗衣粉好(2010·江苏，3D)(×)(4)棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤(2011·江苏，15C)(×)(5)CaCl2溶液的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠(2010·江苏，25B改编)(√)(6)利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件(2009·江苏，3C)(×)(7)利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物(2009·江苏，3D)(×)(8)固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显(2009·江苏，3A)(√)2．判断下列有关植物的组织培养技术的叙述(1)外植体可以来自于植物的任何细胞(2011·上海，22A)(×)(2)愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞(2011·江苏，16A)(×)(3)二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株(2011·江苏，16B)(×)(4)以花粉作为外植体可得到单倍体植株(2011·上海，22C)(√)(5)用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子(2011·江苏，16C)(×)(6)植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得(2011·江苏，16D)(√)(7)不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同(2011·上海，22D)(√)3．判断下列有关DNA和蛋白质技术的叙述(1)提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞(2009·江苏，23A)(×)版权所有：中华资源库(2)用菜花替代鸡血作为实验材料进行“DNA的粗提取与鉴定”，其实验操作步骤相同(2011·江苏，19D改编)(×)(3)用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质(2009·江苏，23B)(√)(4)蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA(2009·江苏，23C)(×)(5)利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色(2011·江苏，19C)(×)(6)蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化(2009·江苏，23D)(√)(7)利用透析法纯化蛋白酶时，应以蒸馏水作为透析液(2010·江苏，3C)(×)重点一酶的应用1．纤维素酶和果胶酶的组成与作用组成作用纤维素酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纤维素在C1酶、CX酶的作用下分解成纤维二糖，再在葡萄糖苷酶的作用下将纤维二糖分解为葡萄糖果胶酶多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶都能将不溶性果胶分解成可溶性半乳糖醛酸2.加酶洗衣粉的洗涤原理种类洗涤原理洗涤的物质种类蛋白酶蛋白质――→蛋白酶小分子的肽＋氨基酸血渍、奶渍及各种食品类的蛋白质污垢脂肪酶脂肪――→脂肪酶甘油＋脂肪酸食品的油渍、人体皮脂、口红淀粉酶淀粉――→淀粉酶麦芽糖＋葡萄糖来自面条、巧克力等的污垢纤维素酶使纤维的结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，达到更好的去污效果棉纺织品的表面浮毛3.直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的差异直接使用酶固定化酶固定化细胞酶的种类一种或几种一种一系列酶常用载体氧化铝、高岭土、硅胶、二氧化钛、硅藻土等明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等版权所有：中华资源库常用方法包埋法、化学结合法和物理吸附法包埋法营养物质不需要不需要需要化学反应一种或几种一种一系列底物各种物质各种物质能进入载体的小分子物质优点效率高、耗能低、无污染可回收反复使用成本低、易操作，可催化一系列化学反应缺点环境因素影响大，酶难以回收利用不利于催化一系列化学反应反应物与细胞内的酶不容易接触，催化效率下降技能点拨影响酶活性的因素、酶的用量及应用实验探究时注意的问题(1)实验设计时要遵循单一变量和对照两大原则，严格控制无关变量。(2)探究不同温度(或pH)对酶活性的影响时，温度(或pH)作为自变量，通常通过设置合理的梯度来确定最适值。最适值是通过比较相同时间内获得的产量或效果来确定的。(3)探究最适温度时，pH为无关变量；探究最适pH时，温度最好为最适温度。(4)探究果胶酶的最适用量时，所测出的最适用量指在本实验的温度、pH等条件下测出的，因而果胶酶的最适用量应标明温度和pH。(5)探讨加酶洗衣粉的最适温度要根据生活中的实际情况，合理设置温度梯度。(6)在使用加酶洗衣粉时不但要考虑最佳洗涤效果条件，还要考虑到酶的专一性和洗涤成本的问题。对位训练1．某同学进行苹果汁制作实验，工艺流程如下图所示：请回答：(1)图中用KMnO4溶液浸泡苹果的目的是________。黑曲霉提取液中含有的________可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过________方式将酶固定化，酶液固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去______________________。(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为________。在苹果汁澄清过程中，如有浑浊的现象应关闭的流速调节阀是______。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否有果胶，可取一定量的果汁与等量的________混合，如果出现________现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调________。版权所有：中华资源库(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被________使用。答案(1)消毒果胶酶吸附未被固定的酶等(2)先A后B阀2乙醇浑浊(沉淀)慢(3)重复解析(1)KMnO4具有杀菌消毒作用，可杀死苹果表面的杂菌，苹果汁中因含有果胶等使其浑浊，用果胶酶处理可使果胶水解，使果汁澄清。石英砂具有吸附作用，可通过吸附法将酶固定，用蒸馏水洗涤时未固定的酶可随蒸馏水流走。(2)具体操作时，先提取果胶酶，再将果胶酶放入待处理的果汁中，使果汁澄清。因酶具有高效性和反应前后化学性质不发生改变的性质，故果汁澄清的过程中，不需要连续加酶。果胶中的果胶酸钙能与乙醇形成沉淀，故可用乙醇鉴定果汁中的果胶。如有浑浊现象，说明果汁中仍有果胶存在，应控制阀2的流速，减少果汁处理量。(3)酶固定化后，便于与反应物和产物分离，可反复利用，提高利用率。2．加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。请回答下列问题：(1)由图推知，该实验的目的是__________________________________________。(2)下表是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗涤效果的实验记录，请据表回答：脸盆编号洗涤物(等量)洗涤温度洗衣粉(等量)水量洗净所需时间1油污布45℃加酶2L4min2油污布45℃普通2L7min3油污布5℃加酶2L9min4油污布5℃普通2L8min①该实验设计体现了____________________原则。②若实验组1号洗净所需时间接近7分钟，最可能的原因是________________。(3)下列衣料不适宜用添加蛋白酶的加酶洗衣粉洗涤的有________。①棉织品②毛织品③腈纶织品④蚕丝织品(4)根据以上实验结果，写出两项提高加酶洗衣粉效果的措施。________________________________________________________________________________________________________________________________________________。版权所有：中华资源库答案(1)探究温度、碱性蛋白酶含量对去污力的影响(2)①对照、单一变量②酶失活(3)②④(4)用温水浸泡；延长浸泡时间；增加洗衣粉的用量等解析(1)分析曲线图，横坐标是碱性蛋白酶含量，纵坐标表示去污力，图中的两条曲线自变量除碱性蛋白酶含量外，还有温度，故该实验的目的是探究温度、碱性蛋白酶含量对去污力的影响。(2)分析表格，1与2、3与4形成加酶与否的对照，1与3、2与4形成温度不同的对照，体现了对照原则和单一变量原则。实验组1号为45℃加酶洗衣粉组，正常洗净时间为4分钟，若接近7分钟则与实验组2号结果相同。2号是不加酶的普通洗衣粉组，所以原因很可能是酶失活。(3)毛织品和蚕丝织品均为蛋白质类织品，不宜使用加蛋白酶的洗衣粉洗涤。(4)从实验记录表中可看出，45℃时的效果比5℃时好，用温水浸泡会提高酶的活性，延长浸泡时间可使酶与污物充分接触，适当增加酶浓度无疑会提高分解污物的速率。重点二植物组织培养1．影响植物组织培养的因素(1)内因：材料的种类、年龄、保存时间长短等(2)外因2．植物组织培养与花药培养技术的比较项目内容植物组织培养花药培养技术理论依据细胞的全能性基本过程脱分化→再分化外植体细胞类型体细胞生殖细胞操作流程制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培选材→消毒→接种、培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育培养结果正常植株单倍体植株可育性可育高度不育，秋水仙素处理，染色版权所有：中华资源库．菊花的组织培养时每日用日光灯照射12h，月季的花药培养过程中开始不需光照，幼小植株形成后才需光照。2．植物组织培养过程中植物激素的使用顺序对实验结果的影响：激素使用实验结果使用顺序先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高对位训练3．如图为菊花组织培养的大致过程，请思考回答：(1)图中B、C依次表示________________过程(填名称)，添加的关键激素是________________。该实验操作成功的关键是______________，要对外植体、超净工作台等消毒，对________等灭菌。(2)若选用菊花的茎段组织培养时①由于菊花茎段组织培养比较容易，故在配制MS固体培养基时，________(必需添加、不必添加)植物激素。培养基配制完毕后，还需进行________灭菌。②应选用生理状况好的菊花嫩枝茎段作为________，这是因为其更容易被诱导________________。③菊花茎段在接种前要用适当浓度的________________溶液进行表面消毒。④接种前，工作台要用体积分数为70%的酒精擦拭一遍。之后，所有的接种操作都必须在________旁进行，并且每次使用器械后，都需要用______________灭菌。⑤接种后的锥形瓶最好放在________中培养。培养期间应注意的事项主要有：定期________、控制好________，并每日给予适当时间光照。答案(1)脱分化、再分化细胞分裂素、生长素无菌操作(或无菌技术)培养基(或培养器具)(2)①不必添加高压蒸汽②外植体脱分化和再分化③酒精和氯化汞④酒精灯火焰灼烧⑤无菌箱消毒培养温度解析(1)植物组织培养中B表示脱分化形成愈伤组织，C表示再分化形成试管幼苗，添加的关键激素是细胞分裂素、生长素，二者浓度的配比调节分化过程。该实验成功的关键是无菌操作，要对外植体、超净工作台等消毒，对培养基(或培养器具)等灭菌。(2)①菊花茎段自身能合成植物激素，因此培养基中不必添加植物激素，培养基配制完毕需进行高压蒸汽灭菌。②外植体的选择直接关系到实验的成败，因此应选择容易被诱导版权所有：中华资源库ww