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一．1．组成蛋白质的20种氨基酸依据什么分类？各类氨基酸的共同特性是什么？这种分类在生物学上有何重要意义？2．蛋白质的基本结构与高级结构之间存在的关系如何？3．Edman反应所有的试剂和反应的特点如何？4．何谓蛋白质等电点？等电点时蛋白质的存在特点是什么？5．何谓盐析？分段盐析粗分蛋白质的原理是什么？6．哪些因素可引起蛋白质变性？变性后蛋白质的性质有哪些改变？7．蛋白质分离分析技术常用的有哪几种，简述凝胶过滤、电泳基本原理。8．有哪些沉淀蛋白质的方法？其中盐析和有机溶剂沉淀法有何区别或特点？9．溴化氰在多肽裂解中的作用部位，和裂解产物的末端氨酸残基为何物？10．举例说明蛋白质一级结构与功能关系。11．举例说明蛋白质变构效应与意义。12．一样品液中蛋白质组分为A（30KD）、B（20KD）、C（60KD），分析说明用SephadexG100凝胶过滤分离此样品时，各组分被洗脱出来的先后次序。13．多聚赖氨酸（poly－Lys）在pH7时呈无规线团，在pH10时则呈－螺旋；而多聚的谷氨酸酸（poly－Glu）在pH7时也呈无规线团，而在pH4时则呈－螺旋，为什么？14．简述胰蛋白酶原激活过程。15．－螺旋的特征是什么？如何以通式表示？16．高浓度的硫酸铵（pH5时）可使麦清蛋白沉淀析出，并用于初步分离该种蛋白的早期步，简要说明其原理。17．用阳离子交换柱层析一氨基酸混合液（洗脱剂：pH3.25，0.2N柠檬酸钠），其结果如下：①各洗脱峰的面积大小或高度有何含义？②Asp比Glu先洗脱出来的原因？吸光度洗脱剂流出体积18．为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂？六、计算题1．测得一种蛋白质分子中Trp残基占分子量的0.29%，计算该蛋白质的最低分子量（注：Trp的分子量为204Da）。2．一种蛋白质按其重量含有1.65%亮氨酸和2.48%异亮氨酸，计算该蛋白质最低分子量。（注：两种氨基酸的分子量都是131Da）。3．某种氨基酸－COOHpK＝2.4，－N＋H3pK＝9.6，－N＋H3pK＝10.6，计算该种氨基酸的等电点（pI）。4．某种四肽－COOHpK＝2.4，－N＋H3pK＝9.8，侧链－N＋H3pK＝10.6侧链－COOHpK＝4.2，试计算此种多肽的等电点（pI）是多少？5．有一种多肽，其侧链上羧基30个（pK＝4.3），嘧唑基有10个（pK＝7），－N＋H3（pK＝10），设C末端－羧基pK＝3.5，N－末端氨基pK＝9.5，计算此多肽的pI。6．已知氨基酸平均分子量为120Da。有一种多肽的分子量是15120Da，如果此多肽完全以－螺旋形式存在，试计算此－螺旋的长度和圈数。答案六、计算题1.解：Trp残基MW/蛋白质MW＝0.29%，蛋白质MW＝64138Da。2.解：异亮氨酸/亮氨酸＝2.48%/1.65%＝1.5/1＝3/2所以，在此蛋白质中的亮氨酸至少有2个，异亮氨酸至少有3个。由此推理出：1.65%＝2×（131－18）/蛋白质MW答案：蛋白质MW＝13697Da。3.答案：pI＝10.14.答案：pI＝7.05.解：要计算多肽的等电点，首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有（30＋1）个单位负电荷，而正电荷最多只有（15＋10＋1）个，相差了5个电荷。要想让正负电荷数相等，只能让30个羧基（侧链－COOHpK＝4.3）少带5个负电荷（－COOHpK＝3.5，它比侧链－COOH易于解离，难于接受质子），即在30个侧链－COOH中有25个处于解离状态（－COO－），5个不解离（－COOH）。因此：pH＝pKa＋lg（[碱]/[酸]）＝4.3＋lg（25/5）＝5.0。6.解：答案：肽链长度＝43.92(nm)；该蛋白质（或多肽）分子量＝14640Da二．五、问答题1．核酸的组成和在细胞内的分布如何?2．核酸分子中单核苷酸间是通过什么键连接起来的？什么是碱基配对？3．简述DNA和RNA分子的立体结构，它们各有哪些特点？稳定DNA结构的力有哪些？4．下列三种DNA中，哪个的Tm值最高？哪个的Tm值最低？为什么？A、AAGTTCTCTGAATTAB、AGTCGTCAATGCATTC、GGATCTCCAAGTCATTTCAAGAGACTTAATTCAGCAGTTACGTAACCTAGAGGTTCAGTA5．将下列DNA分子加热变性，再在各自的最适温度下复性，哪种DNA复性形成原来结构的可能性更大？为什么？A、ATATATATATB、TAGACGATGCTATATATATAATCTGCTACG6．真核mRNA和原核mRNA各有何异同特点?六、计算题1．由结核分枝杆菌提纯出含有15.1％（按摩尔计算）的腺嘌呤的DNA样品，计算其它碱基的百分含量。2．计算分子量为3×107的双螺旋DNA分子的长度，含有多少螺旋（按一对脱氧核苷酸的平均分子量为618计算）？3．人体有1014个细胞，每个体细胞含有6.4×109对核苷酸，试计算人体DNA的总长度（Km）。答案.五、问答题1.核酸由DNA和RNA组成。在真核细胞中，DNA主要分布于细胞核内，另外叶绿体、线粒体和质粒中也有DNA；RNA主要分布在细胞核和细胞质中，另外叶绿体和线粒体中也有RNA。2.核酸中核苷酸之间是通过3'－5'磷酸二酯键相连接的。碱基配对是指在核酸中G-C和A-T(U)之间以氢键相连的结合方式。3.DNA双螺旋结构模型特点：两条反平行的多核苷酸链形成右手双螺旋；糖和磷酸在外侧形成螺旋轨迹，碱基伸向内部，并且碱基平面与中心轴垂直，双螺旋结构上有大沟和小沟；双螺旋结构直径2nm，螺距3.4nm，每个螺旋包含10个碱基对；A和T配对，G和C配对，A、T之间形成两个氢键，G、C之间形成三个氢键。DNA三级结构为线状、环状和超螺旋结构。稳定DNA结构的作用力有：氢键，碱基堆积力，反离子作用。RNA中立体结构最清楚的是tRNA，tRNA的二级结构为三叶草型，tRNA的三级结构为倒“L”型。维持RNA立体结构的作用力主要是氢键。4.c最高a最低c的G-C对多，a的G-C对少5.a复性成原来结构可能性最大，因为它是单一重复序列。6.真核mRNA的特点是：(1)在mRNA5'－末端有“帽子结构”m7G(5')pppNm；（2）在mRNA链的3'末端，有一段多聚腺苷酸(polyA)尾巴；（3）mRNA一般为单顺反子，即一条mRNA只含有一条肽链的信息，指导一条肽链的形成；（4）mRNA的代谢半衰期较长（几天）。原核mRNA的特点：（1）5'－末端无帽子结构存在；3'－末端不含polyA结构；（3）一般为多顺反子结构，即一个mRNA中常含有几个蛋白质的信息，能指导几个蛋白质的合成；（4）mRNA代谢半衰期较短（小于10分钟）。六、1．A=T=15.1%G=C=34.9%2.1.65×10-3cm4854个3．2.2×1011Km三．四、问答与计算1.大肠杆菌糖原的样品25mg,用2ml1mol/LH2SO4水解。水解液中和后,再稀释到10ml。最终溶液的葡萄糖含量为2.35mg/ml。分离出的糖原纯度是多少?2.上述化合物中(1)哪个是半缩酮形式的酮糖？(2)哪个是吡喃戊糖？(3)哪个是糖苷？(4)哪个是α-D-醛糖？3.五只试剂瓶中分别装的是核糖、葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉溶液,但不知哪只瓶中装的是哪种糖液,可用什么最简便的化学方法鉴别?答案.问答与计算184.6％2（1）C(2)D（3）E（4）B3用下列化学试剂依次鉴别（1）碘I2（2）Fehling试剂或Benedict试剂（3）溴水（4）HCl，甲基间苯二酚核糖－黄色或红色褪色绿色葡萄糖－黄色或红色褪色－果糖－黄色或红色－蔗糖－－淀粉蓝色或紫红色四．计算题1．某底物在溶液中的浓度为0.001mmol,而其活性中心的浓度的为100mmol,求活性中心的浓度比溶液中的的浓度高多少倍？2．酶作用于某底物的米氏常数为0.005mol,其反应速度分别为最大反应速度90%,50%,10%时，底物浓度应为多少？3．催化焦磷酸水解的酶的分子量为120000,由六个相同的亚基组成，纯酶的比活力为3600U/mg酶，它的一个活力单位（U）规定为：15分钟内在37℃标准条件下水解10微摩尔焦磷酸的酶量。求：（1）每mg酶在每秒钟内水解多少摩尔底物。（2）每mg酶中有多少摩尔的活性中心？（假设每个亚基上有一个活性中心）。(3)酶的转换系数4．称取25mg的蛋白酶粉配制成25ml酶液，从中取出0.1ml,以酪蛋白为底物用Folin-酚比色法测定酶活力，结果表明每小时产生1500μg酪氨酸。另取2ml酶液，用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg。若以每分钟产生1μg酪氨酸的量为1个活力单位计算，根据以上数据，求：A、1ml酶液中蛋白的含量及活力单位。B.1g酶制剂的总蛋白含量及总活力。C.酶比活力5．某酶的Km=4.7×10-5mol/L；Vmax=22μmol/min。当[S]=2×10-4mol/L，[I]=5×10-4mol/L，Ki=3×10-4mol/L时，求：I为竞争性抑制和非竞争性抑制时，V分别是多少？六、问答题1．为什么处于低介电环境中的基团之间的反应会得到加强？2．影响酶高催化效率的因素及其机理是什么？为什么说咪唑基是酸碱催化中的重要基团?3．什么是别构效应？简述别构酶的结构和动力学特点及其在调节酶促反应中的作用。4．某酶在溶液中会丧失活性，但若此溶液中同时存在巯基乙醇可以避免酶失活，该酶应该是一种什么酶，为什么？5．测定酶活力时为什么以初速度为准？6．为什么酶的最适pH不是一个物理常数？7．羧肽酶A催化甘氨酰酪氨酸水解时，其催化机制的几个效应是什么？8．同工酶作为一个重要生化指标，主要用于哪些研究领域？答案。计算题1.1×1052.0.45mol/L,0.05mol/L,0.006mol/L3.(1)4×10-5mol／sec(2)5×10-8mol(3)8×102／sec(即摩尔焦磷酸·秒-1／摩尔酶4.A、0.625mg蛋白质,250单位，B、0.625g,2.5×105单位C、400单位/毫克蛋白5.竞争性：V=13.5(mol/L)/min；抑制程度为：24.1%非竞争性：V=6.67(μmol/L)min；抑制程度为：62.5%六、问答题（要点）1.水减弱极性基团之间的相互作用。4.含-SH的酶，容易氧化与其它巯基生成-S-S-,HS-CH2CH3可防止酶失活。5.初速度时，产物增加量与时间呈正比。6.最适pH随底物种类、浓度、与缓冲液成分不同而不同，7.无共价催化。8.利用同工酶研究细胞基因、了解植物的生长发育、预测植物的杂种优势、研究植物的抗逆性等五．1．正常生物膜中，脂质分子以什么的结构和状态存在？2．流动镶嵌模型的要点是什么？3．外周蛋白和嵌入蛋白在提取性质上有那些不同？现代生物膜的结构要点是什么？4．什么是生物膜的相变？生物膜可以几种状态存在？5．什么是液晶相？它有何特点？6．影响生物膜相变的因素有那些？他们是如何对生物膜的相变影响的？7．物质的跨膜运输有那些主要类型？各种类型的要点是什么？答案。1.脂质分子以脂双层结构存在，其状态为液晶态。2.蛋白质和脂质分子都有流动性，膜具有二侧不对称性，蛋白质附在膜表面或嵌入膜内部3.由于外周蛋白与膜以极性键结合，所以可以有普通的方法予以提取；由于嵌入蛋白与膜通过非极性键结合，所以只能用特殊的方法予以提取。现代生物膜结构要点：脂双层是生物膜的骨架；蛋白质以外周蛋白和嵌入蛋白两种方式与膜结合；膜脂和膜蛋白在结构和功能上都具有二侧不对称性；膜具有一定的流动性；膜组分之间有相互作用。4.生物膜从一种状态变为另一种状态的变化过程为生物膜的相变，一般指液晶相与晶胶相之间的变化。生物膜可以三种状态存在，即：晶胶相、液晶相和液相。5.生物膜既有液态的流动性，又有晶体的有序性的状态称为液晶相。其特点为：头部有序，尾部无序，短程有序，长程无序，有序的流动，流动的有序。6.影响生物膜相变的因素及其作用为：A、脂肪酸链的长度，其长度越长，膜的