革兰阳性杆菌的鉴定20070425

1革兰阳性需氧杆菌的鉴定一、概述革兰阳性需氧杆菌的种类繁多，与临床疾病有关的棒状杆菌属、李斯特菌属、需氧芽孢杆菌属、丹毒丝菌属。这类细菌多为腐生性，广泛存在于自然界的水和土壤中，其中有些为人和动物的正常菌群，可条件致病，有些对人和动物具有高度致病性。二、临床常见的革兰阳性需氧杆菌及鉴定要点（一）棒状杆菌属1、定义及临床意义棒状杆菌属的细菌是革兰氏阳性、有独特形态（常排列为X、V、W形或中国字形、栅栏形）、菌体大小长短不一，常一端或两端膨大呈棍棒状的革兰氏阳性杆菌。大部分触酶阳性，动力阴性。除白喉棒状杆菌外，大多为条件致病菌，不产生外毒素，菌体较粗短，着色均匀，很少有异染颗粒，这些条件致病菌可致医院内感染，引起血液、组织器官感染，如菌血症、心内膜炎、骨髓炎等。2、常见的棒状杆菌（1）假白喉棒状杆菌(类白喉棒状杆菌)●微生物特性革兰阳性棒状杆菌，菌体形态酷似白喉棒状杆菌，较小，细长，无典型的异染颗粒。呈木栅栏样排列。●生化反应触酶阳性，还原硝酸盐，尿素阳性，不发酵糖类。●临床意义寄居于人类鼻腔、咽喉部外耳道、眼结膜、外阴和皮肤等的正常菌群，可引起心瓣膜修复术后的心内膜炎及肾移植病人致死性尿路感染。3、常用实验触酶、动力、CAMP试验、吡嗪酰胺酶和碱性磷酸酶试验;4、生化反应葡萄糖、木糖、甘露醇、乳糖、蔗糖、麦芽糖、七叶苷水解、硝酸盐还原试验、尿素。其它非白喉棒状杆菌还有结膜干燥棒状杆菌、化脓棒状杆菌、溃疡棒状杆菌、假结核棒状杆菌、溶血棒状杆菌、杰克棒状杆菌等。（2）白喉棒状杆菌●微生物特性革兰阳性棒状杆菌，没有荚膜、鞭毛和芽孢。菌体大小、长短不一，直或微弯，一端或两端膨大，呈棒状。有明显的异染颗粒。●生化反应触酶阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、糊精、还原硝酸盐。不分解乳糖，不液化明胶，吲哚阴性，尿素阴性。●临床意义白喉棒状杆菌是白喉的病原菌，白喉是一种急性呼吸道传染病，一般不侵入血流，在黏膜局部定植并产生白喉毒素，引起局部炎症和侵入血液后能形成毒血症致全身中毒症状。怀疑白喉棒状杆菌的必须进行毒力检测。5、其它棒状杆菌的临床意义菌名临床意义干燥棒状杆菌可引起心瓣膜置换术后的心内膜炎及外伤后深部组织感染化脓棒状杆菌人类感染已有报道2溃疡棒状杆菌可引起渗出性咽炎或白喉样疾病，也可引起组织感染假结核棒状杆菌主要引起家畜的慢性病，偶可引起人类的淋巴结炎、肺炎溶血棒状杆菌可引起咽炎和皮肤溃疡病杰克群棒状杆菌感染发生于颗粒细胞缺乏症、心脏手术病人，常于应用静脉导管有关6、常见棒状杆菌属的鉴别要点见表17、其他棒杆菌菌属的鉴别要点见表2（二）李斯特菌属1、定义及临床意义李斯特菌属包括产单核细胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、无害李斯特菌、格氏李斯特菌、斯氏李斯特菌、威氏李斯特菌等，只有产单核细胞李斯特菌对人和动物致病。单核细胞李斯特菌●微生物特性菌落小，半透明，灰色，有狭窄的β溶血环，有鞭毛，25℃有动力。●生化反应触酶阳性，35℃1～2天能发酵葡萄糖（产酸不产气）、麦芽糖、果糖、蕈糖、水杨苷。甲基红与V-P试验均阳性，CAMP试验阳性，七叶苷阳性，不能还原硝酸盐，吲哚、尿素均阴性，硫化氢阴性。，3～5天分解乳糖产酸。硝酸盐还原、吲哚、液化明胶、尿素都阴性●临床意义经胎盘、产道可感染胎儿和新生儿，对成人易引起脑膜炎、菌血症，易感者为免疫缺陷和各种原因所致免疫力下降者。（三）芽孢杆菌属1、炭疽芽孢杆菌●定义及临床意义炭疽芽孢杆菌俗称炭疽杆菌，以感染食草动物为主，因其芽孢抵抗力强，多途径传染，毒力强，对人类具有高度致病性。●微生物特性革兰阳性杆菌，菌体两端平截，新鲜标本直接涂片染色可见单个或短链状排列，无鞭毛，有荚膜。在血平板上培养12～15小时菌落周围不溶血。●生化反应动力阴性，能分解葡萄糖、麦芽糖、果糖、蔗糖及蕈糖，产酸不产气，还原硝酸盐，可液化明胶。●临床意义炭疽病是人兽共患的烈性传染病，自然感染以皮肤炭疽最为多见。2、蜡样芽孢杆菌●定义及临床意义蜡样芽孢杆菌俗称蜡样杆菌，广泛存在于自然界，易污染食品，引起食物中毒，夏秋季多见。●微生物特性革兰阳性大杆菌，菌体两端钝圆，短链状排列，有鞭毛，无荚膜。●生化反应动力阳性，V-P试验阳性，能水解淀粉，可还原硝酸盐，卵磷脂酶阳性（在菌落周围形成白色浑浊环），能分解葡萄糖产酸不产气，不分解甘露醇、阿拉伯糖和木糖。3●临床意义可使免疫功能低下或应用免疫抑制剂的患者引起心内膜炎、败血症和脑膜炎。眼外伤后感染可引起全身眼炎等。3、枯草芽孢杆菌动力阳性，能分解甘露醇、阿拉伯糖，产酸不产气，卵磷脂酶阴性。4、几种常见芽孢杆菌的鉴别要点见表35、基本实验吲哚、动力、明胶水解、42℃。6、生化反应葡萄糖（是否产气）、木糖、甘露醇、乳糖、蔗糖、麦芽糖、水杨苷、七叶苷水解、硝酸盐还原试验。7、临床实验室遇到的芽孢杆菌的鉴定特征见表4（四）猪红斑丹毒丝菌短小、细长的革兰阳性杆菌，动力阴性，触酶阴性，α溶血或不溶血，只能发酵葡萄糖，在明胶培养基上呈瓶刷子样生长。对万古霉素和氨基糖甙类耐药。心内膜炎、败血症及全身感染的病人。（五）乳酸杆菌属细长形或球杆形，有时呈短链或栅栏形，触酶阴性，大部分动力阴性。可引起败血症、肺炎、心内膜炎、脑膜炎等。（六）库特氏菌属规则、不分枝、比较大的杆形细菌，动力阳性，触酶阳性，氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阴性，不分解糖类产酸。（七）其它菌属产单核李斯特氏菌、猪红斑丹毒丝菌、乳酸杆菌属、库特氏菌属的鉴别要点见表5。表1种亲脂的硝酸盐还原尿素吡嗪酰胺酶碱性磷酸酶葡萄糖麦芽糖蔗糖拥挤棒状杆菌++_V_+__非发酵棒状杆菌非发酵亚种___++___非发酵棒状杆菌嗜脂亚种+__++___无脂菌酸棒状杆菌_VV+++VV斯特拉斯棒状杆菌___+V+__耳棒状杆菌___++___牛棒状杆菌+__V++__膀胱炎棒状杆菌__++_+__白喉棒状杆菌_V___++_微黄棒状杆菌_____+__溶葡糖醛酸棒杆菌_VV+V+V+杰氏棒状杆菌+__+++V_库氏棒状杆菌_+++_+++麦氏棒状杆菌++__++_+4极小棒状杆菌___+++V+马氏棒状杆菌ND+_+NDVVV多毛棒状杆菌++++_+__接近棒状杆菌_+_VV___假白喉棒状杆菌_+++V___假结核棒状杆菌_V+_V++V牛肾盂炎棒状杆菌__++_+V_精子棒状杆菌_VV+_+V+纹带棒状杆菌_+_+++_+解脲棒状杆菌+_++V___干燥棒状杆菌_+_+++++5表2菌β溶血触酶动力硝酸盐还原尿素七叶苷水解葡萄糖木糖甘露醇乳糖蔗糖麦芽糖CAMP菌落颜色伯尔德放线菌______+____+内氏放线菌___V+++VV+++_纽氏放线菌纽氏亚种_+_+__+++++++纽氏放线菌无硝亚种_+____+++++++龋齿放线菌___++V+V_V+V_化脓放线菌(明胶+)+_____++V+VV_粘放线菌_+_+VV+V_+++_溶血隐秘杆菌(明胶_)+_____+__+V+液化金杆菌(明胶+)_+V__++__+++柠檬乳酪棒杆菌_+__________棕褐表皮短杆菌_+_+________褐色扩展短小杆菌_+_+________黄褐金橙黄微杆菌V+++_++_+_++黄褐人皮杆菌_+___+++_+++黄色偶发分枝杆菌_+_VVV+_V___抗酸骚动厄氏菌_++VV+++_+++黄色溶黄嘌呤厄氏菌_+++V+++_+++黄色马红球菌_+_VVV+VV_+V+粉红龋齿罗氏菌_+_+_++___++耳炎苏黎世菌_+__________+CDC棒形菌群E______++_V++CDC棒形菌群G-2_+____+___+V水生棒杆菌(明胶_)_+++_+++VV__黄色纤维单胞菌属SPPV+++_+++V+++黄色微杆菌群SPP_+_V_++V++++黄橙6表3鉴别项目炭疽杆菌枯草杆菌蜡样及其他芽孢杆菌形态荚膜有无无动力_++菌落粗糙，边缘呈卷发状粗糙，锯齿状有蜡样光泽溶血性不容或微溶溶血溶血串珠试验+__炭疽噬菌体裂解+__青霉素抑制+__注：●噬菌体裂解试验：取待检菌4-6小时肉汤培养物1接种环，密集均匀涂布于普通琼脂平板上，干后在平板中央加1滴噬菌体，培养后出现噬菌斑为阳性。●串珠试验：炭疽杆菌在含0.05-0.5u/ml的青霉素的培养基中，由于细胞壁受损，可发生形态变异，菌体形成大而均匀的圆球，呈串珠链状生长。7表4种动力吲哚硝酸盐还原明胶水解七叶苷水解42℃生长葡萄糖产气产酸葡萄糖木糖甘露醇乳糖蔗糖麦芽糖水杨苷炭疽杆菌__++V+_+___++_蜡状杆菌和蕈状芽孢杆菌+_V+VV_+___V++巨大芽孢杆菌V__+VV_+V+V+VV地衣芽孢杆菌V_+V++_+V+_++枯草芽孢杆菌V_V+++_+_+_+V坚强芽孢杆菌+_VVV+_+V+V++_短小芽孢杆菌+__+++_+_+_+_+浸麻类芽孢杆菌V_++V++V++++多粘芽孢杆菌+_++++++V+++环状芽孢杆菌+_V_+V_+++++++嗜热脂肪芽孢杆菌（65℃生长）+_+++_+__V++侧孢芽孢杆菌+V++++_+_+__+蜂房类芽孢杆菌++V+++_+___++短芽孢杆菌+_VVV+_V_+_VV球形芽孢杆菌+_V__V_______凝结芽孢杆菌+____+_+____+苏云金芽孢杆菌+_+++_+___++迟缓芽孢杆菌+___+__W_细菌名称专性需氧β溶血触酶动力硫化氢七叶苷葡萄糖甘露醇水杨苷其他特征产单核李斯特氏菌_+++（25℃）_++_+伞形物猪红斑丹毒丝菌____+_+__瓶刷子乳酸杆菌属______++/_+/_西红柿汁库特氏菌属+_++_/V____似鸟羽