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近期实验计划---黄刚一、10月25-31号开始摸索豚鼠造模实验的条件，并提前准备好笼子和垫料。二、10月29号开始联系订购动物，预计在11月3号左右能到。三、11月4-7号饲养豚鼠，观察动物的情况，筛选出模型组动物，并称重标记，分好组别，为后续实验做准备。四、11月8-15号给豚鼠灌胃。五、11月16-22号用生物采集信号器测定豚鼠的哮喘潜伏期和哮喘持续时间并研究其量效关系。采用心脏取血，经离心后取得血清，于-20度的冰箱保存。六、11月23-26号，用相关软件统计和处理数据，写成文章实验方案麻杏石甘汤平喘作用的量效关系实验研究一、摘要目的：麻杏石甘汤混料设计剂量对豚鼠的平喘功效进行实验研究，探讨其相应的量效关系及可能的作用机制，为临床规范其合理用量提供客观科学的依据；并用生物信号采集系统测其哮喘潜伏期和哮喘持续时间来研究其量效关系。方法：采用磷酸组胺和乙酰胆碱的等体积混合液进行喷雾造模，然后设为正常组、模型对照组、阳性对照组、麻杏石甘汤剂量1-13共16个组。除正常组和模型对照组灌胃生理盐水外，13个剂量组灌胃给药麻杏石甘汤，末次给药后1小时测定豚鼠的引喘潜伏期和哮喘持续时间，统计结果并比较差异，做出量效关系图；1．实验方法和给药采用随机数字法将160只豚鼠随机分为16组，模型组、空白组、阳性组、麻杏石甘汤给药组（1-13剂量），10只/组，标记并称重，以上各组豚鼠灌胃量为10ml/kg,其中模型组和空白组灌胃等量NS，每日一次，共8天。表中为麻杏石甘汤给药混料设计剂量表，其浓度为1g/ml的生药。剂量麻黄杏仁甘草石膏总量N116.17829129.141761.801228.828746215.95N287.93148101.886811.9770214.15465215.95N3107.97511.9035420.0148976.05657215.95N49.40125680.0639936.8913989.59337215.95N53.04195433.7192297.0606182.12821215.95N660.223184.647628.8849162.19437215.95N772.737129.99316108.50224.717489215.95N831.3153511.92475136.728735.98123215.95N939.9157280.964959.4183635.65102215.95N1023.4492550.824045.903197135.7735215.95N1149.450213.50565161.1228101.8713215.95N12141.084324.1813835.9013814.78292215.95N13（原方）30.8530.8530.85123.4215.952．引喘潜伏期测定豚鼠连续给药8天，空白组和模型组灌胃相应体积的生理盐水溶液，麻杏石甘汤给药组按表中的1-13剂量分别灌胃相应药液（10ml/kg）。试验前豚鼠禁食12h，不禁水。于末次给药后1h将豚鼠胸廓绑定于连有生物信号采集系统的呼吸换能器，动物置于连有超声雾化器的玻璃钟罩内，以1%氯化乙酰胆碱+0.2%磷酸组胺的等体积混合液喷雾8秒，流速1.6ml/min，封闭时间2min,生物信号采集系统同步记录呼吸波，波形结合肉眼观察开始出现哮喘症状的时间（以首次抽搐为准）并记录数据，即引喘潜伏期。3．哮喘持续时间测定豚鼠连续给药8天，空白组和模型组灌胃相应体积的生理盐水溶液，麻杏石甘汤给药组按表4中的1-9剂量分别灌胃相应药液（10ml/kg）。试验前豚鼠禁食12h，不禁水。于末次给药后1h将豚鼠胸廓绑定于连有生物信号采集系统的呼吸换能器，动物置于连有超声雾化器的玻璃钟罩内，以1%氯化乙酰胆碱+0.2%磷酸组胺的等体积混合液喷雾8秒，流速1.6ml/min，生物信号采集系统持续记录30分钟内的哮喘呼吸波，观察喷雾开始至呼吸波形恢复正常的一段时间（以末次抽搐为准）作为哮喘持续时间（超过观察期的以30分钟计）。4．动物具体标记方法4.1动物标记方法总共160只豚鼠根据哮喘模型的筛选，从中筛选出模型组动物10只。然后把全部动物随机分成十个组，第一组为模型组、阳性组、空白组、剂量1-13的1号动物，第二组为模型组、阳性组、空白组、剂量1-13的2号动物，以此类推，第十个组为模型组、阳性组、空白组、剂量1-13的10号动物。1：笼子外贴上标签：标记为1-10号组。2：动物的头部为用苦味酸标记为+符号则为模型组，O符号位阳性组，不标记为空白组。N1-N13组则标记为阿拉伯数字1-13。动物背上的阿拉伯数字则为编号。具体说明如图所示这只豚鼠所标记的就是为模型组1号动物此动物则为阳性组1号动物此动物为空白组1号此动物为N1剂量组的1号动物以此类推，所有的动物都为此方法标记。4.2动物灌胃和用生物采集信号器测引喘潜伏期和哮喘持续时间的方法：11月8号-11月15号第一天：早上8点半到9点给第一组的动物灌胃，包含有模型组、阳性组、空白组、和N1-N13的1号动物。9点到9点半给第二组的动物灌胃，包含有模型组、阳性组、空白组、和N1-N13的2号动物第二天：在早上8点半到10点给一、二、三组动物灌胃。（48只）第三天：给1-4组动物灌胃（64只）第四天：给1-5组动物灌胃（80只）第五天：给1-6组动物灌胃（96只）第6天：给1-7组灌胃（112只）第7天：给1-8组灌胃（128只）第8天：末次给药1-2组，一部分实验人员1小时后用生物采集信号检测引喘潜伏期和哮喘持续时间，然后取血，离心得血清，于-20度的冰箱保存。另一部分人员继续按规定时间给3-10组的动物灌胃。（160只）11月16号-11月22号第九天：第三组的动物末次给药1小时，一部分实验人员1小时后用生物采集信号检测引喘潜伏期和哮喘持续时间，记录数据。然后取血，离心得血清，于-20度的冰箱保存。另一部分人员继续按规定时间给4-10组的动物灌胃。第十天：第4组的动物末次给药1小时，一部分实验人员1小时后用生物采集信号检测引喘潜伏期和哮喘持续时间，记录数据。然后取血，离心得血清，于-20度的冰箱保存。另一部分人员继续按规定时间给5-10组的动物灌胃第十一天：第5组的动物末次给药1小时，一部分实验人员1小时后用生物采集信号检测引喘潜伏期和哮喘持续时间，记录数据。然后取血，离心得血清，于-20度的冰箱保存。另一部分人员继续按规定时间给6-10组的动物灌胃第十二天：第6组的动物末次给药1小时，一部分实验人员1小时后用生物采集信号检测引喘潜伏期和哮喘持续时间，记录数据。然后取血，离心得血清，于-20度的冰箱保存。另一部分人员继续按规定时间给7-10组的动物灌胃第十三天：第7组的动物末次给药1小时，一部分实验人员1小时后用生物采集信号检测引喘潜伏期和哮喘持续时间，记录数据。然后取血，离心得血清，于-20度的冰箱保存。另一部分人员继续按规定时间给8-10组的动物灌胃第十四天：第8组的动物末次给药1小时，一部分实验人员1小时后用生物采集信号检测引喘潜伏期和哮喘持续时间，记录数据。然后取血，离心得血清，于-20度的冰箱保存。另一部分人员继续按规定时间给9-10组的动物灌胃第十五天：第9-10组的动物末次给药1小时，一部分实验人员1小时后用生物采集信号检测引喘潜伏期和哮喘持续时间，记录数据。然后取血，离心得血清，于-20度的冰箱保存。结果根据生物采集信号所得的数据，以均数±标准差表示，多组数据比较采用单因素方差（ANOVA）分析，两组间比较采用t检验，采用SPSS11.5统计软件进行分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。