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专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养基础知识•(一)培养基•1、培养基的分类•物理性质：、、、：、、、：、、2、培养基的用途：液体培养基应用于。固体培养基应用于。半固体培养基则常用于。合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于。选择培养基：加入青霉素的培养基。加入高浓度食盐的培养基。不加氮源的无氮培养基。不加含碳有机物的无碳培基。鉴别培养基加入伊红美蓝鉴别，菌落，并有。3、培养基的配置原则：：根据微生物的种类、培养的目的选择不同的原料配制培养基。：配制培养基时要注意各营养物质的浓度和比例pH要适宜。4、培养基的营养组成：各种培养基的具体配方不同，但一般都含有、、、、。不同培养基还要满足不同微生物对特殊以及的要求。（二）无菌技术：实验室常用的灭菌方法：、、。1、接种环、接种针、试管口等使用；2、玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是；3、培养基、无菌水等使用，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。实验室常用的消毒方法：、、、。实验操作•本实验采用培养基对大肠杆菌进行纯化，可分为和两个阶段进行。•1、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基•方法步骤、、、、。•2、纯化大肠杆菌•微生物接种的方法最常用的是和。•稀释涂布平板法分为和操作两步。课题延伸•菌种保存•对于频繁使用的菌种采用的方法，对于需长期保存的菌种，可以采用的方法。根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择性培养基和鉴别培养基，结合显微镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上进行培养。⑴用无氮培养基可以筛选出。⑵用不含有机碳源的选择培养基可以筛选出。⑶酵母菌的筛选需要在常规培养基另加入。⑷用加入了较高浓度的NaCl的选择培养基可以筛选出，或者根据菌落的颜色呈现色，将其挑取单独培养。⑸利用伊红－美蓝培养基培养混合菌，菌落呈色，并带有金属光泽的是，挑取单个菌落培养。结合显微镜检和进一步用伊红－美蓝培养基鉴别来确定。⑹在无氧条件下培养混合菌，可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出。圆褐固氮菌硝化细菌青霉素金黄色葡萄球菌金黄深紫大肠杆菌乳酸菌和酵母菌酵母乳酸菌考点例析：07年32.生物选考题（15分）A.［生物——选修1生物技术实践］某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________________和_______。除此之外，培养基还必须含有基本成分是_____________和____________。（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是__________。氮源（碳源不作要求）碳源无机盐水高压蒸汽灭菌链接高考（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种____________作为对照进行实验。（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越___________________。（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐___________________细菌，这种培养基被称为___________________。恒温培养箱无菌水多高盐（或NaCl）选择性培养基