血清葡萄糖参考方法-附录1

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资源描述

1附录1试剂试剂名称配制溶液的浓度配制方法贮存保质期硫酸锌(皓矾)22g/L准确称取22gZnSO4.7H2O,放入烧杯内,用800ml热的无CO2水溶解后转移至1000ml容量瓶内,补足至刻度线。密闭玻璃瓶室温保存1个月氢氧化钡饱和溶液准确称取80gBa(OH)2.8H2O,放入烧杯内,用800ml热的无CO2水溶解后转移至1000ml容量瓶内,补足至刻度线。带有碱石灰帽的玻璃瓶密闭室温保存1个月氢氧化钡0.11N用无CO2水稀释245ml饱和Ba(OH)2溶液→1000ml。密闭玻璃瓶室温保存1天安息香酸1g/L准确称取2.0g安息香酸,放入烧杯内,用1800ml热的试剂水溶解后转移至2000ml容量瓶内,补足至刻度线。密闭试剂瓶2-8℃3个月Tris-Hcl1.5%准确称取31.52gTris-Hcl,放入烧杯内,用1800ml试剂水溶解后转移至2000ml容量瓶内,补足至刻度线。密闭试剂瓶2-8℃2周Tris-Base1.2%准确称取6.06gTris-Base,放入烧杯内,用400ml试剂水溶解后转移至500ml容量瓶内,补足至刻度线。密闭试剂瓶2-8℃2周醋酸镁pH7.5移取800mlTris-Hcl原液和200mlTris-Base原液至烧杯内充分混匀。准确称取1.1g醋酸镁溶解于混合好的Tris溶液中,在25℃测定混合液pH值。密闭试剂瓶2-8℃2周牛血清白蛋白0.2%准确称取0.5g牛血清白蛋白,放入烧杯内,用200mlTris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,补足至刻度线。密闭试剂瓶2-8℃2周5'三磷酸腺嘌呤二钠盐准确称取0.8268gATP二钠盐,放入烧杯内,用200mlTris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,补足至刻度线。密闭试剂瓶2-8℃2周氧化型β-烟酰胺腺嘌准确称取0.9952gβ-NAD+,放入烧杯内,用200mlTris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,补足密闭试剂瓶2-8℃2周2呤二核苷酸二钠盐至刻度线。己糖激酶己糖激酶原液酶总活性应为1250U采用25℃称量法依据己糖激酶测定的含量获得总活性为1250U己糖激酶,放入烧杯内,用200mlTris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,用Tris-Mg缓冲液补足至刻度线。密闭试剂瓶2-8℃2周6-磷酸葡萄糖脱氢酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶原液总活性应为1250U采用25℃称量法依据6-磷酸葡萄糖脱氢酶测定的含量获得总活性为1250U6-磷酸葡萄糖脱氢酶,放入烧杯内,用200Tris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,用Tris-Mg缓冲液补足至刻度线。密闭试剂瓶2-8℃2周酶试剂试剂验证合格后,用Tris-Mg缓冲液稀释200mlATP原液、200mlβ-NAD+原液、总活性800U的己糖激酶原液和总活性800U的6-磷酸葡萄糖脱氢酶原液→1000ml,轻轻颠倒混匀,不要用力振荡。密闭试剂瓶2-8℃2周葡萄糖标准原液10g/L准确称取5.000gSRM917b标准物质,放入清洁干燥经过灭菌处理的烧杯内,加入300安息香酸稀释液进行溶解,溶解后转移至500mlclassA级容量瓶中,用安息香酸稀释液多次冲洗烧杯,将烧杯内的葡萄糖溶液全部转移至容量瓶,加安息香酸溶液至500ml标记线下1cm处,把容量瓶放20℃±1℃水槽中,水没至瓶颈处,密闭,用安息香酸稀释液补足前平衡溶液30分钟。30分钟后安息香酸稀释液补足,塞紧颠倒混匀至少10次,每一次颠倒、旋转倒置容量瓶10秒。密闭试剂瓶2-8℃葡萄糖液60%用1g/L安息香酸稀释60ml葡萄糖原液→100ml密闭试剂瓶2-8℃1周酚酞0.5%准确称取0.125g酚酞溶解于20ml95%乙醇中,转移至25ml容量瓶内,用95%乙醇补足至刻度线。密闭试剂瓶2-8℃3个月试剂水ISO3696定义的3级以上试验用水无CO2水试剂水在敞口的容器中煮沸15分钟,盖盖住冷却,直到使用前乙醇95%质控物从低温冰柜取出的质控品应放置室温10分钟,并擦去瓶上的水分。垂直固定质控品瓶,轻弹使冻干粉落入瓶底。天平称重。打开瓶盖,轻轻地移去胶塞。用检定过的(见下面的注释)稀释配液仪沿管壁缓慢精确加入去离子水至复溶量。天平再次称重,保留称重记录。溶10分钟后,轻轻颠倒20-30次充分混匀各成分。3仪器名称安装/使用条件数据测定范围测定模式技术指标校准情况紫外可见分光光度计温度:(5-35)℃湿度:(45-85)%避光,不能直接放在风口,防震,外围禁放热源。安装场所周围不能有大容量变压器等强磁场,周围环境宜清洁无尘。电压稳定,避免共用电源设备的频繁开关。应有接地线,接地电阻〉100欧姆,仪器两侧各应有大于20cm空间。ABS:-3.000-3.000或(0.0-200.0)%TABS;%T;Conc波长:(190-1100)nm波长准确度:±0.2nm波长重现性:±0.1nm吸光度准确性:±0.002-0.004吸光度重现性:±0.001-0.002噪声:≤0.0002Abs基线稳定性:≤0.0003Abs/h基线平稳度:±0.001A光谱带宽:≤1.5nm光学精度:±0.005A杂散光:≤0.05%T每年至少进行一次校准。大型实验前应进行校准点式温度计温度:(0-100)℃湿度:90%0-100℃℃准确度:±0.01℃重复性:±0.005℃解析度:±0.0001℃每年至少进行一次校准。大型实验前应进行校准4pH计温度:(5-45)℃湿度:(5-85)%pH范围:-1.000~14.000pH分辨率:0.002/0.01准确度:±0.002斜率:(80-120)%温度范围:-5~105℃温度分辨率:±0.3℃每次使用前进行3个pH校准电子分析天平温度:(5-35)℃湿度:(45-85)%0.0001-120g准确度级别:特种准确度级最大允许误差:±0.0005g每年一次进行校准。必要时可增加校准电子天平温度:(5-35)℃湿度:(45-85)%0.01-4000g准确度级别:高准确度级最大允许误差:±0.05g每年至少进行一次校准。大型实验前应进行校准

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