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电阻抗型血细胞分析仪的应用心得及脑脊液胸腹水常规检查张福勇2014年8月4日主要内容——操作部分1.检验前（1）是否有凝块，眼观，竹签轻挑，注意盖子内部。（2）血量2ml，少于1ml→手工上机，完成后改起始号。（3）进架，架号与编号尾数对应，小号在前，大号在后。（4）上机，检查起始号是否一致。若修改，必须打两次√。2.检验中（1）仪器运行是否良好，试剂合格，室内质控合格。（2）是否跳号。报警信息（试剂不足，部分吸样，贫血。）3.检验后（1）分析各检测参数，分析直方图、散点图、提示信息，必要时涂片复检。（2）结合临床，审核报告。（3）危急值的报告与登记。超敏C反应蛋白主要内容——理论部分一、电阻抗型血细胞分析仪（1）电阻抗原理（2）红细胞与血小板的检测原理（3）白细胞的检测原理（4）血红蛋白的检测原理（5）基于检测原理的常见误差分析二、脑脊液胸腹水常规检查（1）改良牛鲍计数板（2）总数的计算（3）性状描述、定性（4）分类的要点（1）电阻抗原理电源在电极之间产生微小的电压细孔部烧杯外部电极血细胞血细胞浮游液内部电极电阻稳定电流血细胞检测原理血细胞通过小孔血细胞大脉冲大1.用等渗电解质溶液稀释全血2.通过小孔感应区时，电阻增加3.引起了电压变化而出现一个脉冲信号4.细胞体积越大，引起的电压变化越大，产生的脉冲振幅越高5.根据脉冲信号的大小测定不同大小的细胞，从而对细胞进行分群•要点–血细胞是非传导性–细胞通过小孔时会引起电阻的变化–脉冲振幅的高低反映了细胞体积的大小–脉冲数量反映了细胞数量（1）电阻抗原理RBC：7.2μmPLT：1.5~3μmWBC：6~20μm（2）红细胞及其参数的检测原理·含有白细胞因素，但可忽略。RBC：WBC=750:1MCV：红细胞平均体积（脉冲平均高度）HCT=RBC×MCVMCH=HGB÷RBCMCHC=HGB÷HCT误差分析（1）RBC假性增高（2）RBC假性减低（2）血小板检测原理（1）血小板与红细胞在同一通道检测（2）血小板通常在2~30fl（3）大于右侧阈值者考虑为红细胞误差分析（1）PLT↑：红细胞碎片、小红细胞等（2）PLT↓：血小板聚集、巨血小板等（3）白细胞计数及分群的检测原理WBC计数：电阻抗原理（1）排除RBC影响：溶血剂（2）排除PLT影响：体积差异淋巴细胞群单个核细胞群粒细胞群分群原理：脉冲高低，细胞大小Q：中间细胞群中包括单核细胞，单核细胞的体积不一定小于粒细胞，那为何中间细胞群位于粒细胞群之前？（4）血红蛋白检测原理：分光光度比色法检测物质为血红蛋白衍生物（1）氰化血红蛋白含有氰化物（2）月桂酰硫酸钠（SLS）血红蛋白不含氰化物校正仪器时以氰化高铁法为准最大吸收波长为540nm国际血液标准委员会（ICSH）推荐方法误差分析：影响检测光路的因素（5.1）红细胞计数的误差分析（1）RBC假性增高：WBC极度增高、严重贫血、巨大血小板？（2）RBC假性减低：红细胞凝集（冷凝集、抗凝剂相关性、自身免疫性）冷凝集解离前测定结果冷凝集解离后测定结果冷凝集素综合征·在31℃以下·自身红细胞抗原发生可逆性凝集常见病·白血病、恶性淋巴瘤或全身性红斑狼疮·肺炎支原体属感染·传染性单核细胞增多症处理方法·37℃水浴（5.2）血小板计数的误差分析（1）PLT假性增高：红、白细胞碎片，小红细胞；冷蛋白血症处理办法：镜检确认，手工计数；光学法仪器复查。（2）PLT假性减低：血小板凝集（采血，抗凝剂），血小板卫星现象，巨大血小板处理办法：镜检确认，手工计数；光学法仪器复查。EDTA依赖性血小板聚集患者，男性，26岁，呼吸内科，发热待查PLT9×109/LWBC10.2×109/LRBC4.50×1012/LHGB120.5g/LHCT0.45MCV80flPLT185×109/LWBC9.4×109/LRBC4.48×1012/LHGB120g/LHCT0.45MCV80flRBC直方图现双群红细胞PLT直方图尾部持续抬高可见红细胞大小不等、小红细胞、红细胞碎片患者，女性，39岁，血液科，血小板增多查因WBC7.50×109/LRBC4.91×1012/LHGB93.00g/LHCT0.3MCV60.6flRBC-CV0.27PLT726×109/LQ:血常规初诊PLT计数偏低应如何处理？（国际复检规则小于100）①查看血样是否有凝块有→重抽复查无→②②复查正常→核实，审核不变→③③查看PLT直方图及提示信息直方图良好，无提示信息，可考虑结合临床审核，最好先阅片直方图尾部抬起，巨血小板、血小板凝块→④④镜检发现血小板聚集抽血不顺引起的聚集→重抽，正常→审核EDTA依赖性的聚集→更换抗凝剂→正常→⑤⑤联系临床，了解患者应无牙龈出血、皮下瘀斑、紫癜等出血倾向，嘱医生告知患者今后血常规应采用特殊抗凝剂采血。（通常为枸橼酸钠）（5.3）白细胞计数的误差分析（1）WBC假性减低：白细胞凝集（少见）（2）WBC假性增高：血小板凝块、巨大血小板，冷蛋白，红细胞溶血不良，有核红细胞红细胞溶血不良（1）脂类代谢异常：红细胞膜表面与脂类结合形成脂质颗粒保护膜（2）红细胞膜表面结构异常：异常血红蛋白血症常见于（1）肝功能低下（肝硬化、肝癌晚期、胆道阻塞）（2）高脂血症、高胆固醇制剂输液治疗中（3）异常血红蛋白症（Hgb-S症、Hgb-C症）处理办法：人工显微镜形态学镜检有核红细胞的干扰外周血中红细胞的数量是白细胞的三次方数量级大多数NRBC被当作WBC，红细胞和淋巴细胞峰低谷上升，出现报警提示白细胞计数结果必须按如下公式予以校正上式中，X为未校正前白细胞数，Y为在白细胞分类计数时，计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。——《全国临床检验操作规程》第3版白细胞校正数/L=X×100100+Y（5.4）血红蛋白检测的误差分析脂血症异常血浆蛋白严重白细胞增多胆红素增高体内溶血红细胞不溶解患者，男，30岁，烧伤整形外科该图来源于北京协和医院张时民教授博客患者，男性，30岁，血液内科一病区，临床诊断为慢性髓细胞性白血病。急查血常规：问：为什么HGB与HCT的下降程度不一致？HCT结果为0.31，对应的HGB应在100g/L左右，而该结果HGB仅为49g/L。病例思考题：WBC423.5×109/LRBC1.9×1012/LHGB49.00g/LPLT225×109/LMCV159flHCT0.31自学内容•红细胞计数的临床意义•血小板计数的临床意义•白细胞计数及其分类的临床意义•血红蛋白检测的临床意义•其他参数的临床应用及其意义二、脑脊液胸腹水常规检查（1）性状描述、定性（2）改良牛鲍计数板（3）总数的计算（4）分类的要点（1）性状描述、定性试验性状·透明度·颜色：无色、红色、黄色、乳白色、淡绿色、褐黑色等定性试验脑脊液：潘迪试验，球蛋白与苯酚结合，形成不溶性蛋白盐沉淀胸腹水：Rivalta试验，0.1%乙酸溶液，使酸性黏蛋白形成白色雾状沉淀混浊、血性标本应离心取上清做定性试验3mm三等分每个大格面积为1mm2计数池高度为0.1mm容积=1mm2×0.1mm=0.1mm3=0.1μl（2）改良牛鲍计数板（3）总数的计算细胞总数=n/4×10×106×稀释倍数工欲善其事，必先利其器清洁：计数板、盖玻片干燥干净：试管、枪头充池前：充分混匀，脑脊液1:1，胸腹水1:3（4）细胞分类要点临床上通常细胞总数50×106/L时，进行细胞分类脑脊液有核细胞总数单个核细胞百分比多叶核细胞百分比胸腹水有核细胞总数TH-间皮及组织细胞多叶核细胞百分比单个核细胞百分比单个核：小，圆形，核居中，胞浆少，核质比大，一般包括L、M，提示病毒、结核感染多叶核：较大，核偏位，分叶，胞浆透明丰富主要包括N，提示细菌感染或非特异性感染持续的学习能力是适应社会发展和明天的需要，为社会多做贡献，实现人生价值的根本条件。推荐论坛：丁香园-临床检验板块态度决定高度谢谢！