双倒数作图法米氏方程

米氏方程与双倒数作图法(Lineweaver-Burkplot)米氏方程（Michaelis-MentenEquation）或米曼氏动力学（Michaelis-Mentenkinetics）是由LeonorMichaelis和MaudMenten在1913年提出，是酶学中极为重要的可以描述多种非变异构酶动力学现象、表示一个酶促反应的起始速度V（有些资料中也称为Vo）与底物浓度[S]关系的速度方的方程，米氏方程形式如下：其中，Vmax表示酶被底物饱和时的反应速度，Km值称为米氏常数，是酶促反应速度V为最大酶促反应速度值一半时的底物浓度。在酶促反应中，底物情况在低浓度下，反应相对于底物是一级反应（firstorderreaction）；而当底物浓度处于中间范围时，反应（相对于底物）是混合级反应（mixedorderreaction）；当底物浓度增加时，反应由一级反应向零级反应（zeroorderreaction）过渡；当底物浓度[S]逐渐增大时，速度V相对于[S]的曲线为一双曲线。下图为米氏方程的模拟作图：酶促反应中的米氏常数的测定和Vmax的测定有多种方法。比如固定反应中的酶浓度，然后测试几种不同底物浓度下的起始速度，即可获得Km和Vmax值。但直接从起始速度对底物浓度的图中确定Km或Vmax值是很困难的，因为曲线接近Vmax时是个渐进过程。因此，通常情况下，我们都是通过米氏方程的双倒数形式来测定，即Lineweaver-Burkplot，也可称为双倒数方程(double-reciprocalplot)：将1/V对1/[S]作图，即可得到一条直线，该直线在Y轴的截距即为1/Vmax，在X轴上的截距即为1/Km的绝对值。示意图如下：