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第六章基因工程及其应用第六章基因工程及其应用能发荧光的热带斑马鱼?能发光的水母能否培养出具有抗虫性状的抗虫棉呢？胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取，产量低成本高。而微生物生长迅速，容易控制。能否让微生物产生出人的胰岛素等珍贵药物？这些定向改造基因的设想能实现吗？定向改造生物的技术——基因工程又称基因拼接技术,或重组DNA技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改造生物的遗传性状。基因工程概念•培育转基因抗虫棉的简要过程：你认为上述培育转基因抗虫棉的关键步骤有哪些？普通棉花(无抗虫特性)苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因导入棉花细胞(含抗虫基因)抗虫棉花(有抗虫特性)与运载体DNA拼接•基因的剪刀——限制性内切酶（简称限制酶）（一）基因操作的工具限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。特点：特异性。即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。•基因的剪刀——限制性内切酶（简称限制酶）大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。限制酶限制性内切酶作用过程点击播放CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAG练习使用EcoRI剪切目的基因CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAG目的基因黏性末端什么是黏性末端？被限制酶切开的DNA两条单链的切口带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？思考:是2.基因的针线—DNA连接酶DNA连接酶连接的是两个脱氧核苷酸分子的什么部位？基因操作的工具磷酸二酯键磷酸二酯键DNA连接酶的作用过程点击播放基因的针线：DNA连接酶GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG用同种限制酶切割•外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)？导入过程需要运输工具——运载体。•运载体的作用有哪些？作用一：转移外源基因作用二：大量复制外源基因。3.基因的运输工具——运载体基因操作的工具常用的运载体有两类：1）质粒(最常用）（小型环状DNA)2）噬菌体或某些动植物病毒基因工程的“四步曲”提取目的基因1目的基因与运载体结合2将目的基因导入受体细胞3目的基因的检测和鉴定4•目的基因（三）基因操作的基本步骤目的基因是人们所需要转移或改造的基因。（三）基因操作的基本步骤•步骤二：目的基因与运载体重组1）2）3）（三）基因操作的基本步骤•常用的受体细胞：•将目的基因导入受体细胞的原理•步骤三：目的基因导入受体细胞（三）基因操作的基本步骤•步骤四：目的基因的检测和鉴定不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。（三）基因操作的基本步骤•受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗？12基因工程的操作工具1.基因的剪刀——限制酶2.基因的针线——ＤＮＡ连接酶3.基因的运输工具——运载体基因工程的操作步骤1.目的基因的提取2.目的基因与运载体结合3.目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定基因工程的原理基因重组基因工程的正确操作步骤是:①使目的基因与运载体结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求④提取目的基因A.③②④①B.②④①③C.④①②③D.③④①②要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是()①限制酶②连接酶③解旋酶④还原酶Ａ．①②Ｂ．③④Ｃ．①④Ｄ．②③A下列关于基因工程的叙述中,正确的是:A.限制酶只用于提取目的基因B.细菌体内的环状DNA均可作运载体C.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接D.重组DNA分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成.以下说法正确的是:A.目的基因是指重组DNAB.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.DNA重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体D.只要受体细胞中含有目的基因，目的基因就一定能够成功表达CB给科学插上想象的翅膀，你会收获更多！