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《比例提取物与标准提取物的检测方法对比》西安源森生物科技有限公司实验室提供:植物提取物的检测方法常见的有五种：高效液相色谱分析法（HPLC）、紫外吸收光谱分析法（UV）、薄层色谱分析法（TLC）、气相色谱分析法（GC）和原子吸收光谱分析法（AAS）。每一种方法的作用原理和应用都各不相同。其中，HPLC和UV为标准植物提取物的常用检测方法，TLC被用于比例植物提取物的检测，GC用来检测挥发性液体或油类，AAS用于提取物重金属含量的检测。在此，源森实验室以板蓝根提取物水杨酸含量HPLC检测和薄荷10:1TLC检测为例，来对比例提取物与标准提取物的检测方法进行对比分析。HPLC检测法与TLC检测方法介绍HPLC高效液相色谱分析法，又称“高压液相色谱”、“近代柱色谱”等。它是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。TLC薄层色谱分析法，又称薄层层析。是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固—液吸附色谱。在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色。板蓝根水杨酸HPLC检测和薄荷10:1TLC检测试验板蓝根提取物-水杨酸含量HPLC测定法1.方法原理：样品加甲醇稀释，经液相色谱分析仪，在225nm处测定峰面积，外标法测定水杨酸含量。2.仪器设备及实验条件：（1）仪器设备：高效液相色谱仪(在线真空脱气机、四元梯度泵、DAD检测器、化学工作站）（2）色谱条件：色谱柱：KromasilC18柱(4.6mm×250mm,5μm)；流动相：乙腈-1%醋酸水溶液(25∶75)；检测波长：225nm；流速：1.0mL·min-1；柱温为：室温。3.试样制备：（1）对照品溶液的配制：精密称定干燥的水杨酸对照品10.6mg,100mL量瓶甲醇定容，摇匀，即得；（2）供试品溶液的制备：精密称取板蓝根提取物0.25g，置100mL量瓶中，加甲醇溶液并稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液1mL，置100mL量瓶中，甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。4.分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，按外标法以峰面积计算含量。薄荷10:1TLC检测：1.取本品粉末5g，以85%乙醇溶解并加至刻度，精密吸取10ml置20ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，备用。2.另取薄荷对照药材5g，同法制成对照药材溶液。3.照薄层色谱法（TLC）试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯一甲醇一浓氨试液(9：1：0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。简单来说，比例提取物与标准提取物检测的根本不同在于，标准提取物是按照某一标准进行提取而得，因此它的分析为定量分析，即试验中通过HPLC法测定板蓝根提取物产品中水杨酸成分的含量。而比例提取物产品的成分、含量不可测，是为定性分析，即实验中通过TLC法确定产品薄荷10:1确是薄荷。(西安源森生物科技有限公司实验室提供)