肺癌肿瘤标志物的合理选择应用.

肺癌肿瘤标志物的合理选择应用及最新进展同济大学附属肺科医院核医学科王火强一、概述肿瘤标志物（TumorMarkers）目前常用肿瘤标志物的检测方法放射免疫、非放射性体外分析技术肿瘤标志物检测的临床应用疗效评估、预后判断、复发和转移检测、诊断肿瘤肺癌患者检测肿瘤标志物的临床价值肿瘤标志物测定的局限性放免分析技术原理：Ag+AbAgAb+Ag竞争结合+*Ag*AgAb+*Ag*Ag和Ab量恒定++++6—8X100=75%X100=50%X100=25%X100=12.5%8—4—828—1Ag量越大，*AgAb量越少Ag量越小，*AgAb量越大*AgAb复合物的量取决于Ag的量测量*AgAb量或测量多余*Ag量可推算出Ag量02481632641288070605040302010结合%浓度放免分析的优点灵敏度高特异性强精确度高用血量少体外测量非放射性体外分析技术酶免疫分析发光免疫分析化学发光免疫分析酶放大化学发光免疫分析电化学放光免疫分析荧光免疫分析时间分辨荧光免疫分析或解离增强镧系荧光免疫分析BCPDA强荧光螯合物的时间分辨荧光免疫分析酶促放荧光免疫分析微粒子酶荧光免疫分析荧光偏振免疫分析金属离子免疫分析二、常用的肿瘤标志物及其临床应用1.甲胎蛋白（AFP）属糖蛋白，由胎儿肝实质细胞和卵黄囊细胞合成，胎龄6周时出现，8－10周时可检测到，l2周达到高峰，随后逐渐下降，新生儿出生后l周迅速下降。AFP也是肝癌细胞的代谢产物二、常用的肿瘤标志物及其临床应用1.甲胎蛋白（AFP）正常参考值＜20μg/L临床意义a.诊断原发性肝癌有很高的敏感性和特异性，AFP大于200μg/L应考虑为原发性肝癌，阳性率80％左右。b.恶性畸胎瘤、睾丸癌、卵巢内胚窦癌、胃癌尤其有肝转移者AFP可增高。二、常用的肿瘤标志物及其临床应用1.甲胎蛋白（AFP）临床意义c.各型肝炎、肝硬化、胆囊良性疾病AFP虽可增高，但多数小于200μg/L。d.妊娠8－10周AFP开始增高，若不增高提示有葡萄胎或绒癌，高于正常孕妇水平为死胎，明显增高为先大性畸胎瘤。二、常用的肿瘤标志物及其临床应用2.癌胚抗原（CEA）是一种酸性糖蛋白，存在于3－6个月的正常胎儿消化道内皮细胞中，在胚胎后期和胎儿出生后逐渐消失。它是癌细胞膜上的一种结构蛋白二、常用的肿瘤标志物及其临床应用2.癌胚抗原（CEA）正常参考值15μg/mL临床意义a.CEA为广谱肿瘤标志物，主要用于内胚层恶性肿瘤如肝癌、胆囊癌、胰腺癌、结直肠癌、胃癌的诊断，非内胚层恶性肿瘤中肺癌和乳腺癌阳性率亦较高。CEA检测的临床意义b.其他恶性肿瘤，如脑。泌尿系。卵巢、子宫颈、前列腺恶性肿瘤以及白血病、恶性淋巴瘤、肉瘤和多发性骨髓瘤CEA亦可增高。c.测定胸、腹水和胃液中的CEA用干鉴别良恶性疾病其敏感性和特异性均高于血清。d.肝硬化、慢性溃疡性结肠炎、胰腺炎、胆囊炎、直肠息肉、良性肺疾病以及良性肿瘤，CEA均可呈低水平增高；正常人严重吸烟者CEA亦可增高二、常用的肿瘤标志物及其临床应用3.铁蛋白（FERRIN）分子外壳为蛋白质。内部空腔容纳铁；铁蛋白是铁的储存形式，广泛存于肝、脾和骨髓中，肿瘤细胞能合成和分泌铁蛋白二、常用的肿瘤标志物及其临床应用3.铁蛋白正常参考值女：16－132μg/L；男：22－240μg/L临床意义a.肝癌、肺癌、白血病、恶性淋巴瘤、霍奇金病等铁蛋白升高。b.各型肝炎、肝硬化、各种炎症和铁负荷增加时铁蛋白增高，因此对肿瘤诊断的特异性较差，主要用于疗效监测二、常用的肿瘤标志物及其临床应用4.糖类抗原19－9(CA19-9)结肠癌细胞株克隆化后得到一系列单克隆抗体，编号为116NS19－9单克隆抗体所识别的抗原称为CA19一9，已证实为一种糖蛋白正常参考值＜37μ/mL临床意义a.主要用于胰腺、肝胆、结直肠和胃癌等消化系统恶性肿瘤的诊断，尤其是胰腺、胆道癌阳性率均在70％以上。4.糖类抗原19－9(CA19-9)临床意义b.肺、乳腺和食管癌CA19－9亦有增高c.肝硬化、胆囊炎、胰腺炎等良性疾病CA19-9可轻度增高二、常用的肿瘤标志物及其临床应用5.血清β2－微球蛋白（β2－m）经肾小球滤过后、99．9％由近曲肾小管重吸收。恶性肿瘤细胞能合成和分泌β2－M正常参考值1.1-3.1mg/L(正常值与年龄密切相关）临床意义肝、胃、胰、胆囊、肠、肺、乳腺等癌症时β2－M可增高，但特异性较差；肾小球功能损害，各种肝病β2－M亦可增高二、常用的肿瘤标志物及其临床应用6.糖类抗原50(CA50)从结、直肠癌C010－205细胞株克隆化得到的一株单克隆抗体所识别的抗原称为CA50，属高分子糖蛋白正常参考值＜20u／ml临床意义a.CA50为广谱肿瘤标志物，比CA19－9识别谱更广，主要用于诊断胰腺、胆道、结直肠、肝和胃癌，对乳腺、肺、卵巢、子宫颈癌的诊断亦有一定价值CA50测定临床意义b.原发性肝癌AFP阴性的病人80％CA50增高。c.对胸、腹水的良恶性鉴别诊断有较高的价值，几乎无假阳性。d.肝硬化、胰腺炎、胆囊炎等良性疾病CA50可增高。二、常用的肿瘤标志物及其临床应用7.糖类杭原242(CA242)以CO1O—205结、直肠癌细胞株得到的另一株单克隆抗体C—242所识别的抗原称为CA242。正常参考值＜17u/ml临床意义CA242有CA5O相似的肿瘤识别谱，诊断恶性肿瘤总的阳性率高于CA50，两者联检有互补作用，良性病的假阳性率明显低于CA5O二、常用的肿瘤标志物及其临床应用8.糖类抗原15—3(CA153)为乳腺癌细胞单克隆抗体115D8和DF3识别的糖类抗原正常参考值＜25u/ml临床意义a.主要用于乳腺癌的诊断。由于早期乳腺癌阳性率不高，不宜作为乳腺癌筛选指标，主要用于乳腺癌的疗效和预后监测。b.诊断乳腺癌有很高的特异性，仅3％良性乳腺病CA15-3呈低水平增高。c.卵巢癌、肺癌和消化道恶性肿瘤CA15－3亦可增高。二、常用的肿瘤标志物及其临床应用9.糖类抗原27－29(CA27-29)为乳腺癌单克隆抗体所识别的另一个糖类抗原正常参考值＜24.4u/ml临床意义主要用于乳腺癌的疗效和预后监测，敏感性和特异性基本与CA15－3相似，两者相互间有一定互补作用。对消化道肿瘤诊断阳性率稍高于CA15－3二、常用的肿瘤标志物及其临床应用10.糖类抗原125(CA125)卵巢癌细胞OVCA433克隆化后获得的一株单克隆抗体命名为OC125，所识别的抗原为CA125正常参考值＜35u/ml临床意义a.主要用于诊断妇科恶性肿瘤，如卵巢癌、子宫内膜痛、输卵管癌，阳性率高达80％以上。CA125的临床应用b.对肺癌、胰腺癌结肠癌和乳腺癌等非妇科恶性肿瘤的诊断也有较高的价值.c.肝硬化、胰腺炎、胆囊炎、肾炎、腹膜炎、心包炎、子宫内膜异位、子宫肌瘤和卵巢囊肿等良性疾病CA125亦可增高二、常用的肿瘤标志物及其临床应用11.糖类抗原72—4(CA72-4)为单克隆抗体B72－3和CC49所识别的糖类抗原，属粘蛋白类癌胚抗原正常参考值＜6u／ml临床意义a.主要用于诊断胃癌，早期胃癌阳性检出率不高，不宜作为胃癌筛选指标。b.对其他消化系统恶性肿瘤如结直肠癌、胰腺癌、肝癌、食管癌等的诊断有一定价值。c.良性胃病CA72-4几乎不增高，特异性极高二、常用的肿瘤标志物及其临床应用12.CYFRA21-1是细胞角蛋白19片段，是一种酸性多肽，主要分布于单层上皮细胞中，如肺泡、肠、胰管、胆囊、子宫内膜及输卵管上皮细胞中，上述细胞癌变时可释放CYFRA21-1正常参考值＜3.3μg/L临床意义a.主要用于诊断非小细胞肺癌，尤其鳞癌阳性率最高，与NSE、CEA联合检测可明显提高肺癌检出率b.诊断其他鳞癌如肛管癌、食管癌、子宫颈癌以及非鳞癌中的胰腺、胆道癌亦有较高的价值c.小细胞肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌等CYFRA21-1可增高，但阳性率较低d.与CEA联合鉴别胸、腹水良恶性有极高的价值e.少数肝硬化、肺良性疾病CYFRA21-1可增高二、常用的肿瘤标志物及其临床应用12.神经元特异性烯醇酶(NSE)是α－磷酸－D－甘油酸水解酶的同工酶,分布于神经内分泌腺体细胞中正常参考值＜24μg/L临床意义a.主要用于诊断小细胞肺癌和神经母细胞瘤，是肺癌三项联检指标之一b.少数非小细胞肺癌NSE亦可增高二、常用的肿瘤标志物及其临床应用13.鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)是从子宫颈癌肝转移病灶中提取到的TA－4亚成分鳞状上皮癌抗原正常参考值2.5μg/L临床意义a.主要用于诊断鳞状上皮细胞癌，如肺鳞癌、子宫颈癌、食管癌和肛管鳞癌等，早期子宫颈癌有较高的阳性率。b.少数非鳞癌肺癌SCC亦可增高。c.SCC有很高的特异性，良性肺病和良性妇科疾病SCC很少增高二、常用的肿瘤标志物及其临床应用14.前列腺特异性抗原(PSA)属糖基化的单链肽，由前列腺腺管上皮细胞产生，前列腺癌细胞具有合成PSA特性正常参考值＜4μg/L临床意义a.是诊断前列腺癌的特异标志物，敏感性高达80％左右b.约20％前列腺增生病人PSA可增高二、常用的肿瘤标志物及其临床应用15.甲状腺球蛋白（Tg）是由甲状腺滤泡细胞产生的大分子糖蛋白，正常时血中浓度很低。甲状腺癌病人血清测定值增高正常参考值＜20μg/L临床意义a.主要用于甲状腺乳头状癌、滤泡状癌、未分化癌的复发和疗效及预后监测。b.甲状腺髓样癌、退行细胞癌Tg一般不增高。c.亚急性甲状腺炎、慢性淋巴细胞性甲状腺炎、甲状腺腺瘤尤其是伴有二性变者、甲亢等良性甲状腺疾病，Tg均可能增高，因此不能作为甲状腺结节的良恶性鉴别诊断指标。三、基因诊断（核酸检验）临床应用1985年，聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术问世；此法检出与恶性肿瘤发生有关的癌基因激活，抗癌基因灭活等因素，以及有关癌基因产物的存在，已被应用于肿瘤临床免疫-ＰＣＲ测定1992年免疫测定技术与PCR结合理论上可检测一个至数个抗原分子灵敏度达到了新高度三、基因诊断（核酸检验）临床应用PCR-杂交酶联技术将PCR与杂交、酶联技术结合，反应在微孔板上进行已有乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、结核分枝杆菌和沙眼衣原体等病原微生物PCR－酶联国产试剂用于临床荧光定量-PCR(FQ-PCR)在普通的PCR系统中加入一个与靶片段序列互补的双荧光探针，以荧光强度报告结果，1995年发明也有多种试剂用于临床三、基因诊断（核酸检验）临床应用生物芯片(biochip)技术近年迅速发展，主要通过微加工技术和微电子技术在固体芯片表面构建的微型生物化学系统，实现对细胞、蛋白质、DNA及其他生物组片的准确、快速、大量信息的检测有基因芯片、蛋白质芯片和芯片实验室三大类特点为高检测量、微型化和自动化四、肺癌肿瘤标志物选择常用三大联检指标CEA、CYFRA21-1、NSE新三联指标CA153、CYFRA21-1、NSE其他优先考虑指标SCC、CA242等胸水检测比血清更灵敏、准确