当前位置:首页 > 办公文档 > 总结/报告 > 脐血干细胞移植修复失代偿期肝硬化
中国组织工程研究第20卷第14期2016–04–01出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchApril1,2016Vol.20,No.14P.O.Box10002,Shenyang110180·研究原著·郭宪立,男,1959年生,汉族,河北省大名县人,硕士,副主任医师。中图分类号:R394.2文献标识码:B文章编号:2095-4344(2016)14-02080-06稿件接受:2016-03-18,刘跃1,周丽敏1,胡玥2(1河北医科大学第二医院急诊科,河北省石家庄市050000;2河北大学附属医院急诊科,河北省保定市071000)引用本文:郭宪立,刘跃,周丽敏,胡玥.脐血干细胞移植修复失代偿期肝硬化[J].中国组织工程研究,2016,20(14):2080-2085.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.14.015ORCID:0000-0002-3740-4637(郭宪立)文章快速阅读:文题释义:脐血干细胞:脐血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液,通常是废弃不用的。近十几年的研究发现,脐血中含有可重建人体造血和免疫系统的造血干细胞,可用于造血干细胞移植,治疗多种疾病。因此,脐血已成为造血干细胞的重要来源,特别是无血缘关系造血干细胞的来源。四氯化碳花生油诱导大鼠失代偿期肝硬化:四氯化碳(CCl4)是使用最早、最广泛的肝纤维化诱导剂,CCl4作用于肝线粒体,经过代谢生成毒代谢物,破坏生物膜结构,造成肝脂肪变性与坏死,符合肝损伤发展成肝硬化的过程。动物实验研究显示,联合应用CCl4和乙醇可明显缩短诱导大鼠肝硬化模型的时间。摘要背景:国内外研究证实,脐血干细胞可在体内大量扩增、诱导分化成完备的肝细胞,并表现出一定的肝功能。目的:观察脐血干细胞移植治疗大鼠失代偿期肝硬化的效果。方法:取20只SD大鼠,以40%四氯化碳花生油诱导大鼠失代偿期肝硬化模型,造模后第8周随机分为对照组与实验组,每组10只,实验组于尾静脉注射1.0×107L-1的人脐血干细胞悬浮液2mL,对照组于尾静脉注射细胞培养液2mL。移植4周后,检测大鼠血清学天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、白蛋白、总胆红素、透明质酸、层粘连蛋白、前胶原蛋白Ⅲ及胶原蛋白Ⅳ水平,肝脏组织病理切片结果。结果与结论:①血清学检测结果:与对照组比较,实验组白蛋白水平增高(P0.05),天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、总胆红素、透明质酸、层粘连蛋白、前胶原蛋白Ⅲ及胶原蛋白Ⅳ水平降低(P0.05)。②肝脏病理组织学观察结果:两组肝脏组织均有不同程度的肝硬化,实验组肝硬化程度低于对照组。③结果表明,脐血干细胞移植可有效改善失代偿期肝硬化大鼠的肝组织生理功能。关键词:干细胞;移植;肝硬化;肝纤维;干细胞移植;人脐血;脐血干细胞;大鼠;失代偿期肝硬化;白蛋白;总胆红素;转氨酶主题词:干细胞;脐血干细胞移植;肝硬化;组织工程脐血干细胞移植分化心肌细胞平滑肌细胞血小板白血球红血球骨细胞淋巴细胞骨髓细胞造血干细胞脐血间质干细胞郭宪立,等.脐血干细胞移植修复失代偿期肝硬化ISSN2095-4344CN21-1581/RCODEN:ZLKHAH2081基金资助:河北省医学科学研究重点课题(20120517)UmbilicalcordbloodstemcelltransplantationfortreatmentofdecompensatedcirrhosisGuoXian-li1,LiuYue1,ZhouLi-min1,HuYu2(1DepartmentofEmergency,SecondAffiliatedHospitalofHebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050000,HebeiProvince,China;2DepartmentofEmergency,AffiliatedHospitalofHebeiUniversity,Baoding071000,HebeiProvince,China)AbstractBACKGROUND:Umbilicalcordbloodstemcellscanbedifferentiatedintofunctionallivercellsinvivo,insteadofmaturelivercellsinthetreatmentofliverdiseases.OBJECTIVE:Toobservetheeffectofumbilicalcordbloodstemcelltransplantationondecompensatedcirrhosisinrats.METHODS:TwentySprague-Dawleyratswereenrolledandgiven40%carbontetrachloridepeanutoiltomakedecompensatedcirrhosismodels.Eightweeksaftermodeling,modelratswererandomizedintocontrolandexperimentalgroups(n=10pergroup),andsubjectedtoinjectionofumbilicalcordbloodstemcellsuspension(2mL,1.0×107/L)orcellculturemedium(2mL)viathetailvein,respectively.At4weeksafterinjection,levelsofserumaspartateaminotransferase,alanineaminotransferase,albumin,totalbilirubin,hyaluronicacid,laminin,procollagenIIIandtypeIVcollagenweredetected;ratlivertissueswereslicedforpathologicalobservation.RESULTSANDCONCLUSION:Comparedwiththecontrolgroup,thealbuminlevelwassignificantlyincreasedbutthelevelsofserumaspartateaminotransferase,alanineaminotransferase,totalbilirubin,hyaluronicacid,laminin,procollagenIIIandtypeIVcollagendecreasedsignificantlyintheexperimentalgroup(P0.05).Fromthepathologicalview,severityoflivercirrhosiswaslowerintheexperimentalgroupthanthecontrolgroup.Therefore,umbilicalcordbloodstemcelltransplantationcaneffectivelyrestoretheliverfunctionofdecompensatedcirrhosisinrats.Subjectheadings:StemCells;CordBloodStemCellTransplantation;LiverCirrhosis;TissueEngineeringFunding:theMedicalScienceResearchProjectofHebeiProvince,No.20120517Citethisarticle:GuoXL,LiuY,ZhouLM,HuY.Umbilicalcordbloodstemcelltransplantationfortreatmentofdecompensatedcirrhosis.ZhongguoZuzhiGongchengYanjiu.2016;20(14):2080-2085.0引言Introduction国内外研究证实,脐血干细胞可在体内大量扩增、诱导分化成完备的肝细胞,并表现出一定的肝功能,可替代成熟肝细胞治疗肝病,为肝功能衰竭患者治疗提供了新的思路[1-7]。脐血中包含有丰富的造血干细胞,在临床应用和基础研究方面,脐血干细胞移植在多种疾病方面取得阶段性进展,如心血管疾病[8-10]、血液系统疾病[11-13]、代谢性疾病等方面[14]。肝硬化是临床上危害人类健康的一类严重慢性肝脏疾病,而失代偿期肝硬化是肝硬化在临床上的最难治疗阶段,临床治疗主要给予输蛋白、放腹水等治疗。虽然肝脏移植是肝硬化最理想最有效的治疗方法,但由于肝脏来源有限、手术复杂且移植后存在免疫排斥反应、移植费高昂等,使绝大部分患者都没有条件治疗[15]。因而临床医生及患者迫切需要安全、有效、经济的治疗方案。目前,干细胞移植是临床治疗肝硬化的一个新的研究方向。脐血干细胞移植治疗肝硬化有一定的效果,为临床治疗肝硬化提供了一种新途径[16-19]。国内外动物体内实验发现,脐血干细胞移植可在体内分化为有功能的肝细胞样细胞,增强损伤肝的修复,同时减轻肝组织结构损伤[20-23]。实验将人脐血干细胞经尾静脉移植于SD大鼠失代偿期肝硬化模型,观察脐血干细胞治疗失代偿期肝硬化的效果,为临床研究或治疗提供数据参考。1材料和方法Materialsandmethods1.1设计随机分组对照动物实验。1.2时间及地点实验于2014年2至7月在河北医科大学第二医院实验室完成。1.3材料脐血来源:封闭式采血法采集河北医科大学第二医院妇产科健康、正常足月分娩胎儿的脐血,由河北医科大学第二医院产科协助完成,均已征得产妇及家属授权郭宪立,等.脐血干细胞移植修复失代偿期肝硬化P.O.Box10002,Shenyang110180同意和医院伦理委员会批准。实验动物:健康SPF级10周龄雄性SD大鼠30只,体质量(200±30)g,由河北省实验动物中心提供,于温度(25±2)℃、湿度(50±5)%适应饲养1周。1.4实验方法失代偿期肝硬化大鼠模型制备:将30只SD大鼠随机分为2组,正常对照组(n=5)和模型组(n=25)。模型组大鼠按3mL/kg腹腔皮下注射40%四氯化碳花生油,每周2次(周二、周六),持续注射8周,同时以含体积分数15%乙醇的水为饮用水,用普通大鼠饲料喂养;正常对照组给予普通饲料和普通饮用水,与模型组大鼠同环境下喂养。记录所有大鼠的一般情况、死亡率、饮食变化等。于第8周随机取正常对照组及模型组大鼠各5只,麻醉后,观察大鼠肝脏变化及肝脏病理学检查,了解大鼠造模情况。实验分组及干预:将20只失代偿期肝硬化大鼠随机分为2组,对照组和实验组,10只/组。实验组大鼠从尾静脉移植含有数量约1.0×107L-1的脐血干细胞悬浮液2mL,对照组则经大鼠尾静脉注射2mL细胞培养液。脐血干细胞的分离:取30mL脐血,置于50mLEP离心管(带盖)中,再精密加入HES10mL,振摇混匀,静置1h;取上层液体20mL,置于50mLEP离心管中,加入20mL磷酸盐缓冲液,振摇混匀,以2000r/min低温离心20min;弃去上清液,再加入溶血素50mL,用玻璃吸管慢慢吹打均匀,培养箱(37℃、体积分数5%CO2)中培养5min;取出,以2000r/min低温离心5min,弃
本文标题:脐血干细胞移植修复失代偿期肝硬化
链接地址:https://www.777doc.com/doc-2049851 .html