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1专题三：细胞工程重要的结论性语句：1、动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础。2、动物细胞培养时先用胰蛋白酶等处理一段时间，使组织分散成单个细胞。3、原代培养是指从供体获取组织或细胞后的初次培养，在这一阶段中，培养的细胞最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适合用于药物测试、基因表达等实验研究。4、将原代培养的细胞分离稀释后转入新的培养瓶中继续培养，称为传代培养。一般情况下，传代培养10－50次后，细胞增殖会明显减缓，甚至完全停止。5、动物细胞培养需要严格的环境条件，包括无菌无毒、温度、pH、气体和营养物质（如葡萄糖、无机盐、氨基酸、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素和生长因子等）。在使用合成培养基时还需加入动物血清等天然成分。6、诱导动物细胞融合的方法有物理法（如电激法）、化学法（如聚乙二醇法）和生物法（如仙台病毒法）。7、细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。8、动物细胞融合技术的最重要的用途之一是制备单克隆抗体。9、杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生专一性抗体。10、单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强、灵敏度高，并能大量制备。重、难点知识归类、整理1、植物组织培养和动物细胞培养的比较项目主要原理培养基结果培养目的植物组织培养细胞全能性固体：营养物质、激素培育成植株快速繁殖培育无病毒植株动物细胞培养细胞增殖液体：营养物质、动物血清培育成细胞株或细胞系获得细胞或细胞产品等2、植物体细胞杂交和动物细胞融合项目原理融合方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性去细胞壁后诱导原生质体融合离心、振动、电刺激、聚乙二醇诱导获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合（同上）再加上灭活的病毒诱导制备单克隆抗体3、受精作用、原生质体融合、动物细胞融合受精作用原生质体融合动物细跑融合不同点细胞类型不同精子与卵细胞体细胞体细胞细胞来源不同来自同一生物个体一般来自不同种的生物个体一般来自不同种的生物个体2染色体数目变化不同2N2N+2N不一定是2N×22N+2N不一定是2N×2融合条件不同不需人工诱导需人工诱导需人工诱导同都有两个细胞融合成一个细胞，并且融合成这个细胞的遗传物质都是由原来的两个细胞决定的四、例题解析：例1：动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段基本相同C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞例2：下列有关动物细胞培养的叙述，不正确的是A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞就会衰老死亡课堂练习一、单选题：1．为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液，选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.盐酸D.胰脂肪酶2．在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到A.细胞培养技术B.细胞核移植C.胚胎移植技术D.基因工程技术3．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是A.经过免疫的B淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞4．动物细胞融合的目的中最重要的是A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞5．能使动物细胞融合的特有的诱导因子是A.离心B.灭活的病毒C.电刺激D.振动6．一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能（）A．有选择地繁殖某一性别的家畜B．繁殖家畜中的优秀个体C．用于保存物种D．改变动物的基因型7．单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是（）①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．①②③④B．①③⑤C．②④D．①③8．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性3C．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂9．在下列自然现象或科学研究成果中，能为“动物细胞具有全能性”观点提供直接证据的是A．壁虎断尾后重新长出尾部B．蜜蜂的未受精卵细胞发育成雄蜂C．用体外培养的皮肤治疗烧伤病人D．小鼠腺细胞的自我复制10．利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B．体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C．将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者11．下列哪一项属于克隆A．将鸡的某个DNA分子片段整合到小鼠的DNA分子上B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D．将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系二、多选题：12．下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是（）A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B．融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体C．体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖D．单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显13．（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是（）A.效应B细胞B．T淋巴细胞C.骨髓瘤细胞D．杂交瘤细胞三、非选题：14．右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用_____________处理，除去了；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是。融合完成的标志是。（2）若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用技术把D培养成植株。（3）若A、B是动物细胞，一般取自，然后用使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是，所形成的D称为，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有。（4）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了________________________________________，图中B为。（5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有种（只考虑两两融合），用来培养的D细胞应该是。从中选择出它的方法是培养，获得D后，常用的培养方法是培养液中培养和。415.两场筹备了10年的“太空结合”首次在神舟八号飞船上举行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,新人在“产房”——电融合仪内孕育新生命。160min后,中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。“太空娃娃”诞生和地面实验如图所示。请回答下列问题：(1)小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能融合在一起,体现了细胞膜具有__________的特点。(2)若用于SARS的预防上,则宜采用_______细胞。科学工作者正在研究治疗癌症使用的生物导弹是_____。(3)B淋巴细胞和T淋巴细胞都是由________________细胞形成的。这种相同细胞的后代,在形态、结构和生理功能上产生稳定差异的过程,叫做_____。(4)鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过_______________（有丝/减数）分裂方式大量繁殖。细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何特点？_____________；要观察融合后的细胞中的染色体形态、数目,可用一定浓度的_______________处理。(5)融合的细胞具有两种细胞的特性,即_______________和___________________。专题三：细胞工程课后练习一、单选题：1．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是A．培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体B．培养中的人B细胞能够无限地增殖C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞2．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误．．的是A．特异性强、灵敏度高B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌3．关于单克隆抗体，下列叙述不．正确的是A．可以制成诊断盒．用于疾病的珍断B．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C．可以利用基因工程技术生产D．可以在生物体内生产，不能体外生产4．下列关于细胞工程的叙述中，错误．．的是A．植物细胞融合必须先制备原生质体B．试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方C．经细胞核移植培育出新个体只具有一个亲本的遗传性状D用于培养的植物器官或属于外植体5．用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误．．的是A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C．用聚乙二醇（PEG）作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体6．人类寄希望于利用干细胞（人体中具有分裂、分化能力的细胞）的分离和体外培养，在体外培5育出组织器官，并最终通过组织或器官移植实现对临床疾病的治疗。能否用肌细胞代替干细胞A．不能，因为肌细胞与干细胞所含有的遗传物质不同B．不能，因为肌细胞是高度分化的细胞，没有分裂能力C．能，因为肌细胞虽然是分化的细胞，但在一定条件下也可脱分化，实现细胞全能性D．能，因为肌细胞与干细胞具有完全相同的遗传物质7．下列属于组织培养但不是克隆的是（）A．将花粉离体培养成单倍体植株B．芽发育成枝条C．根尖分生区发育成成熟区D．上皮细胞无性繁殖产生的细胞群8．动物细胞培养液和植物组织培养液的共有成分是（）A．葡萄糖B．蔗糖C．动物血清D．维生素9．动物细胞培养的细胞来自于（）A．任何个体的细胞B．只能取自动物胚胎细胞C．只能取自幼龄动物的组织细胞D．胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞10．动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（）A.动物细胞培养B．动物细胞融合C．单克隆杭体D．胚胎、核移植11.“生物导弹”是指（）A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单抗上连接抗癌药物12．.如用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（）A、乳腺细胞的B、卵细胞的C、胃腺细胞的D、囊胚时期的胚胎细胞的13．单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基（HAT）中无法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是（）A．骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B．脾细胞之间形成的融合细胞C．骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D．脾细胞14．研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）A．利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞B．以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C．抗癌物质在克隆细胞中大量合成D．单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合15．用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（）A.容易产生各种变异B．具有更强的全能性C.取材十分方便D．分裂增殖的能力强16．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同