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试题一玻璃器皿包扎实验要求：能熟练、规范包扎试管、三角瓶、培养皿、移液管。实验用品：1、带塞试管；2、三角瓶；3、培养皿；4、移液管；5、报纸；6、棉花；7、棉绳等步骤操作要求评分标准满分得分备注1包扎试管（7支）结实、不松动1分，活结1分22包培养皿（8套）结实、不松动1分，平整1分23包三角瓶1只棉塞1分，活结1分24移液管1支加棉花1分，卷紧、打结1分2口答题回答要点2口答题：玻璃器皿可以采用哪些灭菌方法？干热灭菌（高温）时间长温度高。高压蒸汽灭菌：1、温热所需凝固温度降低。2、温热穿透力强3、湿热的蒸汽有潜热存在。试题二细菌的简单染色实验要求：正确制片；染色观察正确。实验用品：1、生物显微镜；2、载玻片；3、酒精灯；4、染液5、香柏油；6、洗液；7、胶头滴管；8、接种环；10、斜面菌种等。步骤操作要求评分标准满分得分备注1制片涂片1分、固定1分，无菌操作1分32染色23结果正确性染色结果观察3口答题1回答要点2口答题：1、涂片厚薄对结果有何影响？涂片太厚会造成菌体堆积而难以看清细胞个体形态，太薄会难以在显微镜下找到细菌。试题三酵母美蓝染色及死活细胞鉴别实验要求：无菌操作正确；正确制片；正确鉴别死活细胞。实验用品：1、酵母菌斜面；2、载玻片；3、盖玻片；4、美蓝染液；5、酒精灯；6、接种环；7、生物显微镜等。步骤操作要求评分标准满分得分备注1制片水浸片1分，无菌操作1分22染色时间正确33鉴别鉴别准确3口答题1回答要点2口答题：1美蓝染色为何能鉴别酵母细胞死活？活：还原力强，染后无色。死：还原力弱，染后成蓝色试题四霉菌乳酸石炭酸棉兰染色实验要求：正确进行霉菌染色。实验用品：1、霉菌培养物；2、载玻片；3、盖玻片；4、乳酸石炭酸棉兰染液；5、解剖针等。步骤操作要求评分标准满分得分备注1制片染液适量1分，挑取菌丝适量，洗孢子1分22加盖玻片23观察菌丝2分，孢子头2分4口答题1回答要点2口答题：1、霉菌菌丝分哪2种？基内菌丝和气生菌丝试题五微生物大小测定实验要求：能够用镜台测微尺校正目镜测微尺；测定微生物大小。实验用品：1、生物显微镜；2、镜台测微尺；3、标本片；4、香柏油；5、洗液；6、擦镜纸。步骤操作要求评分标准满分得分备注1目镜校正低倍镜1分、高倍镜1分、油镜1分32换算长度低倍镜1分10、高倍镜1分2.5、油镜1分133测大小高倍镜或油镜下测大小2口答题1回答要点2口答题：1、镜台测微尺每格多大？10微米2、球菌直径、杆菌长度和宽度、螺菌两端长和宽大小如何表示？目镜测微尺每格长度（um）=两重合线间镜台测微尺格数*10/两重合线间目镜测微尺格数试题六微生物分离、纯化技术实验要求：熟练掌握无菌操作技术；斜面划线转接；平板划线分离。实验用品：1、酒精灯；2、接种环；3、斜面菌种；4、试管斜面；5、溶化的培养基；6、记号笔。步骤操作要求评分标准满分得分备注1无菌操作接种环灭菌1分，降温1分22斜面划线取试管塞1分，Z形划线1分23倒平板倒量合适14平板划线三区划线1分，划线力度1分，接种环的灭菌1分3口答题1回答要点2口答题：1、灼烧接种环的目的？2、接种环温度高会有何结果？四、微生物的五大共性个体小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应性强，易变异；分布广，种类多。最重要的共性为：个体小，面积大，这样大的比表面积特别有利于它们和周围环境进行物质、能量、信息的交换。微生物的其它很多属性都和这一特点密切相关。原核生物（prokaryotes）指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌（eubacteria）和古生菌（archaea）两大类。广义的细菌。原核生物包括细菌、放线菌、立克次氏体，支原体、衣原体及蓝细菌。1、细菌（bacteria）指真细菌。一类细胞细短（φ约0.5μm，长度约0.5～5μm）、结构简单、细胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。细胞壁的功能:固定细胞外形；协助鞭毛运动；保护细胞免受外力的损伤；为正常细胞分裂所必需；阻拦有害物质进入细胞；与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性密切相关肽聚糖可被溶菌酶破坏；青霉素也可干扰短肽之间肽键的形成从而破坏细胞壁肽聚糖的合成。外膜的功能Ⅰ、控制细胞的透性、吸附Mg2+、Ca2+等并提高这些离子在细胞表面的浓度；；Ⅱ、由于LPS结构的变化，决定细胞壁抗原多样性（沙门氏菌属表面抗原类型2107个），可用于传染病的诊断和病原的地理定位；Ⅲ、是G-病原菌致病物质——内毒素的物质基础，类脂A是内毒素的毒性中心；Ⅳ、是许多噬菌体在细胞表面的吸附受体。细胞膜的功能:选择性地控制细胞内、外的物质的运送、交换；维持细胞内正常渗透压的结构屏障合成细胞壁各种组分和荚膜等大分子的场所许多酶和电子传递链组分的所在部位，进行氧化磷酸化或光合磷酸化的产能基地鞭毛着生点和提供其运动所需的能量等（1）糖被（glycocalyx）包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。荚膜细菌群体特征菌落：光滑型菌落，表面湿润、光泽、粘液状。糖被的功能保护作用：保护细菌免受干旱损坏，防止噬菌体的吸附和裂解，使致病菌免受突破主白细胞吞噬，贮藏养料，作为透性屏障或离子交换系介质，附着作用，细菌间的信息识别作用，堆积代谢废物产鞭毛细菌种类螺旋菌和弧菌普遍生有鞭毛，除运动球菌属外，球菌一般无鞭毛芽孢(endospore，spore)：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。渗透调节皮层膨胀学说——芽孢耐热机制（一）芽孢衣（疏水性角蛋白）对多价阳离子和水分的透性很差；皮层的离子强度很高，会产生极高的渗透压去夺取芽孢核心中的水分，而造成芽孢皮层的膨胀和核心的高度失水；核心部分的生命物质（DNA、RNA、Pr等）处于高度失水状态，各种酶活性降低，因而产生极强的耐热性。研究芽孢的理论与实践意：细菌分类、鉴定中的重要形态学指标；指导菌种保藏；制定灭菌参数；提高菌种筛选率伴孢晶体（parasporalcrystalδ内毒素）少数芽孢杆菌（如苏云金芽孢杆菌）在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体。裂殖（fission）指一个细胞通过分裂而形成两个子细胞的过程。一般细菌进行横分裂，而杆菌进行横分裂和纵分裂。芽殖（buddingbacteria）在母细胞表面（尤其是一端）先形成一个小突起，待其长大到与母细胞相仿后在相互分离独立生活的一种繁殖方式。菌落（colony）：形成以母细胞为中心的一小堆肉眼可见的、有一定形态构造等特征的子细胞集团，称为菌落。放线菌的菌落特征菌落表面干燥、不透明、呈紧密的绒状或坚实、多皱、上有一薄层彩色“干粉”。菌落周围具放射状菌丝。菌落质地硬而且致密，菌落小而不广泛延伸。接种针难以挑取，有时可挑碎，有时可将整个菌落挑起。由于菌丝和孢子常具不同色素，使菌落正面、背面呈不同色泽，菌落边缘的琼脂平面有变形现象。从支原体、立克次氏体至衣原体寄生性逐步增强。支原体：是一类无细胞壁，介于独立生活和细胞内寄生的最小型原核生物。立克次氏体（Rickettsia）是一类专性寄生于真核细胞内的G－原核生物。衣原体（Chlamydia）是一类在真核细胞内营专性能量寄生的小型G－原核生物。曾长期被认为是“大型病毒”。假根：低等真菌匍匐菌丝与固体基质接触处分化出来的根状结构具有固着和汲取养料的功能子实体：在其里面或上面可产生无性或有性孢子，有一定形状和构造的任何菌丝体组织营养菌丝：密布在固体营养基质内部主要执行吸取营养物功能的菌丝体气生菌丝：伸展到空间的菌丝体孢子丝：放线菌的气生菌丝进一步成熟，分化成的结构。假菌丝：某些酵母在繁殖过程中芽体不脱落并相连成藕节状的细胞串生命周期：指的是上一代生物个体经过一系列的生长，发育阶段而产生下一代个体的全部过程病毒：病毒是一类个体微小的，没有细胞结构的,专性寄生于活细胞内的微生物，在细胞外具有大分子特征，在活细胞内部具有生命特征。噬菌斑：噬菌体在菌苔上形成的负菌落。温和噬菌体：噬菌体与宿主细胞基因整合，同步复制，长期共存溶源性、溶源菌（宿主）1病毒的特征：（1）形体及其微小，一般都能通过细菌滤器；没有细胞构造，其主要成分仅为核酸和蛋白质；每一种病毒只含一种核酸，不是DNA就是RNA，既无产能酶系也无蛋白质和核酸合成酶系；以核酸和蛋白质等元件的装配实现其大量的繁殖；在离体条件下，能以无生命的生物大分子存在，并可长期保存其侵染活力；对一般抗生素不敏感，但对于干扰素敏感；有些病毒的核酸不能整合到宿主的基因组中，并诱发潜伏性感染。2噬菌体效价：每毫升试样所含的具侵染性的噬菌体的粒子数。方法：1双层平板法：2电镜直接计数法。3分光光度法微生物的六种营养要素：碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。生长因子：生长因子是一类调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳，氮源自行合成的有机物。化能异养微生物：一类通过氧化有机物取得能量并以有机物为碳源的微生物。化能自养微生物：一类通过氧化无机物取得能量并以CO2为唯一或主要碳源的微生物。基本培养基：按大多数微生物的营养需要配制一种培养基，称为基本培养基。选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抑制非需要菌的生长，促进需要菌的生长，这种培养基叫选择培养基。加富培养基：一般指在培养基内加入额外的营养物质，使需要的微生物营养更充分，生长的更快，这种培养基叫加富培养基。鉴别性培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼鉴别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。2、细胞膜运送营养物质的四种方式（1）单纯扩散：又称被动运送，指疏水性双分子层细胞膜，在无载体蛋白的参与下，单词依靠物理扩散方式让许多小分子非电离分子尤其是亲水性分子的被动通过的一种物质运送方式。（2）促进扩散：指运质在运送过程中，必须借助存在于细胞膜上的底物特异载体蛋白底协助但不耗能底一类物质扩散运送方式。（3）基团移位：指一类既需特异载体蛋白的参与，又需耗能的一种物质运送方式。物质在运送前后还会发生分子结构的变化。(4)主动运输发酵：在无氧等外源氢受体的条件下，底物脱氢后所产生的还原力[H]未经呼吸链传递而直接交给某一内源性中间代谢物接受，以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应。硝化作用：氨态氮经硝化细菌的氧化，转变为硝酸态氮的过程。反硝化作用：又称脱氮作用，指硝酸盐转化为气态氮化物的作用。厌氧呼吸：一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物（少数为无机氧化物）的生物氧化方式。10、生物固氮：指大气中的分子氮通过微生物固氮酶的催化而还原成氨的过程。11、次生代谢产物：某些微生物生长到稳定期后，以结构简单、代谢途径明确、产量较大的初生代谢物作前体，通过复杂的次生代谢途径所合成的各种结构复杂的化合物。通常，放线菌最适ph范围为7.5~8.5，酵母菌的最适ph范围为3.8~6.0，霉菌的最适ph范围为4.0~5.8。防腐：利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，即通过制菌作用防止食品，生物制品等发生霉腐的措施。石炭酸系数：指在一定时间内，被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度与达到同效的碳酸的最高稀释度之比。致死温度：在一定时间内，杀死某微生物的水悬浮液群体所需的最低温度。灭菌：采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。消毒：一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体或内部一部分对人体或动植物有害的病原菌，而对被消毒的对象基本无害的措施。抗生素：一类由微生物或其他生命活动过程中合成的次生代谢产物或人工衍生物。抗代谢物：一类在化学结构上与细胞内必要代谢物的结构相似，并可干扰正常代谢活动的化学物质。磺胺类药物作用机理：磺胺是叶酸组成部分－－对氨基苯甲酸的结构类似物。磺胺的抑菌作用是因为很多细菌需要自己合成叶酸而生长。磺胺对人体细胞无毒性，因为人缺乏从对氨基苯甲酸合成叶酸的相关酶----二氢叶酸合成酶，不能用外界提供的对氨基苯甲酸自行合成叶酸，而必须直接利用叶酸为生长因