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茶多酚的含量的测定及初探【摘要】利用酒石酸亚铁比色法测定九种茶叶中茶多酚的含量及茶汤自身的PH值随时间变化而变化的过程,并利用单因素完全随机试验的方差分析方法来解释出现的不同结果.【关键词】茶多酚含量测定酒石酸铁比色法单因素完全随机试验方差分析方法DeterminationofteapolyphenolsandPreliminaryAbstract:TartrateferrouscolorimetricdeterminationofthecontentofninekindsofteapolyphenolsandteaPHvaluechangesovertimeandchange,andtheuseofanalysisofvariancesinglefactorcompletelyrandomizedtrialtoexplainthedifferentresults0引言茶多酚又叫茶单宁、茶鞣质,是茶叶中的主要生理活性物质,是决定茶汤滋味、颜色的主体成分,占茶叶干重的18%-36%,它的药用价值很高,具有抗氧化、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、抑菌、降血糖、降血脂、抗突变、清除自由基等药理作用。茶多酚作为一类新型无毒的天然抗氧化剂,1990年被列为食品添加剂（GB12493-90）,并被广泛使用,是一种极具开发价值的天然产物。目前国内外茶多酚粗品的提取方法主要有：溶剂萃取法、离子沉淀法、树脂吸附分离法、超临界流体萃取法、超声波浸提方法、微波浸提法等。其测定方法主要有滴定法、酒石酸铁比色法、紫外分光光度法等。本文采用沸水提取法,并用酒石酸亚铁作显色剂,分光光度法测定茶多酚的含量。1试验1.1主要仪器UV-2012C型紫外可见分光光度计；DK-S26型电热恒温水浴锅(上海森信实验仪器有限公司)；SHB-III循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；ALC-210.3型电子天平；PH计PB-10；高速万能粉碎机；材料与设备：1.2材料：1.2.1茶叶磨碎试样；1.2.2酒石酸亚铁溶液:称取1gFeSO4·7H2O和5gKNaC2H4O6·4H2O,混合并用蒸馏水溶解后移入1L容量瓶中,稀释至刻度,摇匀即可．1.2.3pH值为7.5的磷酸盐缓冲液:(1)1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液．准确称取23.872gNa2HPO4·12H2O加入蒸馏水溶解,移至1L容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,此溶液称为A液；(2)1/15mol/L的KH2PO4溶液．准确称取经烘箱烘2h后的磷酸二氢钾9.078g,用蒸馏水溶解,移至1L容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,此溶液称为B液；(3)取A液85mL,B液15mL混匀,即为pH值为7.5的缓冲液．水为去离子水．(一)茶汤制备：准确称取磨碎试样3g,家450ml沸水,在沸水浴中浸提45min,每隔10min摇瓶一次,过滤.洗涤滤渣,滤液合并于500ml容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀.(二)测定：准确吸取茶汤1ml,注入25ml容量瓶中,加水4ml,酒石酸铁溶液5ml,用缓冲液定容至刻度,混匀,用10mm比色皿,以试剂空白作参比,于波长540nm处测吸光度,用以下公式计算:茶多酚(%)=E*3.913/1000*(L1(L2*M*m))*1002结果与讨论第一天数据指标品种红1红2红3绿1绿2绿3黑1黑2黑3phabsmg茶多酚含量%5.7905.6805.4306.6706.1805.9906.7206.5407.1300.2470.1260.1280.3800.2700.3480.1270.1270.1003.0013.0073.0043.0003.0123.0103.0063.0103.00216.1038.1988.33724.78217.53822.6208.2668.2556.517第二天数据指标品种红1红2红3绿1绿2绿3黑1黑2黑3phabsmg茶多酚含量%6.0105.5105.7505.8005.6505.6005.9805.8506.0000.2450.1280.1200.3670.2730.3400.1210.1280.1053.0013.0073.0043.0003.0123.0103.0063.0103.00215.9738.3287.81623.93517.73322.1007.8758.3206.843第三天数据指标品种红1红2红3绿1绿2绿3黑1黑2黑3phabsmg茶多酚含量%5.2204.9905.3305.4705.1505.5405.8505.4805.8700.2350.1180.1210.3560.2790.3220.1140.1190.1003.0013.0073.0043.0003.0123.0103.0063.0103.00215.3217.6787.88123.21718.12320.9307.4207.7356.517第四天数据指标品种红1红2红3绿1绿2绿3黑1黑2黑3phabsmg茶多酚含量%5.5905.2705.2805.3705.0605.2605.5605.5405.8600.2300.1180.1160.3390.2500.3010.1060.1190.0973.0013.0073.0043.0003.0123.0103.0063.0103.00214.9957.6787.55522.10816.23919.5656.8997.7356.322第五天数据指标品种红1红2红3绿1绿2绿3黑1黑2黑3phabsmg茶多酚含量%5.7805.3705.4205.9405.1905.8505.7506.0706.0600.2350.1210.1160.3350.2740.3140.1050.1290.0973.0013.0073.0043.0003.0123.0103.0063.0103.00215.3217.8737.55521.84817.79820.4106.8348.3856.322单因素完全随机试验分析因素重复12345和Ti平均值x单因素完全随机等重复试验方差分析表变异来源自由度DFSSMSFFa(8,36)处理间（A）81725.521215.690427.956**Fa0.01(8,36)=5.16试验误差（e）3618.1460.504Fa0.05(8,36)=3.06总变异441743.667由上表可知茶叶品种对茶多酚含量的影响极显著,故需进行多重比较。用q法进行多重比较,相应的LSR值：P23456789q0.052.873.463.824.074.274.434.564.67q0.013.854.414.754.995.185.345.475.58LSR0.050.3380.4080.4510.4800.5040.5230.5380.551LSR0.010.4540.5200.5390.5890.6110.6300.6450.658均值多重比较结果处理Ai均数xi差异显著性（q法）a=0.05a=0.01A423.178aAA621.125bBA517.486cCA115.542dDA88.086eEA27.951eEA37.829efEA1A2A3A4A5A6A7A8A916.10315.97315.32114.99515.32177.71215.5428.1988.3287.6787.6787.87339.7557.9518.3377.8167.8817.5557.55539.1437.82924.78223.93523.21722.10821.848115.89023.17817.53817.73318.12316.23917.79887.43217.48622.62022.10020.93019.56520.410105.62521.1258.2667.8757.4206.8996.83437.2957.4598.2558.3207.7357.7358.38540.4308.0866.5176.8436.5176.3226.32232.5216.504总和1086.563115.161A77.459fFA96.504gG说明：A1--------------------------------大红袍A2--------------------------------祁门红红茶类A3--------------------------------滇红A4--------------------------------碧螺春A5--------------------------------铁观音绿茶类A6--------------------------------汉中绿茶A7--------------------------------特级糯米A8--------------------------------果树大叶黑茶类A9--------------------------------普洱3结论由上述数据可分析得出：1.绿茶类中的茶多酚含量极显著高于红茶类和黑茶类。2.上述三种不同绿茶品种间的茶多酚含量差异极显著。3.普洱茶在这九种茶叶中的茶多酚含量最少。参考文献：[1]孙秋香,肖婷.茶叶中茶多酚的提取、测定及应用[J].湖北第二师范学院院报,2009,26(8):47-57.[2]汪多仁,茶多酚的开发与应用进展[J].饮料工业,2011,14(1):11-14.[3]刘蒙佳,陈锦屏.茶多酚提取方法的研究进展[J].陕西师范大学食品工程系,2006,6(7):70-72.[4]郁军.茶多酚的提取纯化工艺研究进展[J].工艺工程；2010年10期:50-51.[5]黄丽凤,刘友平,黎代余.茶多酚提取物的质量评价[J].食品安全与检测,2010,35(4):262-268.[6]严志慧,方义,张锡友,胡春学,刘黎.茶多酚提取与分离纯化研究进展[J].陕西农业科学,2010(6):86-91.[7]申弈.茶多酚提取与含量测定方法的比较.创新技术,2009(2):4-5.[8]尧渝,江和源,袁新跃.茶多酚的提取制备技术[J].中国茶叶专题综述,2009(2):11-13.[9]李明元,李鑫,白德飞,吕鑫,左霞.茶叶生产废料中茶多酚提取工艺研究[J].西华大学学报,2010,29(2):202-204.[10]斯琴格日乐,恩德.茶叶有效成分茶多酚的提取工艺研究[J].河南理工大学学报,2011,30(5):625-628.[11]何健,印伟.茶叶中茶多酚的提取工艺及其含量测定[J].2011,20(13):31-32.[12]徐卫华.茶叶中提取茶多酚的研究[J].科学技术,2011,137.[13]刘萍.红茶和绿茶中茶多酚提取工艺研究[J].天津农学院学报,2010,17(4):39-43.[14]罗亚楠,于丽颖,刘立群.绿茶中茶多酚的提取及分析检测[J].安徽农业科学,2011,39(26):16429-16430.[15]宋传奎,肖斌,王艳丽,李瑞,宋红霞.超声波辅助提取茶多酚工艺条件的优化[J].西北农林科技大学学报,2011,39(5):133-146.[16]赵卫星,姜红波,王艳,姜娈.天然抗氧化剂—茶多酚提取、分离和纯化方法[J].广东化工,2010,37(8):7-15.[17]车红荣.茶叶茶多酚的乙醇水溶液提取过程、离子沉淀-絮凝纯化新工艺研究[J].西北大学,2001,1-65.