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1一、填空题：（每空0.5分，共10分）1.植物组织培养根据外植体的不同，一般可以分为：植株培养、器官培养、组织培养、1胚胎培养、细胞培养和原生质体培养。2.去除植物病毒时，热处理结合微茎尖培养可明显提高脱毒效果。3.在植物组织培养中，外植体脱分化后，再分化形成完整植株的途径有两条：一是`器官发生途径，二是体细胞胚发生途径。4.生根培养基的特点是低盐、高钙、低糖、有活性炭。5.植物组织培养中最常用的基本培养基为MS培养基。6.细胞培养时，从完整的植物器官中分离单细胞的方法有：机械法和酶解法。7.用秋水仙素处理单倍体植物是人工诱导染色体加倍的传统方法。8.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生____氯气______来杀菌的；升汞是靠__使蛋白质变性____来达到灭菌目的。9.离体材料超低温保存是将试管苗放在-196℃的液氮低温下进行保存，常用的解冻的方法是水浴法。10.指示植物法可以分为汁液涂抹接种法和嫁接接种法。11.Ph值一般用盐酸调低，用氢氧化钠调高。二、选择题:（每小题1分，共20分）1.在组培中用于灭菌的主要仪器设备有（C）。A.电炉、过滤器、煤气灶B.超净工作台、超低温冰箱C.高压灭菌器或过滤器、超净工作台D.微波炉、煤气灶、纯水发生器2.外植体表面灭菌的灭菌剂灭菌效果最好但较难清除的是（D）。A.95%酒精B.70%酒精C.漂白粉饱和溶液D.0.1-1%升汞（氯化汞）3.分装后的培养基应放于（D）条件下进行灭菌。A.150℃,10-15minB.121℃,10-15minC.150℃,15-20minD.121℃,15-20min4.MS培养基配方中规定：NH4NO3、KNO3和MgSO4·7H20的量分别为1650mg/L、1900mg/L和370mg/L，现在要将这三种物质配成1个母液（先用少量蒸馏水分别溶解，然后依次混合，再加蒸馏水定容至1000ml，配成50倍液），那么这三种物质应分别称取（C）g。A.165、195和37B.0.165、0.195和0.37C.82.5、95和18.5D.825、950和1855.（B）是指将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中，在适宜条件下能发芽出苗的颗粒体。2A.胚培养B.人工种子C.基因工程D.单倍体育种6.能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是（A）。A.GAB.IAAC.NAAD.ZT7.下列哪种不是组织培养常用的维生素（A）。A.维生素B2B.维生素B1C.维生素B6D.维生素C8.下列哪种不是涂擦灭菌的对象（D）。A.双手B.台面C.工具D.空间9．适合外植体材料表面消毒的方法是（B）。A.高压蒸汽消毒B.适宜浓度的消毒剂浸泡消毒C.紫外线消毒D.消毒剂熏蒸消毒10.病毒在植物体中的分布规律为（A）。A.从茎尖到底部含量越来越多B.从茎尖到底部含量越来越少C.病毒在植株体的分布是均匀的D.茎尖含量最多，底部几乎没有11.对于花药培养和花粉培养，下列说法正确的是（A）。A.花药培养属器官培养，花粉培养属细胞培养B.花药培养属细胞培养，花粉培养属器官培养C.两者都属于器官培养D.两者都属于细胞培养12.不能人工诱导原生质融合的方法是（D）。A.无机盐诱导B.电融合C.PEG试剂D.重压13.用植物组织培养技术可以培养或生产出（D）。A.次生代谢产物B.无病毒植物C.人工种子D.A,B,C均可14．经高温灭菌后，培养基的pH会（C）。A.降低B.升高C.不变D.不能确定15.以下植物中，最适合叶片诱导，从而再生植株的是（B）。A.月季B.秋海棠C.大蒜D.菊花16.对于大多数植物来说，花粉培养的适宜时期是（C）。A.四分孢子期B.三核期C.单核晚期D.二核期17.下列不属于生长素类植物生长调节物质的是（A）。A.KTB.IAAC.NAAD.IBA318.下列培养基中，（C）无机盐的浓度最低。A.MS培养基B.B5培养基C.White培养基D.N6培养基19.(A)用于配制培养基时添加各种母液及吸取定量植物生长调节物质溶液。A.移液管B.分注器C.过滤灭菌器D.酸度计20.(A)是打破物种间生殖隔离，实现其有益基因交流，改良植物品种，以致创造植物新类型A的有效途径。A.体细胞杂交B.基因工程C.人工种子D.单倍体育种三、简答题：（1-3题，每题4分，4-5题，每题6分，共24分）1.植物组织培养室的核心是无菌室（又叫接种室），怎样进行无菌室的灭菌?（1）用甲醛和高锰酸钾混合熏蒸：一般每平方米需40％甲醛10毫升、高锰酸钾8毫升，进行熏蒸。使用时，先密闭门窗，量甲醛溶液盛入容器中、然后倒入量好的高锰酸钾，人员随之离开接种室，关紧房门，熏蒸20—30分钟即可。（2）紫外线照射灭菌：开始照射前拉好门、窗帘，然后开启接种室和设备上的紫外灯20-30分钟。2.试述植物组织培养试管苗的特点（1)生长细弱；(2)光合作用差(3)叶片气孔数目少，活性差(4)根的吸收功能弱(5)对逆境的适应和抵抗能力差3.简述植物组织培养脱毒苗的鉴定的方法1）指示植物法：将一些对病毒反应敏感、症状特征显著的植物作为指示植物（又称鉴别寄主），利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的方法。这种方法条件简单，操作方便，为一种经济而有效的鉴定方法（2）抗血清鉴定法：用已知抗血清鉴定未知病毒的种类。这种方法特异性高，测定速度快。所以抗血清法成为植物病毒鉴定中最有用的方法之一。（3）电镜检查法：可以直接观察病毒，检查出有无病毒存在，了解病毒颗粒的大小、形状和结构，又可以鉴定病毒的种类。优点是方法先进、灵敏度高、能在植物粗提取液中定量测定病毒。但需一定的设备和技术。44.请述活性炭在植物组织培养中有哪些作用？使用时有何注意事项？（1）主要是利用其吸附作用，减少一些有害物质的影响（2）活性炭使培养基变黑，有利于某些植物生根（3）对形态发生和器官形成有良好的效应注意事项：添加活性炭会降低培养基的凝固性，因此要适当提高琼脂的用量。5.什么叫污染？污染的原因有哪些？简述预防污染的措施？污染是指在组织培养过程中，由于细菌、真菌等微生物的侵染，在材料和培养基的表面滋生大量菌斑，造成培养材料不能生长和发育的现象。污染的原因：外植体灭菌不彻底、操作时人为带入、培养基及接种工具灭菌不彻底、环境不清洁。防治措施：防治外植体带菌、培养基和接种器具彻底灭菌、四、论述题：（第1题12分，第2题10分，共22分）1.培养基的配方是1/2MS＋BA0.5＋IBA1.0＋2.5%糖+0.6%琼脂，要配制1000ml，MS母液的浓度分别是：大量元素20倍，微量元素500倍，铁盐100倍，有机物50倍，BA1mg/ml，IBA0.1mg/ml。要吸取各种母液各多少ml？糖和琼脂称取多少克。糖：0.025*1000=25g琼脂：0.006*1000=6g大量元素：1/2（1000/20）=25ml微量元素：1000/500=2ml铁盐：1000/100=10ml有机物：1000/50=20mlBA:IBA：2.高压灭菌锅的操作使用步骤包括哪些?1.加水，但不超过加热板2.放入灭菌物品，盖上锅盖3.拧紧对角线螺栓4.打开电源，关闭放气阀5.当压力上升到0.05兆帕，打开放气阀，关闭电源，排放冷空气至0，6.关闭放气阀，打开电源，当压力上升至0.1兆帕时，在0.1-0.12兆帕之间维持20分钟7.关闭电源，当指针至0兆帕时，打开放气阀，开锅盖取物品。5五、判断题：（每小题1分，共12分）1.利用茎尖分生组织进行脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成正比。（×）2.琼脂浓度高时，易引起玻璃化现象。（×）3.选取外植体时，最好在阴雨天到田间取材，因为雨水将植株上的尘土已经冲掉。（×）4.热处理脱毒的基本原理是利用病毒对热不稳定，在高于常温下，即钝化失活。（√）5.某些植物，可以通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗。（√）6.激素浓度增加尤其是细胞分裂素浓度高，或细胞分裂素与生长素的比例高，易导致玻璃化苗的产生，因此适当地降低细胞分裂素浓度，可以防止玻璃化现象的发生。（√）7.对易褐变的材料可以通过添加抗氧化剂或活性炭等方法减轻醌类物质对培养物的毒害作用。（√）8.无菌操作室适当位置应吊装1-2盏紫外灯，用以经常地照射灭菌。（√）9.封口瓶塞可用多种方法，但要求绝对密闭，以防止培养基干燥和杂菌污染。（×）10.在植物组织培养中，GA3、IAA、ZT、ABA、NAA、泛酸、植物组织提取物等不能进行高压高温灭菌，需要进行过滤灭菌。（×）11.在培养基配制时常常把Fe盐单独配制，把FeSO4和螯合剂乙二胺四乙酸钠（Na2EDTA）先分别配成溶液，再相互混合使形成螯合铁用于培养基中，以防止沉淀和助其被植物吸收。（√）12.植物组织培养切取外植体时，所切取的外植体越小越好。（×）六、选项题:（每小题1分，共12分）将组培常用的设备、用具选择所属的分室。1.解剖镜(E)（1分）2.培养基灌装机(A)（1分）3.蒸馏水发生器(A)（1分）4.超净工作台(C)（1分）5.接种器具杀菌器(C)（1分）6.恒温振荡器(E)（1分）7.精密pH计(A)（1分）8.电热鼓风干燥箱(F)（1分）9.冰箱(A)（1分）10.紫外灯(C)（1分）11.压力灭菌锅(D)（1分）12.光照定时器(B)（1分）6A．配制室B．培养室C．接种室D．灭菌室E．细胞观察室F．洗涤室