3411牛血清白蛋白残留量测定法本法系采用酶联免疫法测定供试品中残余牛血清白蛋白(BSA)含量。供试品溶液的制备供试品如为冻干剂型,检测前应按标示量复溶后混匀,室温静置30分钟,检测前应再次混匀。供试品如为液体剂型可直接用于检测。干扰试验首次采用该法检测的供试品应进行干扰试验。制备溶液Ⅰ(供试品倍比稀释)、溶液Ⅱ(供试品和30ng/ml的内控标准品等量混合)和溶液Ⅲ(30ng/ml的内控标准品倍比稀释)。当供试品溶液BSA含量高于试剂盒测定范围中点时,则2倍稀释后制备溶液Ⅰ和溶液Ⅱ。溶液Ⅰ、溶液Ⅱ可倍比稀释测定,溶液Ⅲ应多孔测定(至少10孔以上),并在试验间均匀添加。按测定法操作,分别测定溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ的BSA含量,溶液Ⅰ与溶液Ⅱ的含量之差应在溶液Ⅲ含量测定值的95%可信区间内,表明供试品不会对该检测法产生干扰作用。测定法按试剂盒说明书进行,并采用试剂盒提供的供试品稀释液稀释供试品,供试品应至少进行2个稀释度测定,每个稀释度做双孔平行测定。试剂盒标准品的吸光度、内控参考品测定值、标准品线性相关系数、双孔测定吸光度均应在试剂盒要求范围内,试验有效。以标准品溶液的浓度对其相应的吸光度作直线回归,将供试品的吸光度代入直线回归方程,再乘以稀释倍数,计算出供试品中BSA含量。【附注】(1)当同一供试品的低稀释度吸光度明显低于高稀释度吸光度时,可能存在HOOK效应或操作失误,需重试或调整稀释倍数进行检测。(2)测定BSA含量的容器具应专用,防止实验室中BSA污染。