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一、名词解释1、组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株的过程。（P1）2、基本培养基：培养基中若只含有大量元素与微量元素，常称为基本培养基。(P19)3、完全培养基：需要添加各种各样的附加物如：维生素、氨基酸、生长调节物质的培养基。4、“煮化”培养基：使琼脂溶解于90℃以上的热水。(P22)5、灭菌：指用理化方法杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。(P31)6、无菌操作：在通过严格灭菌的操作空间（接种室、超净台等）和使用的器皿内，以及操作者外表都不带任何活着的微生物条件下进行操作。（P31）7、初代培养：旨在获得无菌材料和我无性繁殖系，即接种某种外植体后，最初的一代培养。8、褐变：外植体褐变是指在接种后，其表面开始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象。9、继代培养：继初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程，旨在繁殖出相当数量的无根苗，最后能达到边繁殖边生根的目的。10玻璃化：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常被称为玻璃化。11、驯化：植物由一种生长环境转到另一种差异较大的生长环境的适应过程12、植物组培苗工厂化生产：指在人工控制的最佳环境条件下充分利用自然资源和社会资源，采用标准化、机械化、自动化技术，高效优质地按计划批量生产健康植物苗木13、外植体：从母体上切下来用于进行组织培养的材料称为外植体。二、填空题、判断题或选择题1、植物组织培养的原理是：植物细胞的全能性2、植物组培发展简史：1902年德国植物学家哈布兰特（Haberlandt）提出植物细胞全能性的理论；1943年White出版了《植物组织培养手册》；1962年，Muraskige和Skoog发表了关于促进烟草组织快速生长的培养基组成的论文，文中提及的培养基就是目前广泛使用的MS培养基；1958年首次证实植物细胞具有全能性;1983年成功在烟草上实现了根癌农杆菌的转化，是第一个转基因（P3）3、植物脱毒和离体快速繁殖是目前植物组培应用最多、最有效的一个方面（P5）4、保持植物组织培养实验室洁净是组织培养成败的最基本要求（P8）5、无菌条件的好坏对组织培养成功与否起重要作用（P12）6、培养室最重要的因素是温度，一般保持在20℃-27℃左右，相对湿度保持在70％-80％为好，一般需要每天光照10h-16h(P15)7、培养基的成分主要有：水、无机营养素、有机化合物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类（P18）8、最常见的碳源有：蔗糖、葡萄糖、果糖（P19）9、在培养基的各成分中，植物激素是培养基的关键物质，对植物组织培养起着决定性作用（P20）10、生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向，是愈合组织、长根还是长芽（P21）11、母液配制时可分别配成大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机物母液、激素类母液（P24）12、培养基的pH一般是5.0-6.0，当高于6.0时培养基会变硬，低于5.0时，琼脂不能很好地凝固（P25）13、继代培养中扩繁的方法包括：切割茎段、分离芽丛、分离胚状体、分离原球茎等（P47）14、组培苗移栽苗的基质要求具备：透气性、保湿性好和一定的肥力，容易灭菌处理，不利于杂菌滋生，常选用：珍珠岩、蛭石、河沙、泥炭等（P49）15、病毒粒体有：杆状、线状、球状三种（P55）16、热处理的两种方法：一、温汤浸渍处理；二是高温空气处理（P58）17、生产规模的大小受两个因素的影响：组织培养试管苗的增殖率和生产种苗所需时间（P76）三、解答题1、常用培养基的配方有哪些？并且按培养基的成分和浓度可分为哪四种类型？(P28)答：常用培养基配方有：MS培养基，B5培养基，SH培养基，N6培养基，马铃薯简化培养基四个类型：①：含盐量较高的培养基；②：硝酸钾含量较高的培养基；③：中等无机盐含量的培养基；④：低无机盐含量的培养基（P30）2、外植体材料的预先栽培要做到什么？(P35)答：要做到：不连作；栽培基质要灭菌和消毒；多施腐熟的有机肥，少施化肥；及时预防病虫害；尽量创造较好的生长环境等3、外植体消毒剂有何要求(P38)答：具有良好的消毒效果，容易被水冲洗或能自行分解，不损伤材料，不影响组织培养物的生长4、简述初代培养时考虑的要素有哪些？(P45)答：①：无菌；②：一些条件（包括）：1、材料种类的选择与培养部位；2、合适的培养基，尤指激素；3、合适的培养条件③：技术高5、简述褐变产生的原因及减轻褐变的方法(P46)答；原因：它的出现是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，而使细胞的代谢发生变化所致减轻方法：“三选择，二加入，一连续”；选择分生能力强的外植体；选择合适的无机盐成分浓度、蔗糖浓度和激素水平；选择适宜的温度加入活性炭；加入抗氧化剂；连续将材料进行转移6、简述玻璃化发生原因与解决方法（P47）答；原因：主要是由于培养容器中空气湿度过高，透气性较差造成的方法：①：增加培养基琼脂的含量②：增加培养基中的溶质水平，以降低培养基的水势③：减少培养基中含氮化合物的用量④：增加光照⑤：增加容器通风，最好进行CO2施肥，这对减轻试管苗玻璃化的现象有明显的作用⑥：降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻试管苗玻璃化的现象发生⑦：降低培养基中细胞分裂素的含量，可以考虑加入适量脱落酸7、植物病毒的鉴定与检测方法（P55）答；①；指示植物法②；抗血清鉴定法③；电子显微镜鉴定法④；酶联免疫鉴定法（ELISA法）另：补充基本知识真菌性污染主要指霉菌引起的污染。一般接种后3～8d可在培养基中发现各种颜色的菌斑。真菌性污染，一股多由接种室内的空气不洁净、超净工作台的过滤效果不理想、操作不慎等原因引起。细菌性污染的主要症状是材料附近出现黏液状和发酵泡沫状物体，或在材料附近的培养基中出现混浊和云雾状痕迹。一般在接种后1～2d即可发现。细菌性污染除外植体带菌或培养基灭菌不彻底外，主要是操作人员的不慎造成。除要求操作人员严格按照无菌操作程序操作外，外植体带菌引起的污染与外植体的种类、取材季节、部位、预处理方法及消毒方法等密切相关。灭菌过程：先用75%酒精荡洗30秒左右，倒出酒精水用无菌蒸馏水冲洗3-5次，然后用0.1%的升汞溶液荡洗7分钟左右，倒出升汞溶液，用无菌蒸馏水冲洗5-10次离体培养的含义：培养物脱离母株而在培养基上进行的培养还有组织培养的三大特点：培养条件可以人为控制、生长周期短，繁殖率高、管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。掌握组培过程中褐变和玻璃化的概念，产生原因及如何减少褐变和玻璃化的发生？