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省武高生物学案高二班姓名：2016.412.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体三、动物细胞融合1．概念：两个或多个动物细胞结合形成的过程。2．原理：。3．方法：与植物体细胞杂交大体相同，物理和化学方法有、等，动物细胞融合特有的方法是用处理。4．过程：不同遗传信息的两个或多个细胞――→灭活的病毒PEG、电激等细胞。5．意义：突破了有性杂交方法的局限，使成为可能；为制造开辟了新途径。四、单克隆抗体1．传统抗体的获得方法的缺陷：。2．单克隆抗体的制备：（1）原理：一种B淋巴细胞（浆细胞）产生抗体，但B淋巴细胞（浆细胞）在体外（能/不能）无限增殖；而骨髓瘤细胞（能/不能）无限增殖，但（能/不能）产生单一抗体。利用技术得到杂交瘤细胞，既能，又能。（2）过程：向小鼠注射特定→从小鼠脾脏中获取→将鼠的与脾脏中获取的融合→用特定的选择培养基筛选出→将筛选出的细胞用检验→将二次筛选出的细胞在培养或注射到小鼠的中增殖。3．单克隆抗体的优点：。4．应用：作为诊断试剂，具有的优点；还可用于治疗疾病和。第2节第2课时问题总结：1．动物细胞融合与植物原生质体融合所用的诱导方法有何不同？答案动物细胞融合可用灭活的病毒进行诱导。2．细胞融合技术与有性杂交相比有哪些优点？答案有性杂交有着十分严格的时空关系和物种界限。动物细胞融合则不同，它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障，从而能够按照人们的意愿，把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。3．动物细胞融合和受精作用的区别有哪些呢？答案受精作用是在同种生物之间进行的，精子与卵细胞的融合不需要任何诱导剂就能形成受精卵，受精卵内具备同种生物的两个亲本的遗传物质。而动物细胞融合是在不同物种间进行的细胞融合，由于物种间存在生殖隔离，所以在自然条件下不能融合成杂交细胞，必须有诱导剂作用才能融合。形成的杂交细胞具备两个亲本细胞的遗传物质，从而体现两个亲本的遗传特性。4．动物细胞融合完成的标志是什么？答案动物细胞融合完成的标志是来自不同细胞的两个或多个细胞核融合成一个细胞核。5．制备单克隆抗体过程中的几种细胞有何特点？答案免疫的B淋巴细胞能产生单一抗体，但不能无限增殖；而骨髓瘤细胞能无限增殖，却不能产生抗体。杂交瘤细胞既能产生特定的抗体，又能在一定培养条件下进行无限增殖。6．单克隆抗体制备过程中有两次筛选，其目的分别是什么？答案第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，筛选出只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂种细胞。第二次筛选需先在多孔培养皿上培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。7．用单克隆抗体及相关物质制成的“生物导弹”中真正起治疗作用的物质是什么？是单克隆抗体吗？省武高生物学案高二班姓名：2016.42答案“生物导弹”中真正发挥治疗作用的物质是相关“药物”，单克隆抗体所起的作用在于将药物定向带到靶细胞所在位置，借助其导向作用，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量，有疗效高、毒副作用小的优势。8．若不采用动物细胞融合的方法，能否生产出单克隆抗体？答案能。可从经免疫的B淋巴细胞（浆细胞）中获取决定所需抗体的基因(目的基因)，导入骨髓瘤细胞，然后培养骨髓瘤细胞并从培养液中提取分泌物，便可得到单克隆抗体。判断正误：（1）动物细胞融合也称细胞杂交，使远缘杂交成为现实。()（2）动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。()（3）动物细胞融合的主要用途是制备克隆动物。()（4）杂交瘤细胞是由经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成的，具有既能无限增殖又能产生特定抗体的能力。()（5）单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高，并能大量制备。()（6）单克隆抗体可以用于治疗疾病。()（7）动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体能体现细胞的全能性。()（8）动物细胞核融合发生在杂种细胞的有丝分裂过程中。()（9）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合成一个细胞的过程。()（10）动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的双核或多核细胞称为杂交细胞。()（11）常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、离心等。()（12）细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。()（13）制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞是经过免疫的B淋巴细胞。()（14）细胞融合之后需要一次筛选，方可获得能产生单一抗体的杂交瘤细胞。()（15）利用单克隆抗体制成的“生物导弹”，其选择性是由药物决定的，与抗体无关。()课时检测：1．与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合的原理及其特有的诱导因素分别是()A．细胞膜的流动性、离心B．细胞膜的流动性、灭活的病毒C．细胞的全能性、电刺激D．细胞的全能性、灭活的病毒2．单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是()①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．①②③④B．①②③C．②④D．②③3．下列关于动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，叙述正确的是()A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞4．单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。英国科学家米尔斯坦和科勒设计了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，下图为其实验流程图。则相关的叙述或说法中，不正确的是()A．a是骨髓瘤细胞，②表示在选择培养基上进行培养B．制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是它只能分泌多种特异性抗体C．③过程如在体外培养，则需要无菌、无毒，营养充足，温度、pH适宜等环境条件D．诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇省武高生物学案高二班姓名：2016.435．下面为制备单克隆抗体过程示意图，下列相关叙述错误的是()A．④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞B．②中培养基应加入选择性抑制骨髓瘤细胞DNA分子复制的物质C．上图中有一处明显错误D．⑤可以无限增殖6．关于动物细胞融合的说法，不正确的是()A．动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B．动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞叫杂交细胞C．常用于诱导动物细胞融合的手段有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能7．动物细胞融合的目的中最重要的是()A．克服远缘杂交不亲和B．制备单克隆抗体C．培育新物种D．生产杂交细胞8．单克隆抗体与血清抗体相比，其优越之处在于()A．单克隆抗体可作为某些药物的载体B．单克隆抗体可以在体外制备C．单克隆抗体特异性强、灵敏度高，并可大量制备D．单克隆抗体的制备过程简单，操作方便9．“生物导弹”是指()A．单克隆抗体B．杂交瘤细胞C．产生特定抗体的B淋巴细胞D．在单克隆抗体上连接抗癌药物10．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的细胞是()A．经过特定抗原免疫的B淋巴细胞B．不经过免疫的B淋巴细胞C．经过特定抗原免疫的T淋巴细胞D．不经过免疫的T淋巴细胞11．制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括()①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植A．①②B．①③C．②③D．③④12．右图所示为单克隆抗体制备过程，1过程注射的物质和A细胞的名称分别为()A．抗体、T淋巴细胞B．抗原、T淋巴细胞C．抗体、B淋巴细胞D．抗原、B淋巴细胞13．科学家用灭活的病毒把骨髓瘤细胞与经过免疫的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，灭活病毒的作用是()A．病毒比较小，可钻入到细胞内B．灭活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以让细胞聚集C．灭活的病毒已失去感染性，对各种动物细胞不造成破坏，但所保留的融合活性可使不同的动物细胞进行融合D．灭活的病毒带有目的基因，通过融合可以让杂交细胞带有目的基因14．下列关于单克隆抗体在疾病诊断和治疗以及科学研究中应用的的叙述，错误的是()A．特异性强、灵敏度高B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D．由经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌省武高生物学案高二班姓名：2016.4415．20世纪30年代，科学家们发现肺结核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理组织中存在多核细胞，这些多核细胞最可能的来源是()A．细胞进行了无丝分裂造成的B．细胞进行有丝分裂时，染色体复制后没有分开形成两个子细胞C．有丝分裂时，细胞核进行了分裂，而细胞质没有进行分裂D．细胞在体内病毒的作用下发生了细胞融合16．用动物细胞工程技术制备单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是()A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用氯化钙作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合C．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体D．该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体17．右图为细胞融合过程示意图，请据图回答下列问题：（1）若A、B是植物细胞，则其融合形成的D细胞培养成植株，还要应用__________技术。（2）若A、B是动物细胞，则一般取自________、幼龄动物的器官或组织，然后用胰蛋白酶使其分散开来。A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞工程的方法是用___________诱导细胞融合。（3）若该过程用于制备干扰素，A为小鼠________细胞，在获得此细胞之前，应给小鼠注射相应的抗原，此时的B为________细胞。（4）从A、B到C的过程中，可形成_____种类型的C细胞(仅考虑两个细胞间的融合)。若该过程用于制备单克隆抗体，应筛选出符合要求的D细胞，方法是用特定的______培养基培养，筛选出的D细胞称为___________，常用的培养方法有体外培养和体内培养两种；前者是在_______培养基中培养，后者是在_________内增殖。18．若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目为40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目为60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。请据图回答下列问题：（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是______小鼠，理由是__________________________。（2）在细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有__________________________________________________，体系中出现多种类型细胞的原因是_______________________________________________________________。（3）杂交瘤细胞中有_______个细胞核，染色体数目最多是________条。（4）未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是__________________。省武高生物学案高二班姓名：2016.45专题2：细胞工程第6、7课时参考答案：三、1．一个细胞2．细胞膜的流动性3．电激聚乙二醇（PEG）灭活的病毒4．杂交5．远缘杂交单克隆抗体四、1．产量低、纯度低、特异性差2．（1）单一不能能不能动物细胞融合大量繁殖产生专一的抗体（2）抗原蛋白相应的B淋巴细胞骨髓瘤细胞B淋巴细胞杂交瘤细胞选择培养基体外腹腔3．特异性强、灵敏度高、并可大量制备