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2014---2015年第二学期细胞工程试卷答案一、填空题１、目前，体外受精成功的标志至少是看受精卵可以发育至囊胚期阶段。2、动物细胞培养需要防止污染问题，显著污染的标志是ＰＨ显著改变，细胞外形模糊，甚至出现漂浮的集落。3、超数排卵是向动物体内注射某些促性腺激素，对卵巢产生作用促进排卵。4、动物细胞培养时，细胞主要以聚集体形式存在。5、细胞融合实验最常用的生物促融剂是仙台病毒（ＨＶＪ）。6、胚胎工程中最关键的技术是体外受精和胚胎移植。7、克隆动物制备主要是通过不同来源的细胞核移植实现的。8、动物细胞体外培养的培养基包括：天然培养基、合成培养基和无血清培养基。9、动物细胞培养一般经过：原代培养、传代培养和衰退期三个阶段。消化法传代是实验室动物细胞培养的传代方法。10、干细胞从来源上可分为胚胎干细胞和成体干细胞两种。从功能上可分为单能干细胞、多能干细胞和全能干细胞。11、HAT选择培养基中有三种关键成分：次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）、胸腺嘧啶（T）。12、影响超数排卵效果的因素包括供体年龄、供体品种差异、激素剂量、卵巢状况等。13、动物多倍体培育常用的物理方法包括：温度激变（温度休克法）、水静压法、机械损伤、辐射高盐碱法等。14、女性细胞在间期出现的三角形或半月状的染色体，称为Barr’s小体。15、哺乳动物的Y染色体上有一个性别遗传控制因子，称为睾丸决定因子。16、大量产生单克隆抗体的方法主要有杂交瘤细胞体内接种法和体外培养法。17、卵母细胞成熟的一些标志包括：发生泡破裂、染色体凝集、纺锤体形成、极体排出、透明带软化、卵丘细胞扩散。18、灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、燃烧灭菌、射线灭菌。19、细胞超低温储贮存分快速冷冻法和逐步冷冻法。20、组织培养细胞一代生长过程潜伏期、指数增长期、停止期三阶段。二、名词解释1、细胞工程：应用细胞生物学和分子生物需的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或特种细胞产品的综合性科学技术。2、细胞融合：将不同来源的原生质体相融合并使之分化再生、形成新物种或新品种的技术。3、接触抑制：当两个细胞由于移动而相互靠近发生接触时，细胞不再运动，这种由细胞接触而抑制细胞运动的现象称接触抑制，是某些贴附型细胞生长特征之一。4、传代培养：将原代培养的细胞继续转接培养的过程。细胞的体外大量增殖以及细胞系的建立是通过传代培养实现的。5、固定化培养：将动物细胞与非水溶性载体结合起来，在生物反应器中进行大规模培养的方法。6、贴附型细胞：必须依赖于贴壁或锚定于其他物体的表面才能生长的细胞。7、分批式培养：指先将细胞和培养液一次性装入反应器内进行培养，细胞不断生长，同时产物也不断形成，经过一段时间的培养后终止培养，一次性收获细胞和产物。8、细胞融合：两个或两个以上来源相同或不同的细胞合并成一个细胞的过程。9、胚胎工程：对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎体外培养等，以加速繁育经济动物，培育优良品种，挽救濒危动物。10、精子获能：精子在雌性动物生殖道内发生生理变化后，获得穿透卵子的透明带能力的过程。11、超排：以各种外源性促性腺激素诱发动物卵巢使其有更多的卵泡，并排出更多的具有受精能力的卵子。12、核移植技术：利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。13、发育阻滞：体外受精的早期胚胎在体外发育中往往会停止在某一阶段不再发育的现象。14、生长因子：一类通过与特异的高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长与其他细胞功能等多效应的多肽类物质。15、体细胞克隆：将动物体细胞经过抑制培养使其处于休眠状态，利用细胞核移植技术将核导入去核卵细胞，培育成早期胚胎移植至受体，妊娠产仔培育出与核供体一样的成体动物的一种细胞工程技术。16、单克隆抗体：经过免疫的哺乳类动物单一的Ｂ淋巴细胞可以分泌单一性抗体，这种具有特异性的、同质性的抗体为单克隆抗体。17、胞质体：除去细胞核后由膜包裹的无核细胞。18、细胞系：经过在培养后而形成的具有增殖能力、特性专一、类型均匀的培养细胞。19、细胞株：将所得到的纯净细胞群以一定的密度接种在１ｍｍ厚的薄层固体培养基上，进行平板培养形成的细胞团。20、永久细胞系：大多数细胞系在有限的代数内以不变的形式增殖，当超过有限世代后，在体外永久存活下发育成永久细胞系或连续细胞系。三、选择题1、下列关于动物细胞培养的有关叙述中正确的是（D）A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C.动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理2、下列不属于动物细胞工程应用的是（C）A.大规模生产干扰素，用于抵抗病毒引起的感染B.为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞C.大规模生产食品添加剂，香料等D.利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖3、“生物导弹”是指（D）A．单克隆抗体B．杂交瘤细胞C．产生特定抗体的Ｂ淋巴细胞D．在单抗上连接抗癌药物4、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（D）A.容易产生各种变异B.具有更强的全能性C.取材十分方便D.分裂增殖的能力强5、用动物细胞培养技术使细胞传到50代以后仍能传下的传代细胞称（C）A.原代细胞B.传代细胞C.细胞系D.细胞株6、能提高良种家畜繁殖能力的细胞工程技术是（C）A.组织培养B.细胞融合C.胚胎移植D.细胞核移植7、下列有关动物细胞培养和胚胎工程的叙述中，错误的是（B）A.选择胚胎干细胞作为核供体进行核移植可提高动物克隆的成功率B.在人胚胎发育过程中只有受精卵具有全能性C.胚胎分割时用胰蛋白酶将卵裂球中的细胞分散开D.连续细胞系大多数具有异倍体核形8、下列说法正确的是（A）A.细胞培养过程中需要定期更换培养液B.体外细胞培养只需加入抗生素，无需无菌培养C.ES细胞贴壁培养便可保持未分化状态D.成体干细胞的分化能力比胚胎干细胞的分化能力强9、细胞株的特点是（A）A.遗传物质发生改变，具有癌变特点，可以无限传代B.遗传物质没有改变，可以无限传代C.遗传物质没有改变，不可无限传代D.遗传物质发生改变，不可无限传代10、利用动物细胞融合技术可获得杂交瘤细胞，下列说法不正确的是（B)A.需经筛选过程方可获得B.可分泌多种特异性抗体C.具有双亲细胞的遗传物质D.体外培养条件下可大量繁殖11、下列不属于单克隆抗体在实践上应用的实例是（D）A.利用同位素标记的单克隆抗体定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病B.利用免疫病毒清除异体骨髓移植中的供体骨髓T细胞C.制成“生物导弹”将药物定向地带到癌细胞所在部位D.将抗药菌的某基因引入小鼠细胞内12、下列关于细胞工程的叙述，错误的是（C）A.植物细胞融合必须先制备原生质体B.试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面C.经细胞核移植培育出新个体只有一个亲本的遗传性状D.用于培养的植物器官属于外植体13、下列不属于细胞重组的方式（C）A.胞质体与完整细胞重组形成胞质杂种B.微细胞与完整细胞重组形成微细胞异核体C.核体与完整细胞重组形成重组细胞D.胞质体与核体重新组合形成重组细胞14、动物细胞的超低温保存技术不包括（C）A.冷冻保护法B.常规冷冻法C.冰冻法D.玻璃化冻存法15、在影响体细胞胚发生的激素因素中，应用最广泛的是（B）A.IBAB.2,4-DC.IAAD.BA16、只能使动物细胞融合的常见诱导方法是(A)A.灭活的病毒B.PEGC.电刺激D.离心17、下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（D）A.卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加B.胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点C.胚胎分割时需将原肠胚的内细胞质均等分裂D.胚胎干细胞是一类未分化细胞，可以从早期胚胎中分离出来18、制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A）①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植A.①②B.①③C.②③D.③④19、下列关于动物细胞培养的叙述正确的是（B）A.培养中的人效应T细胞产生单克隆抗体B.培养中的人效应B细胞产生单克隆抗体C.任何成熟红细胞经过培养能形成细胞株D.用胰蛋白酶处理肝脏组织可获得整个肝脏20、动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（A）A.动物细胞培养B.动物细胞融合C.单克隆抗体D.胚胎核移植四、判断题1、体细胞胚又叫胚状体，是指离体培养条件下经过受精过程而形成的胚胎类似物。（×）2、颗粒性白细胞、淋巴细胞、巨噬细胞都属于多形型细胞。（×）3、传代培养或收获细胞均需使细胞脱落微载体，通常用酶消化法。（√）4、无限细胞系大多数已发生异倍化，具异倍体核型，有的可能已转为恶性细胞。（√）5、消化纤维组织一般采用纤维素酶。（×）6、ES细胞是一种含正常二倍体的具有发育全能性细胞。（√）7、根据X、Y精子DNA含量的微小差别，可通过流式细胞仪进行分离。（√）8、玻璃化冷冻法具有快捷简单、高效的特点，缺点是需要昂贵的冷冻仪器。（×）9、DMSO属于渗透性冷冻保护剂。（√）10、大量生产单克隆抗体方法有两种：体外使用培养管培养杂交瘤细胞，从下沉物中获取抗体和体内瘤细胞制备血清。（√）11、原代培养分为两种：组织块培养和组织块消化培养。（√）12、等密度沉降分离法主要是根据细胞大小不同分离细胞，细胞在单位重力作用下，通过密度介质，细胞大，沉降快。（×）13、悬浮培养优点是比较容易更换培养基。（×）14、兔的同期发情只用HCG就可以达到目的。（√）15、外植体是离体培养的活的动物组织。（×）16、动物发情配种后，取出胚胎，移入同种或亲缘关系较近的，生理状态不必相同的动物输卵管或子宫内。（×）17、天然培养基中的激素有胰岛素，生长素和多种生长因子。（×）18、Hanks液和Earle液是两种常用的BSS基础溶液。（√）19、成纤维型细胞起源于内胚层与外胚层的细胞，在体外培养时都可能呈现。（×）20、微载体培养包括实心微载体，多孔微载体。（√）五、简答题1、影响体细胞胚发生的因素（1）培养材料的基因型、生理状况。（2）培养条件：光照、温度、铵态氮、氨基酸、激素等。其中激素的调控作用，2，4-D是应用最为广泛的生长素，2，4-D的应用有规律性的变化，首先在较高浓度下诱导胚行细胞的形成，然后降低2，4-D的浓度下产生早期胚胎，一般在球形胚形成后，除去生长素有利于体细胞胚的继续发育。2、简述血清在培养液中的主要功能（1）提供对维持细胞指数生长的激素（2）提供结合蛋白，能识别维生素，脂类，金属等，能结合或调节它们所结合的物质活力。（3）是细胞贴壁，铺展在塑料培养基上所需因子的来源起酸碱度缓冲剂的作用（4）提供蛋白酶抑制剂，使细胞传代时使用的胰蛋白酶失活，保护细胞不受损伤。3、为什么微载培养系统是目前最有发展前途的一种培养模式？因为该模式把单层培养和悬浮培养的优点融汇在一起，具有两种培养方法的优点。（1）比表面积大（2）生物相容性好，无毒无害，有好的黏附性，一般带正电荷（3）机械性能强，可搅拌，能保护细胞，重复利用（4）微载体悬浮于培养基中，细胞生长环境均一，便于检测和控制（5）培养基利用率高（6）放大较容易（7）热稳定性好，适合高压灭菌4、简述利用杂交瘤细胞技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点（1）亲本细胞的准备：致敏B淋巴细胞，骨髓瘤细胞的准备（2）细胞融合形成杂交瘤细胞（3）杂交瘤细胞的筛选：采用HAT选择性培养基（4）可分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞的筛选：对每个含有杂交瘤细胞集落的生长孔中的上清液进行抗体检测，筛选出能够稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交细胞（5）杂交瘤细胞的克隆化培养：有限稀释法或软琼脂平板法5、论述在机体内干细胞增殖特性及其意义（1）干细胞增殖的缓慢性意义：a.可以减少基因发生突变的危险，且使干细胞有更多时间发现和校正复制错误。b.利用干细胞对特定的外界信号作出反