细胞膜的通透性

山东大学实验报告姓名：XXX系年级：2013级XXXX学号：201300XXXXXX科目：细胞生物学实验题目：细胞膜的通透性日期：2014/9/23细胞膜的通透性一．实验目的1.了解溶血现象及其发生机制。2.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度二．实验原理细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性地控制物质进出细胞。将红细胞放在低渗溶液中，水分子大量渗透到细胞内，可使细胞涨破，血红蛋白释放到介质中，溶液由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。由于溶质渗透入细胞的速度不同，溶血时间也不同。因此，发生溶血现象所需的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。三.实验用品1．材料鸡血2．试剂0.85%的Nacl溶液，0.085%的Nacl溶液，0.8mol/L的甲醇溶液，0.8mol/L的丙三醇溶液，6%的葡萄糖溶液，2%的TritonX-100溶液3．器材6支试管，离心机，滴管，试管架四．实验步骤1.取鸡血6ml，加0.85%Nacl溶液4ml，在1000r/min条件下离心五分钟。（RBC体积量不少于0.6ML）2.将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50%的浓度。（总体积应不少于1.2mL）3.每组取6支试管，分别加入如下溶液各3Ml(1)0.85%Nacl溶液(2)0.085%Nacl溶液(3)0.8mol/L甲醇溶液(4)0.8mol/L丙三醇溶液(5)6%葡萄糖溶液(6)2%TritonX-1004．向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，轻摇混匀，观察试管中是否有溶血现象发生（观察时间1小时）,记录溶血时间，并于显微镜下观察各溶液中的细胞。五．实验结果山东大学实验报告姓名：XXX系年级：2013级XXXX学号：201300XXXXXX科目：细胞生物学实验题目：细胞膜的通透性日期：2014/9/23不同溶液处理导致红细胞溶血的现象试管编号123456溶液0.85%Nacl溶液蒸馏水0.8mol/L甲醇溶液0.8mol/L丙三醇溶液6%的葡萄糖溶液2%TritonX-100是否溶血否是是是是是溶血时间/s8.9s9.6s1h1h6.9s结果分析该溶液为鸡血红细胞的等渗溶液，不会发生溶血。该溶液为鸡血红细胞的低渗溶液，细胞会吸水涨破甲醇溶液为亲脂性的小分子溶液，易通过细胞膜进入细胞，提高细胞的渗透压，使外界的水分子进入细胞，引起细胞吸水涨破该溶液为高渗溶液，细胞内的水分子会向外流出，小分子丙三醇会进入细胞，但因为丙三醇分子量较大，进入细胞速率较慢，所以不易看到细胞发生溶血现象高渗溶液，虽然葡萄糖可以进入细胞，但因为分子量比较大，进入速率非常慢，不易见到溶血现象的发生该溶液可将细胞膜上的蛋白质脱离下来，使细胞发生溶血，同时细胞悬液变得有点浑浊由表格中溶血时间可看出，蒸馏水和2%TritonX-100处理的红细胞悬液，细胞溶血很快，其次是0.8mol/L甲醇溶液，而0.8mol/L丙三醇溶液和6%的葡萄糖溶液处理的红细胞悬液，细胞溶血时间很慢。不同溶液处理后离心管中鸡血红细胞悬液的透明情况比较。山东大学实验报告姓名：XXX系年级：2013级XXXX学号：201300XXXXXX科目：细胞生物学实验题目：细胞膜的通透性日期：2014/9/23蒸馏水处理后的红细胞，细胞悬液迅速变澄清，证明细胞已发生明显溶血；0.8mol/L甲醇溶液处理的红细胞悬液也很快变澄清，但透明度不如蒸馏水处理的红细胞悬液：0.8mol/丙三醇溶液处理的红细胞悬液变澄清很慢；6%的葡萄糖溶液处理的红细胞悬液变澄清最慢；2%TritonX-100处理的红细胞悬液变澄清比较快，但透明度不高，远低于对照试管透明度，说明Triton试剂将蛋白脱离下来，蛋白游离在溶液中。不同溶液处理后的鸡血红细胞的形态变化0.85%Nacl溶液0.85%Nacl溶液与蒸馏水0.85%Nacl溶液与0.8mol/L甲醇溶液0.85%Nacl溶液与0.8mol/丙三醇溶液0.85%Nacl溶液与6%的葡萄糖溶液0.85%Nacl溶液与2%TritonX-100蒸馏水0.8mol/L甲醇溶液山东大学实验报告姓名：XXX系年级：2013级XXXX学号：201300XXXXXX科目：细胞生物学实验题目：细胞膜的通透性日期：2014/9/23不同作用时间下的细胞形态0.8mol/丙三醇溶液（1）（2）（3）（4）0.8mol/丙三醇溶液6%的葡萄糖溶液2%TritonX-100山东大学实验报告姓名：XXX系年级：2013级XXXX学号：201300XXXXXX科目：细胞生物学实验题目：细胞膜的通透性日期：2014/9/236%的葡萄糖溶液（1）（2）（3）（4）1．0.85%Nacl溶液中的细胞，细胞保持正常形态2．0.085%Nacl溶液中的红细胞大都吸水涨破3．0.8mol/L甲醇处理的红细胞，部分破裂，部分保持原状4．0.8mol/丙三醇溶液处理15min后的红细胞，大致保持正常形态；0.8mol/丙三醇溶液处理30min后的红细胞，细胞突显；0.8mol/丙三醇溶液处理45min后的细胞，部分细胞边缘开始产生缺口；0.8mol/丙三醇溶液处理60min后的红细胞，多数细胞开始破裂。5．6%的葡萄糖溶液处理15分钟后的红细胞悬液，细胞无明显变化；处理45分钟后的细胞，细胞数目明显减少，说明已经失水；处理60分钟后的细胞，一些细胞已经发生明显变形，表明细胞已经开始破损。6．2%TritonX-100溶液处理的红细胞，细胞明显变小。六．讨论与结论1．从1和2号试管，即0.85%Nacl溶液和蒸馏水处理的细胞悬液中，可得出结论：细胞在山东大学实验报告姓名：XXX系年级：2013级XXXX学号：201300XXXXXX科目：细胞生物学实验题目：细胞膜的通透性日期：2014/9/23低渗溶液中容易发生溶血，并且细胞膜内外浓度差越大，细胞越容易溶血。2．从3和4号试管中，即0.8mol/L甲醇溶液和0.8mol/L丙三醇溶液处理的悬液中，可得出结论：脂溶性物质容易穿过细胞膜，并且物质分子量越小，个头越小，越容易穿过细胞膜，引起细胞溶血。3．从5号试管中，可得出结论：分子量较大的极性分子，不容易穿过细胞膜引起细胞溶血。4．从6号试管中，可得出结论：TritonX-100试剂可抽取细胞膜中的蛋白质，使细胞通透性增强，从而使细胞发生溶血。5．1号试管，即0.85%Nacl溶液处理的红细胞悬液，放置很长时间之后，也会出现溶血现象。