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请试一试IFCC推荐法：1收集细胞悬液240C低温离心（3000rpm，5min）3弃上清，加入一定量PBS（200ul），轻轻吹打混匀，-200C冷冻30min，370C解冻，如此反复3次，可形成细胞裂解液裂解方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解。化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法，通常会很少使DNA断裂。这两种方法（包括SDS和溶菌酶处理等）提取纯化DNA中常用的方法。机械裂解可以更均一的裂解细胞，同化学裂解相比，机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性。机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞，但也会造成DNA的断裂。一、机械裂解法主要有以下两中：1．热休克（Thermalshock），既反复冻溶法，是一种常用的机械裂解方式比，通常由冷冻和解冻两部分组成（freezingandthawing）,。原理：由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。冷冻通常在液氮或-20°C冰上进行，解冻可以在37、50、65或100℃水浴中进热休克比化学裂解温和，但是很有效，有资料表明用热休克和溶菌酶与SDS的方法获得了90%的细胞裂解率。2．超声波处理（Ultrasonication）既利用超声加热的方法，把细胞破碎。但这种处理会导致DNA的断裂，所以加热不宜过剧烈，要设定好超声时间和间隙时间，一般超声时间不超过5秒，间隙时间最好大于超声时间，这些都有利于保护酶的活性。bead-beating也是常用的机械处理方式，有报道指出bead-beating比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好虽然DNA产量较高，但通常得到的DNA片段较小。二、化学裂解和酶裂解法（在提核酸时联合使用）主要是裂解液处理法，细胞裂解液的主要目的有以下几种：（1）利用去污剂破坏脂质双分子层，破裂细胞；（2）溶解蛋白；（3）蛋白变性使其稳定；（4）抑制蛋白酶活性。主要根据不同的目的，裂解液的组成有所不同，主要有提取核酸和蛋白两中。在提取RNA或DNA时，我们主要是要充分裂解细胞，得到更多的核酸；如果我们的目的是蛋白，那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液，在提取蛋白后，再根据实验需要复性蛋白等。以下是细胞裂解中常用试剂和其作用：50mMTris-HClpH7.4（缓冲体系），150mMNaCl（等渗体系），1mMPMSF（强大的蛋白酶抑制剂），1mMEDTA（变性剂和稳定剂），5µg/mlAprotinin（蛋白酶抑制剂），5µg/mlLeupeptin（蛋白酶抑制剂），1%Tritonx-100（破坏细胞），1%Sodiumdeoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂），0.1%SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）。7M尿素，2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解），蛋白酶K等。以上是个人的一些总结，请指正！下面给大家一些园子里的连接供参阅！（如何摸索细胞裂解时间）（原核表达细胞裂解）（WesternBlot细胞裂解方法）细胞裂解-丁香园论坛（原创，为了节约资源，在试管中裂解）（WB裂解步骤，简单实用）该用哪种细胞裂解液-丁香园论坛（提取核蛋白细胞裂解）[老话重提]细胞裂解-丁香园论坛（胞质蛋白细胞裂解问题，比较好）（关于成纤维细胞测总蛋白裂解）回复：【求助】各种细胞裂解液的不同点-丁香园论坛（不同细胞裂解液的特点）回复：【求助】细胞裂解液-丁香园论坛（裂解液配方和试剂盒的选择）（红细胞裂解）（几种细胞裂解方法的比较）=65&id=5045954&sty=3&keywords=%CF%B8%B0%FB%C1%D1%BD%E2（汇总出菌体/细胞裂解的常用方法和配方）精华贴希望大家参阅！