质粒DNA的提取与纯化实验教案

1、质粒DNA的提取与纯化实验教案授课题目：质粒DNA的提取与纯化授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年3月20/27日13：00至2007年3月20/27日18：00授课教师：刘清岱教学目标及基本要求1、通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒DNA。2、初步了解DNA纯化的原理。教学内容提要及时间分配1、质粒DNA的概念及其在分子生物学的应用。————30分钟2、碱裂解法提取质粒DNA的原理。—————————20分钟3、DNA纯化与保存的方法。————————————20分钟4、分子生物学仪器的使用方法。—————————30分钟5、实验条件及步骤。——————————————30分钟6、质粒DNA的提取。———————————————60分钟7、质粒DNA的纯化。———————————————60分钟8、质粒DNA的保存。———————————————30分钟9、总结————————————————————20分钟教学重点及难点1、碱裂解法提取、纯化质粒DNA的实验方法。2、质粒DNA的性质与应用。3、分子生物学基本操作。教学方法：结合理论实际，抽象知识内容用多媒体表示，实验操作过程给于示教。教学手段：观看碱裂解法提取质粒DNA的教学录相，同时采用画图，示范教学的方法。使用的教材及参考资料：《生物化学实验和技术》，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006《分子克隆实验指南》第三版（上、下册），原著：[美]J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔，科学出版社，2002《精编分子生物学实验指南》，F.M.奥斯伯等编著，科学出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等）：1、具体实验操作步骤较多，应让学生提前预习，并书写预习报告。2、观看碱裂解法提取质粒DNA的教学录相更加直观了解实验原理和方法。3、应该强化学生分子生物学实验操作基本技术。4、着重强调碱法提取质粒DNA操作过程中应注意的一些问题。2、质粒DNA的酶切与电泳检测实验教案授课题目：质粒DNA的酶切与电泳检测授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年4月3/10日13：00至2007年4月3/10日18：00授课教师：刘清岱教学目标及基本要求1、通过本部分实验学习质粒DNA的限制性内切酶酶切分析。2、初步了解如何建立双酶切的实验体系。3、掌握电泳仪、凝胶成像系统等设备的使用。教学内容提要及时间分配1、限制性内切酶的概述及其在分子生物学的应用。—30分钟2、琼脂糖凝胶电泳检测DNA的原理。————————10分钟3、不同质粒DNA电泳现象—————————————20分钟4、实验条件及步骤。——————————————30分钟5、琼脂糖电泳相关仪器的使用方法。———————30分钟6、质粒DNA的酶切。———————————————60分钟7、琼脂糖凝胶电泳与染色。———————————90分钟8、凝胶成像系统分析实验结果。—————————30分钟教学重点及难点1、限制性内切酶的性质和双酶切体系的建立。2、应用琼脂糖凝胶电泳分析质粒DNA的电泳行为。教学方法：讨论式教学，充分发挥学生的主体作用，引导学生去思考、去探索、去发现，要鼓励学生大胆提出问题。教学手段：通过质粒DNA酶切的电泳图片，板书限制性内切酶的识别序列，同时采用示范教学的方法。使用的教材及参考资料：《生物化学实验和技术》，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006《分子生物学检验技术》，徐克前等编著，人民卫生出版社，2003《精编分子生物学实验指南》，F.M.奥斯伯等编著，科学出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等）：1、介绍分子生物学工具酶在基因工程中的应用，增加学生兴趣。2、对于凝胶成像系统等设备应该让学生们多接触，使其能够独立操作，并对其结果进行分析。3、植物基因组DNA的提取和纯度鉴定实验教案授课题目：植物基因组DNA的提取和纯度鉴定授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年4月17/24日13：00至2007年4月17/24日18：00授课教师：刘常金教学目标及基本要求1、掌握提取真核细胞基因组DNA的一种基本方法。2、学习使用紫外线分光法计算DNA的含量和纯度。教学内容提要及时间分配1、真核细胞基因组DNA提取的原理。————————30分钟2、紫外线分光法测定DNA的含量和纯度。——————30分钟3、紫外线分光光度计的使用方法。————————20分钟5、实验条件及步骤。——————————————30分钟6、植物材料丙酮粉的制备。———————————60分钟7、基因组DNA的提取。——————————————60分钟8、产品浓度及纯度测定。————————————30分钟9、总结————————————————————30分钟教学重点及难点1、真核细胞基因组DNA提取的实验方法。2、DNA浓度及纯度的计算方法。教学方法：结合理论实际，深入浅出。实验操作过程给于示教。教学手段：采用画图，示范教学的方法。使用的教材及参考资料：《生物化学实验和技术》，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006《分子克隆实验指南》第三版（上、下册），原著：[美]J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔，科学出版社，2002《精编分子生物学实验指南》，F.M.奥斯伯等编著，科学出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等）：1、真核细胞基因组DNA提取步骤较多，应让学生提前预习并书写预习报告。2、使用紫外线分光光度计，正确计算DNA的浓度和纯度对于分子生物学非常关键。4、聚合酶链式反应（PCR）基因扩增实验教案授课题目：大肠杆菌感受态细胞的制备及转化授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年5月8/15日13：00至2007年5月8/15日18：00授课教师：李静教学目标及基本要求1、通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。2、初步了解PCR引物的设计与相关软件的使用。教学内容提要及时间分配1、聚合酶链式反应（PCR）的原理。———————20分钟2、PCR在分子生物学与医学等领域的应用。————30分钟3、如何建立一个PCR反应体系。—————————30分钟4、PCR引物的设计与相关软件的使用。——————30分钟5、基因扩增仪的使用方法。——————————30分钟6、PCR实验操作。———————————————90分钟7、PCR结果的电泳检测。————————————90分钟8、总结———————————————————10分钟教学重点及难点1、PCR反应体系的原理与优化。1、PCR引物设计的原则与PCR相关软件的使用。教学方法：推演性教学，介绍简单的模式。抽象知识内容多媒体表示，具体实验操作过程给于示教。教学手段：观看聚合酶链式反应的课件，同时采用电脑示范Primer5.0软件来设计PCR引物。使用的教材及参考资料：《生物化学实验和技术》，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006《PCR技术实验指南》，迪芬巴赫，德弗克斯勒等编著，化工出版社，2006《PCR最新技术原理、方法及应用》，黄留玉等编著，化工出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等）：1、实验内容结合理论内容进行讲述，效果较好。2、分子生物学软件的使用应该详细讲解，使学生能够使用来初步设计、分析PCR引物。5、DNA体外重组实验教案授课题目：DNA体外重组授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年5月22/29日13：00至2007年5月22/29日18：00授课教师：刘常金教学目标及基本要求1、通过本部分实验学习重组质粒的连接、转化及筛选的原理与方法。2、初步了解外源DNA片段和质粒载体的连接反应策略。教学内容提要及时间分配1、概述质粒的连接、转化及筛选的原理。—————30分钟2、几种连接反应策略。—————————————40分钟3、实验条件及步骤。——————————————30分钟4、质粒DNA的制备。———————————————60分钟5、外源DNA的制备。———————————————60分钟6、DNA的体外重组。———————————————60分钟7、总结—————————————————————20分钟教学重点及难点质粒的连接、转化及筛选的原理。教学方法：讨论式教学，抽象知识内容多媒体表示，实验操作过程给于示教。教学手段：观看基因克隆的教学课件，同时采用画图，示范教学的方法。使用的教材及参考资料：《生物化学实验和技术》，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006《分子克隆实验指南》第三版（上、下册），原著：[美]J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔，科学出版社，2002《精编分子生物学实验指南》，F.M.奥斯伯等编著，科学出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等）：1、本实验较抽象，多媒体教学尤为重要。2、应该介绍前后的实验之间的联系，使几个实验的学习成为一个整体。3、强调实验基本操作规范，让学生养成良好的实验习惯，具有扎实的实验技能。6、大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验教案授课题目：大肠杆菌感受态细胞的制备及转化授课对象：四年制生物技术本科生授课时间：2007年6月4/11日13：00至2007年6月4/11日18：00授课教师：刘常金教学目标及基本要求1、学习和掌握大肠杆菌感受态细胞的制备技术。2、能够计算转化率。3、了解其他的转化方法与筛选体系。教学内容提要及时间分配1、大肠杆菌感受态细胞制备的原理。———————30分钟2、计算转化效率，影响转化效率的因素。—————30分钟3、介绍转化细胞的筛选。————————————20分钟4、-70℃冰箱等仪器的使用方法。—————————30分钟5、实验条件及步骤。——————————————30分钟6、大肠杆菌感受态细胞的制备。—————————60分钟7、质粒转化至大肠杆菌。————————————60分钟8、转化细胞的筛选。——————————————30分钟9、总结————————————————————10分钟教学重点及难点1、CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞的原理。2、如何正确计算转化效率，如何提高转化效率。教学方法：推演性教学，介绍简单的计算模式。实验操作过程给于示教。教学手段：采用板书计算转化效率的方法，同时结合课件进行讲述。使用的教材及参考资料：《生物化学实验和技术》，袁道强，黄建华等编著，中国轻工业出版社，2006《分子克隆实验指南》第三版（上、下册），原著：[美]J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔，科学出版社，2002《精编分子生物学实验指南》，F.M.奥斯伯等编著，科学出版社，2005教研室主任意见：年月日本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等）：1、如能设计一些简单的实验来分析影响转化效率的因素会使学生更加深入的体会本方法。2、实验内容结合理论内容进行讲述，效果较好。