第五章种子检验参考资料张春庆,王建华.种子检验学,北京:高等教育出版社,2006颜启传.种子检验原理和技术.杭州:浙江大学出版社,2001周祥胜,赵立新,颜启传.幼苗鉴定实用手册.北京:中国农业出版社,20031995农作物种子检验规程1996(2009)国际种子检验规程第一节概念和意义☤1.概念及内容种子检验(seedtesting)按照规定的方法程序对种子样品的主要指标进行检测、分析与鉴定,并以此为依据对该样品所代表种子批的种用价值作出合理的评定或提出处理意见的过程。种子检验的内容•物理质量:净度分析、其他植物种子数目测定、水分测定、重量测定等•生理质量:发芽试验、生活力测定、活力测定•遗传质量:真实性和品种纯度测定•卫生质量:健康检验•其他:包衣种子的检验☤2.种子检验的作用及意义(1)保证种子质量,提高产品产量和质量。(2)保障种子的贮运安全。(3)防止病虫草害随同种子的传播蔓延。(4)保护种子使用者的合法利益,促进种子质量不断提高。(5)推行种子质量标准化和实施《种子法》的保证。(6)确保种子质量,维护国家声誉。☤3.种子检验规程(Rulesforseedtesting)统一的种子检验程序和方法(准确性和重演性)1869年:德国,Dr.F.Nobbe,世界第一个种子检验实验室(种子真实性,净度,发芽率)1876年:Dr.F.Nobbe,出版《种子学手册》1892年:第一个跨国检验规程(ScandinavianRulesforSeedTesting)1906年:德国,汉堡。第一次国际种子检验大会☤4.种子检验的发展简史1908年:北美官方种子分析家协会(AOSA)1921年:欧洲种子检验协会(ESTA)1924年:英国,剑桥。第四次国际种子检验大会,国际种子检验协会(ISTA)1931年:第一个国际种子检验规程InternationalRulesforSeedTesting1981年:全国种子检验协会1984年:第一个国家种子分级标准和种子检验规程1996年:1995农作物种子检验规程我国种子检验发展情况扦样是种子检验中最关键的环节。扦样的准确性决定了种子检验结果的价值。扦样的重要性:(1)扦样员必须是经过训练并有一定经验的专业人员(2)必须严格按照规程扦样第二节扦样(Sampling)扦样:从大量种子中随机取得一个重量适当,有代表性的供验样品。其中各种组分出现的概率决定于它在种子批中的含量百分率。种子检验的目的是评价大量种子的质量状况。但不可能对全部种子进行检验,只能是其中的一部分代表。术语的解释种子批(Seedlot):同一来源,同一年度,同一时期收获和质量基本一致,在规定数量之内的种子。初次样品(Primarysample)混合样品(Compositesample)送验样品(Submittedsample)试验样品(Workingsample)扦样器(Samplingprobe)分样器(Subsamplingdivider)扦样程序1、扦样前的准备2、划分种子批3、扦取初次样品(1)袋装种子扦样(2)散装种子扦样种子批袋数最低扦样袋数1-5每袋都扦取6-14不少于5袋15-30每3袋扦取1袋31-49不少于10袋50-400每5袋扦取1袋401-560不少于80袋561以上每7袋扦取1袋袋装种子扦样袋数散装种子扦样点数种子批大小,Kg扦样点数50以下至少3点51-1500至少5点1501-3000每300Kg扦1点3001-5000至少10点5001-20000每500Kg扦1点20001-28000至少40点28001-40000每700Kg扦1点4、配制混合样品5、送验样品的取得(1)送验样品的规定重量A:水分测定B:纯度测定C:其他项目(2)分取送验样品6、送验样品的处理实验室分样方法机械分样器法四分法第三节净度分析(Purityanalysis)种子净度:种子清洁、干净的程度,是衡量种子批质量的基本指标。测定供验样品各成分的重量百分率,据此推测种子批的组成。鉴定组成样品的各个种和杂质的特性,为种子清选等提供信息。目的和意义方法精确法:Nobbe于1875年创立,将试验样品分为好种子、废种子、有生命杂质和无生命杂质4类,我国83年规程采用该标准。快速法:1908年创立于加拿大,将试样分为净种子、其它植物种子、杂质3类,1953年即列入国际规程,我国95年规程采用该标准。净种子(Pureseed):送验者所叙述的种,符合国标要求的种子单位或构造,或是在分析时所发现的主要种。其他植物种子(Otherseeds):除净种子以外的任何植物种类的种子单位。杂质(Inertmatter):除净种子和其他植物种子外的种子单位和所有其他物质及构造。术语的解释总则净种子(pureseed):下列构造凡能明确鉴别出它们是属于所分析的种(已变成菌核、黑穗病孢子团或线虫瘿的除外),即使是未成熟的、瘦小的、皱缩的、带病的或发过芽的种子都是净种子:a.完整种子单位b.大于原来大小一半的破损种子单位1、豆科、十字花科种皮完全脱落的种子单位列为杂质。2、即使有胚芽和胚根的胚中轴,并超过原来大小一半的附属种皮,豆科种子单位的分离子叶也列为杂质。3、甜菜属超过一定大小的复胚种子单位列为净种子。4、燕麦属、高粱属中,附着的不育小花不须除去而列为净种子。例外其他植物种子(otherseeds)同净种子鉴定原则,但甜菜属种子单位作为其他植物种子时不必筛选,可用遗传单胚的净种子定义。1、明显不含真种子的种子单位。2、甜菜复胚种子单位未达到净种子定义规定最低大小的。3、种子单位碎片为原来大小一半或不及一半的。4、净种子定义中未提及或不归为净种子的附属物。5、种皮完全脱落的豆科、十字花科种子。6、脆而易碎、呈灰白色至乳白色的菟丝子属种子。7、脱落的不育小花、空的颖片、内外稃、稃壳、茎叶、球果鳞片、果翅、树皮碎片、花、线虫瘿、真菌体、泥土、砂砾、及所有其他非种子物质。杂质(inertmatter):净种子定义细则稻属(Oryza)由颖片、内外稃包着颖果的小穗,当芒长超过小花长度时,将芒除去。有或无不孕外稃、有内外稃包着颖果的小花,当芒长超过小花长度时,将芒除去。有内外稃包着颖果的小花,当芒长超过小花长度时,将芒除去。颖果。超过原来大小一半的破损颖果。黑麦属(Secale)、小麦属(Triticum)、小黑麦属(Triticosecale)、玉米属(Zeamays):颖果。超过原来大小一半的破损颖果。棉属(Gossypium):有或无种皮,有或无绒毛的种子。超过原来大小一半,有或无种皮的破种子。花生属(Arachis)、芸薹属(Brassica)、大豆属(Glycine)、苜蓿属(Medicago)、烟草属(Nicotiana)、番茄属(Lycopersicon)等:有或无种皮的种子。超过原来大小一半,有或无种皮的种子。豆科、十字花科种皮完全脱落的种子单位列为杂质。即使有胚中轴,并超过原来大小一半的附属种皮,豆科种子单位的分离子叶也列为杂质。甜菜属(Beta):复胚种子:用筛孔为1.5mm*20mm的200mm*300mm的筛子筛理1min后,留在筛上的种球或破损种球(包括从种球突出程度不超过种球宽度的附着断柄),不管其中有无种子。遗传单胚:种球或破损种球(包括从种球突出程度不超过种球宽度的附着断柄),但明显无种子的除外。果皮/种皮部分或完全脱落的种子。超过原来大小一半,果皮/种皮部分或完全脱落的种子。(突出程度超过种球宽度的附着断柄,除去整个断柄)植物学名用拉丁文表示,采用国际命名法。净度分析程序(接受送验样品后,对送验样品称重)1、重型混杂物的检查2、分取试验样品(有精确要求)至少2500个种子单位,但远少于送验样品的重量,一般是10倍左右。(?)称重与小数位数试样或半试样及其成分重量,g称重至下列小数位数1.000以下41.000—9.999310.00—99.992100.0—999.911000或1000以上03、试样的分离,称重4、结果计算(注意最后记录值的计算)a.检查分析过程中的重量变化(5%)b.计算各组分的重量百分率c.重复间误差检查(容许差距)d.有重型混杂物时的计算(公式)e.修约5、结果报告(检验证书)净度分析结果保留一位小数,各种成分的百分率总和必须为100%。含量小于0.05%成分填报“微量”,如果一种成份的结果为零,则填报“-0.0-”。必须填报净种子和其他植物种子的拉丁名。当某一类杂质或其他植物种子超过1%时,该种成分的百分率须注明。净度分析结果记载表样品登记号J980002作物名称水稻(Oryzasativa)净种子其他种子杂质试样与重复试样重,g重量,g百分数,%重量,g百分数,%重量,g百分数,%各成分重量之和120.5119.8596.920.20000.980.43002.1020.48全/半试样220.1019.2195.410.31001.550.61003.0420.04分析结果净种子,%96.2其他植物种子,%1.3杂质,%2.6其他植物种子种类其他作物种子:0.2%Triticumaestivum;Hordeumvulgare杂草种子:0.9%Echinochloasp.杂质种类Triticumaestivum检验员:xxx校核员:xxx其他植物种子数目测定Determinationofotherseedsbynumber估测送验人所指定的其他植物种子的数目,包括泛指的种(如所有的其他植物种)、专指某一种类(如在一个国家里列为有害种)、特定的种(如匍匐冰草)。定义完全检验(completetest)有限检验(limitedtest)简化检验(reducedtest)简化有限检验(reduced-limitedtest)程序1、试验样品:25000个种子单位或至少规定的1/5。2、测定:逐粒挑选,并计数。如局限于发现某些特定的种,那么发现该种或全部指定种(与申请者的要求相符)的一粒或数粒种子时,即可停止测定。3、结果用测定的实际数量中发现的属于每个指定种或种类的种子数目表示,或折算为每单位重量所含的其他植物种子数。(证书背面注明所采用的测定方法)其他植物种子数目测定记载表样品登记号J980067作物名称小麦(Triticumaestivum)试样重量,g1015种类学名粒数种类学名粒数1大麦Hordeumvulgare24____2燕麦Avenasativa55____3____6____合计粒数___7__粒;___7__粒/kg检测方法完全检测检验员:xxx校核员:xxx第四节水分测定Determinationofmoisturecontent种子水分的概念是指种子样品在没有引起任何化学变化的情况下,与周围蒸汽压平衡至零时所失去的重量。(Guilbot等,1973)水分测定的意义种子寿命安全贮藏水分测定的基准方法甲苯蒸馏法真空烘箱法卡尔·费休法甲苯蒸馏法样品与甲苯一起煮沸,蒸馏出水分。蒸汽冷凝后,流入测量管,读出水分体积。适用于芳香油含量高的种子:冷杉属、雪松属、云杉属、松属、铁杉属、山毛榉属。真空烘箱法在不完全真空和不高于100℃下烘干种子,以P2O5为吸湿剂。减少种子内其他挥发性物质的散失。国际禾谷类化学协会(ICC),国际标准化组织(ISO)和国际种子检验协会(ISTA)采用50℃真空干燥至种子恒重,约150多小时。美国禾谷类化学家协会,官方分析家协会等采用98-100℃真空干燥至恒重,约5小时。卡尔·费休试剂:133ml无水吡啶、42.23g碘、333ml无水甲醇混合,称重。在冰浴中充分冷却,通入二氧化硫,增重32g。摇匀,暗处保存。24h后,取30mg重蒸水于锥形瓶内,加入2-5毫升无水甲醇,标定卡尔·费休试剂。总反应式:I2+H2O+SO2+CH2OH+3C5H5N=2C5H5N·HI+C5H5N(H)SO4·CH3在SO2和C5H5N存在下,碘与水生成氢碘酸吡啶和甲基硫酸氢吡啶。卡尔·费休法样品(100mg)于圆底烧瓶中,加入400ml无水甲醇。加热回流和