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茶叶中茶多酚的提取方案茶叶中富含一类多羟基的酚类物质,即茶多酚(TeaPolyphenols,简称TP),它是以儿茶素类(约占TP的79%)为主体的多酚类化合物;此外,还含有黄酮、黄酮苷类、花色素类、酚酸及缩酚酸等。TP占绿茶干物质的20%~30%,具有很强的抗氧化作用和良好的药理作用,能够高效地抗癌、抗衰老、抗辐射、清除人体自由基、降血糖和血脂。本研究以茶多酚提取产率和含量为指标,对浸提溶剂浓度、浸提时间、等量氯仿萃取次数、等量乙酸乙酯萃取次数等因素进行比较,确定绿茶中茶多酚的最佳提取条件,为茶多酚的工业化提取提供科学依据。1材料与方法1.1材料与仪器绿茶、分光光度计、恒温水浴箱、恒温干燥器、过滤及萃取的设备。1.2试剂硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、乙醇、氯仿、乙酸乙酯等均为优级纯化学试剂。1.3茶多酚提取采用溶剂萃取法,其原理是根据TP易溶于水、乙醇、乙酸乙酯等溶剂的性质,用水或乙醇先将茶多酚从茶叶中提取出来,用氯仿除去杂质,再用乙酸乙酯将其从水提物中分离出来,最后将乙酸乙酯回收,即得到固体的茶多酚,计算其产率。提取方法见图1。1.4正交试验设计及结果按照上述提取工艺,经过多次单因子对比试验,正交试验设计为:选择浸提溶剂乙醇浓度、浸提时间、等量氯仿萃取次数、等量乙酸乙酯萃取次数等4个因素,每个因素3水平,见表1。以茶多酚的产率和含量为考察指标,用L9(34)正交表安排试验,其结果见表2。表1正交试验因素-水平表(试验条件)水平因素浸提溶剂浓度(%)A浸提时间(h)B等量氯仿萃取次数C等量乙酸乙酯萃取次数D1951112801.522360233表2正交试验设计及结果ABCD产率(%)含量(%)111112122231333421235223162312731328321393321产率(%)K1E=E=K2K3R含量(%)K1K2K3R1.5茶多酚含量的测定准确称取所制得的茶多酚粉末0.1g,加入蒸馏水,完全溶解,定容至100mL水溶液备用。准确吸取1.00mL上述备用溶液置于25mL的容量瓶中,加水4mL、酒石酸亚铁溶液5mL,然后加pH7.5的磷酸盐缓冲液稀释至刻度。用蒸馏水做空白对照,用1cm比色皿,在波长540nm的条件下,用分光光度计测出其吸光度,计算出茶多酚的含量。表3提取产率正交试验方差分析来源平方和(SS)自由度(DF）均方和(MS)F1)p显著性ABCD表4茶多酚含量正交试验方差分析来源平方和(SS)自由度(DF)均方和(MS)F1)p显著性ABCD