第六章输血不良反应与新生儿溶血病实验诊断

第六章输血不良反应与新生儿溶血病实验诊断第一节概述一、红细胞血型系统1、ABO血型系统血型红细胞表面的抗原血清中抗体AA抗BBB抗AABAandB－OH抗A,抗B,抗A，B2、Rh血型系统抗原：D、E、C、c、e抗体：主要通过输血或妊娠免疫产生，常为IgG类。一般在初次免疫后2～6个月内出现。二、其他血型系统（一）白细胞抗原系统1.白细胞本身特有的2.与红细胞相同的血型抗原3.与其他组织共有的（HLA，humanleukocyteantigen)（二）血小板抗原及抗体1.与其他细胞或组织共有的抗原，称血小板相关抗原——主要为ABO血型抗原及HLA-Ⅰ类抗原；2.人类血小板抗原，存在于血小板膜糖蛋白，由血小板特有的抗原决定簇组成，表现出独特的遗传多态性，称血小板特异性抗原。（三）血清蛋白抗原第二节常用实验检测一、红细胞ABO血型常规鉴定（一）ABO血型鉴定的临床意义：1.在输血上的意义2.新生儿同种免疫溶血病3.ABO血型与器官移植4.其他：亲子鉴定，法医学鉴定等。（二）急性溶血性输血反应（acutehemolytictransfusionreaction,AHTR):由于输入ABO血型不相容的血液时，导致受血者发生急性血管内溶血、肾衰竭甚至死亡。（三）免疫性输血不良反应：ABO亚型不合输血可刺激产生意外抗体（unexpectedantibody)，导致免疫性输血不良反应的发生二、Rh血型鉴定1、RhD血型鉴定因为RhD抗原的免疫原性最强，出现频率最高，故一般只做RhD血型鉴定。应用单克隆抗D-混合血清（IgM+IgG)通过凝集反应对红细胞上RhD抗原进行鉴定。2、Rh血型系统检测临床意义Rh血型系统所致的溶血性输血反应新生儿Rh溶血病3、弱D型鉴定弱D红细胞上D表位是完整的，只是表达弱。所以，弱D型红细胞与某批抗D血清在盐水介质及酶试验中并不发生凝集。而用卡式（间接抗球蛋白法）则可发现凝集。临床意义：在临床输血中，若供者为弱D型，应作为Rh阳性看待;若受者为弱D型，应作为Rh阴性看待弱D型妇女和Rh阳性丈夫生育的婴儿可能发生Rh-HDN三、意外抗体筛查与鉴定血型抗体分规则抗体和不规则抗体。不规则抗体是指抗-A，抗-B以外的抗体。筛查：用2～3个人份的O型红细胞组成一套谱细胞试剂，含有多种抗原，如待测血清中存在不规则抗体，即可以和谱细胞中至少一个出现反应。1、不规则抗体筛查方法：是将受检者血清与已知血型的试剂红细胞（谱细胞）反应，以发现37℃时具有反应活性的抗体。谱细胞是已知血型表现型的O型红细胞配套组成，具有各种不同的抗原成分。谱细胞选择：每套筛选红细胞必须表达D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Lea、Leb、K、k、Fya、Fyb、Jka、Jkb抗原还可以选择Lua、V、Cw、Kpa、Jsa类抗原2、不规则抗体鉴定选择谱细胞–谱细胞一般是由8～12人份的已知血型表型的O型红细胞配套组成，应尽可能包含最多的抗原决定簇，根据谱红细胞的反应格局一般可以鉴定出常见的抗体。–在抗体鉴定中，只用一套谱细胞是不可能对所有不规则抗体都进行鉴定的。应选择不同的谱细胞，鉴定不同的特异性抗体。四、交叉配血试验1、交叉配血又称相容性试验。包括：–主侧：受血者血清+供血者红细胞–次侧：受血者红细胞+供血者血清–自身对照：受血者红细胞+受血者血清2、交叉配血常用试验1.盐水法2.微柱凝胶介质交叉配血试验•原理：抗原+抗体•评价：（1）提高了检测的灵敏度和特异度，可一次性检出IgM类和IgG类红细胞血型抗体（2）血清中若含有溶血性抗体及补体，则出现溶血而不是凝集，交叉配血试验应视为阳性五、新生儿溶血病实验检测是指母婴血型抗原不一致，母血中存在针对胎儿或新生儿红细胞抗原的免疫性抗体（IgG类），通过胎盘进入胎儿血循环，发生同种免疫反应导致红细胞破坏而溶血。1、产前抗体检测：母体内IgG类抗A、抗B效价检测母体内可以有天然性IgM抗体和免疫性IgG抗体试验中用2-巯基乙醇处理母亲血清，可以中和IgM抗体处理后的母亲血清用盐水做倍比稀释，与相应的标准血球反应报告效价参考范围：IgG类抗A（抗B）效价≤322、产后——新生儿血型血清学检查1、直接抗球蛋白试验阳性：表示红细胞已被IgG类不完全抗体所致敏。阳性可见于：HDN、溶血性输血反应、自身免疫性溶血性贫血以及药物诱导产生的自身抗体等。DAT主要用于区分HDN是源于ABO血型系统与其他血型系统：ABO血型系统：弱阳性/阴性其他血型系统：阳性2、游离试验即用间接抗球蛋白试验检测新生儿血清中的血型抗体3、放散试验致敏的患儿红细胞通过热放散的方法将抗体放散于放散液中，然后加入标准A、B、O型红细胞，在抗球蛋白试剂中观察有无凝集反应。是判断HDN最有力的证据。是三项实验中敏感性最高的第三节常见输血不良反应的实验诊断一、输血不良反应（adversetransfusionreactions)：是指输血过程中或输血后，因输注血液或血液制品而发生的输血前不能预期的不良反应。•感染性输血不良反应•非感染性输血不良反应–溶血性输血不良反应–急性溶血性输血反应（acutehemolytictransfusionreaction)——输血24小时内发生的溶血性输血反应–迟发性溶血性输血反应（delayedhemolytictransfusionreaction)——输血1天后至数周内发生的输血反应–血小板输注无效（platelettransfusionrefractoriness,PTR)–输血相关移植物抗宿主病–输血相关性急性肺损伤二、血小板输注无效（PTR）PTR：是指由于免疫因素或其他因素使输入的血小板受到破坏，患者在输注合适剂量的血小板后没有产生“适当的反应”，即连续两次输注足量随机供者血小板后，没有达到合适的校正血小板计数增加值（CCI)，临床出血表现亦未见改善。1、校正血小板计数增加值（correctedcountincrement,CCI)2、血小板回收率（percentageplateletrecovery,PPR)判断标准：输注1小时后，CCI＜7.5×109/L或输注20～24小时后，CCI＜4.5×109/L，认为输注无效；输注1小时后，PPR＜30%，或输注20～24小时后，PPR＜20%，认为输注无效。复习题or练习题：1.ABO、Rh血型鉴定临床意义？2.Rh血型系统的抗原构成？3.什么是输血不良反应？4.新生儿溶血病？5.什么是不规则抗体？如何操作？6.什么是血小板输注无效？