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1硕士研究生考试试题参考答案及评分标准……………………………装………………订………………线…………………………学院：生命科学学院专业：细胞生物学考试科目：现代细胞生物学方法与技术学期：2015—2016学年第二学期注：重在考察学生的综合能力，答案不作严格限定，仅作为参考。1、结合实例，简述细胞原代培养原理、主要过程及注意事项。（10分）要点1：细胞原代培养原理。（1分）要点2：细胞培养主要过程。（4分）2、简述细胞转染原理及方法。（15分）要点1：细胞转染原理。（5分）要点2：细胞转染方法：脂质体转染法：电孔转染法：病毒感染法：（5分）（注：每种方法5分，答对2种以上即可得满分）3、试述RNA干扰技术特点及应用。（15分）要点1：RNA干扰概念。（5分）要点2：RNAi具有的特征（5分）1）RNAi是转录后水平的基因沉默机制;（1分）2）RNAi具有很高的特异性；（1分）3）RNAi抑制基因表达具有很高的效率；（1分）4）RNAi抑制基因表达的效应广泛性；（1分）5）ATP依赖性；（1分）要点3：RNA干扰技术的应用（5分）21）在探索基因功能中的应用：2）在基因治疗领域中的应用：3）在折叠病毒性疾病的治疗中的应用：（注：答题要点不限，以上仅供参考，每点2分，答对3点以上满分）4、简述免疫组化技术方法的原理及优点（10分）要点1：免疫组化原理：5分）要点2：优点：（5分）1）高度的特异性；2）敏感性高；（注：答题要点不限，以上仅供参考，每点3分，答对2点以上满分）5、简述流式细胞技术原理及应用。（15分）要点1：流式细胞术原理。（5分）要点2：流式细胞技术的应用（10分）1）在肿瘤学研究中的应用：2）在免疫学中的应用；3)在临床血液学中的应用。（注：每点4分，答对3点及以上得满分）6、解释绿色荧光蛋白GFP生化性质、发光原理及应用。（10分）要点1：绿色荧光蛋白概念。（1分）要点2：发光原理。（2分）要点3：荧光特性（5分）1）荧光特性稳定；2）检测方便；3）无种属特异性；4）GFP对受体细胞基本无毒害；5）不受假阳性干扰；6）无需任何反应底物和辅助因子（注：每点1分答对5点即可得满分）3要点4：GFP在生物领域中的应用（3分）1）GFP在肿瘤发病机制研究中的应用：2）GFP在动物营养学研究中的应用：3）GFP在水生环境检测的应用：（注：答题要点不限，以上仅供参考，每点1分，答对3点以上满分）7、试述细胞死活的检测。（7分）要点1：细胞活性鉴定原理（2分）要点2：常用的鉴定方法：（5分）1）MTT法：2）XTT法：3）CCK-8法或称WST-8法（注：每种方法2分，答出以上3种以上可打满分）8、qRT-PCR在细胞生物学的应用。（8分）要点1：qRT-PCR概念（3分）要点2：qRT-PCR原理及步骤（5分）原理：2分）步骤：反转录：依赖反转录酶将RNA反转录成cDNA；（1分）扩增：用PCR的方法扩增cDNA；（1分）检测：实时检测和定量扩增的产物。（1分）9、简述细胞系建系的方法及主要过程。（10分）要点1：细胞系的概念（3分）要点2：细胞系建立的方法及过程（7分）1）取材：2）成纤维细胞排除：3）提高细胞培养存活率和生长率：（注：每个步骤3分，答对3个以上步骤得满分）