一.实验原理用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数量。用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血红细胞计数板,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。二.实验内容与步骤1、红细胞计数(1)器材:显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板(2)试剂:RBC稀释液①Hayem稀释液:NaCl,Na2SO4,HgCl2②枸橼酸钠甲醛盐水溶液:枸橼酸钠,甲醛,NaCl③生理盐水或含1%甲醛的生理盐水:仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用(3)标本:外周血或抗凝血(EDTA抗凝)(4)操作步骤:①小试管加RBC稀释液2.0ml。②采血,取血10μl。③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~3次,立即混匀。④混匀后充入计数室,静置3~5min,高倍镜下计数(用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。)2、白细胞计数(1)器材:显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板(2)试剂:WBC稀释液:冰醋酸3.0mL(破坏红细胞);蒸馏水97.0mL;亚甲蓝(染色)(3)标本:新鲜全血或末稍血(4)操作步骤:①小试管加WBC稀释液0.38mL。②采血,微量吸管取血20μL。③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~3次,立即混匀。④混匀后充入计数室,静置2~3min,低倍镜下计数(用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。)三.实验结果表一红细胞计数表中方格1中方格1中方格1中方格1中方格1总数7287868377405RBC/L=405/100×1012=4.05×1012/L表二白细胞计数表大方格1大方格1大方格1大方格1总数32262925112WBC/L=112/20×109=5.6×109/L实验结果:RBC:4.05×1012/LWBC:5.6×109/L四.讨论1、从实验结果与正常范围比较,实验结果没有超出正常范围,提示被采血者无病理或生理性异常。2、采血时不要过分挤压。3、取血量须准确,动作要迅速,防止血液凝固。4、血液加入稀释液后,应立即混匀。5、充池前要摇匀,一次性充池,不能产生气泡,溢出或不足都要擦干净后重新充池。6、压线细胞应数上不数下,数左不数右。