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【临床生物化学和生物化学检验】(第二版)☆课堂笔记目录第一章绪论（同书，略）....................................第1页第二章蛋白质与临床诊断...................................第1页第三章糖代谢紊乱..........................................第3页第四章血浆脂蛋白及其代谢紊乱.............................第9页第五章体液平衡紊乱.......................................第15页第六章钙磷镁与微量元素的临床生物化学.....................第22页第六章钙磷镁与微量元素的临床生物化学(测定技术)...........第24页第七章诊断酶学...........................................第25页第八章肿瘤标志物.........................................第48页第十章肝胆疾病的生物化学诊断.............................第28页第十一章肾脏疾病的生物化学诊断...........................第31页第十二章内分泌疾病的生物化学诊断.........................第40页第十五章遗传病及遗传病的诊断.............................第41页第十六章常用分析技术在临床生化中的应用...................第44页第十七章血清酶定量的检测技术.............................第46页第十八章基因诊断技术在医学检验中的应用...................第47页第十九章临床生化分析仪的性能与应用.......................第50页第二十章临床生物化学方法的选择、建立和评价................第51页第二十一章临床生物化学检验质量控制.......................第53页附录1：临床生物化学和生物化学检验教学要求.................第55页附录2：HITACHI7170A全自动生化分析仪....................第58页【临床生物化学和生物化学检验】(第二版)☆课堂笔记第一章绪论（同书，略）结合珠蛋白(Hp)第1页共58页第二章蛋白质与临床诊断第一节健康与疾病时的血浆蛋白质理化性质元素组成两性电解质分子大小胶体性沉淀功能：1营养2缓冲和胶体渗透压3载体功能4免疫与防御功能5凝血与纤溶6酶7代谢调控8组织结构（胶原蛋白等）9基因调节研究领域：1、蛋白质理化性质方面2、蛋白质生理功能方面3、蛋白质的遗传与变异4、血液恶性肿瘤，肾疾病的诊理化性质：两对肽链;且有变异体，电泳位a2带测定方法：免疫化学法（扩散,浊度）,化学法等功能：与红细胞中释出自由Hb结合,防止Hb从尿中丢失保存铁,急性溶血后一周再生恢复临床意义：连续观察用与监测急性时相反应和溶血是否处于进行α2-巨球蛋白(AMG)理化性质：MW=62.5-80万,含糖8%，4亚基。肝细胞与单核吞噬细胞系统中合成，半寿期5天。断与预后的监测6、组织与细胞培养5、蛋白质表达与疾病的关系7、常见疾病的研究测定方法：免疫化学等功能：与多种分子和离子结合，影响蛋白水解酶活性分类：盐析法电泳分类功能分类血浆蛋白质的理化性质.功能与临床意义前白蛋白（PA）理化性质:MW=54000,肝细胞合成,半寿期12小时测定方法：免疫化学等功能：营养指标，载体功能临床意义：营养不良，肝功不全，敏感性高，急性炎症，恶性肿瘤，肝硬化及肾炎低参考值：200—400mg/L白蛋白（ALB）理化性质：MW=66400，肝细胞合成，15-19天测定方法：色素结合法:溴甲酚绿（BCG），溴甲酚紫（BCP）,盐析等功能：营养指标，载体功能临床意义：营养不良，肝功不全，急慢性肝疾病，敏感性较低。参考值：35--50g/Lα1-抗胰蛋白酶（AAT）理化性质：MW=5.5万，PI值4.8，含10-12%糖。测定方法：免疫化学法，电泳等功能：蛋白酶抑制物。如糜蛋白酶，弹性蛋白酶临床意义：低血浆AAT-胎儿呼吸迫综合症参考值：500mg/Lα1-酸性糖蛋白（AAG）理化性质：MW=4万，PI值2.7-3.5，含约45%糖。肝合成（N），肿瘤细胞合成测定方法：免疫化学法（扩散,浊度）,化学法等功能：与免疫防御功能有关，机制不详。临床意义：急性时相反应指标；风湿，肿瘤，AMI升高,营养不良降低,严重肝损伤降低参考值：500—1500mg/L甲胎蛋白(AFP)理化性质：MW=6.9万，胎儿肝合成，成人量微，肿瘤细胞合成。测定方法：免疫化学法（扩散,火箭电泳）,酶标法等功能：胎儿血浆主要蛋白质。临床意义：胎儿产前监测（羊水或母血）遗传病及异常疾病增高等,肝癌患者检查（80%增高原发）参考值:30μg/L(成人)500mg/L(新生儿)临床意义：铜蓝蛋白(CER)理化性质：MW=12-16万,不易纯化,含6-7铜原子,含糖10%,具遗传基因多态性,具氧化酶活性。测定方法：免疫化学等功能：具氧化酶活性且起抗氧化剂作用，铜代谢库。临床意义：增加—感染,创伤,肿瘤;降低--营养不良，严重肝病及肾综;协助诊断Wilson病转铁蛋白(TRF)理化性质：MW=7.7万,含糖6%，肝细胞合成，半寿期7天，可逆结合多价离子，Fe,Cu,Zn,Co等，一分子TRF可结合两个三价铁。测定方法：化学法等功能：血TRF浓度受铁供应调节，运输铁。缺铁TRF升，铁治疗后恢复。临床意义：贫血的诊断和对治疗的监测参考值：2.20--4.00g/L(成人)1.30--2.75g/L(新生儿)TRF(g/L)=TIBC(mg/L)*0.7血红素结合蛋白(Hpx)理化性质：单链多肽，分子量入电泳位a2带测定方法：免疫化学法（扩散,浊度）,化学法等功能：与游离血红素特异结合，配合结合珠蛋白对Hb进行处理。血红素不溶于水。保护铁，避免Hb与血红素从肾排出。临床意义：参考值：500－1000μg/Lβ2微球蛋白(BMG)理化性质：MW=11800，存在细胞表面，特别是淋巴和肿瘤细胞。释放入血循环。半衰期107分钟，几乎由肾小管回收。测定方法：放射免疫化学等功能：肾小管功能。临床意义：肾功能衰竭，炎症及肿瘤时，血浆浓度增高，监测肾小管功能。特别是肾移植排斥反应可出现尿排BMG增加。参考值：1.0—2.6μg/L（血浆）0.03—0.37mg/d(尿液）C-反应蛋白质(CRP)理化性质：MW11.5-14万,r区带,五亚基多聚体测定方法：半定量沉淀法（早），免疫化学法。Libaiwa整理制作【临床生物化学和生物化学检验】(第二版)☆课堂笔记第2页共58页功能：激活补体，免疫调理、吞噬临床意义：急性时相反应的一个极灵敏的指标，血浆CRP浓度在AMI，创伤，感染，炎症，外科手术，肿瘤浸润时迅速显著增高，（2000倍）。参考值：800-8000μg/L(免疫扩散)其他血浆蛋白质α1抗糜蛋白酶：MW6.8万，APR之一来源胚胎的血浆蛋白质1、使用过的其它名称3、氨基酸序列及三维空间结构5、细胞类型及表达调控7、基因结构及其染色体定位9、信号传递机制，途径和类型2、分子大小，分子特性，分子量4、交叉反应性6、物理化学性质8、受体类型溶菌酶:MW1.5万。蛋白质测定一般利用蛋白质以下的结构或性质癌胚抗原:MW近20万的糖蛋白。1、元素组成测定2、重复的肽链结构关于血浆蛋白质的正常参考值3、酪氨酸和色氨酸对Folin-酚试剂或UV吸收年龄组的变异:新生儿/胎儿组；8-95岁年龄组分布调查特征4、与色素结合的能力双缩脲法5、沉淀后借浊度或光折射测定性别差异个体不同时期的差异及个体间差异疾病时血浆蛋白质变化的图谱特征关于急性时相反应蛋白（APR）：风湿病；肝疾病；选择性蛋白质的丢失；妊娠期及高雌激素血症；遗传性疾病；几种疾病时血浆（清）蛋白质的变化图谱蛋白种类成人肾病肝硬化骨髓瘤蛋白质中的肽键（-CONH-）在缄性溶液中能与铜离子作用而产生紫红色络合物。条件：至少含两个肽键（-CONH-）基团才能和Cu2+络合物,氨基酸及二肽无反应,三肽以上才能反应。本反应非蛋白质所特有！各种蛋白质呈色程度基本相同，方法简便！凯氏定氮法总蛋白白蛋白66-83g/L降低35-50g/L降低降低降低升高降低消化用浓硫酸将蛋白质消化为硫酸铵；蒸馏用碱性溶液碱化消化液并蒸馏挥发；α1球蛋白2-7降/正正/降正常吸收用酸性溶液（硼酸）吸收气态氨α2球蛋白1.8-4.8升/正正/降β球蛋白6-11.5正/升升高正常正常滴定用标准碱（已标定NaOH）滴定γ球蛋白6-21.5血浆蛋白质的检测及其临床应用降升高升高明显酚试剂法蛋白质先与碱性硫酸铜作用,后与酚试剂反应呈色。1、定量化学测定TPr，Alb2、电泳测定3、特异定量测定血清总蛋白测定假设：（1）纯多肽链，含氮量平均为16%（2）与化学试剂反应性一致，仅为相对定量灵敏度为10-60μg/ml，为双缩脲法100倍。紫外分光光度法许多蛋白质由于含酪氨酸和色氨酸,在280nm处有一吸收峰,可用于测定蛋白质但避免核酸干扰。1.凯氏定氮法－参考标准方法2.UV法3.双缩脲法(推荐)（1）Lowry-Kalcker公式4.散射比浊法血清蛋白质的电泳分析5.酚试剂法6.染料结合法蛋白质浓度（mg/ml）=1.45A280-0.74A260（2）Warburg-Christian公式1、醋酸纤维薄膜(CAM)电泳2、聚丙烯酰胺凝胶电泳3、等电聚焦电免疫化学法测定个别蛋白质蛋白质浓度（mg/ml）=1.55A280-0.76A260染料（色素）结合法1、散射比浊法2、透射比浊法在酸性环境下，带正电的蛋白质与带负电的阴离子产生颜色反应，可比色测定。第二节细胞骨架蛋白优点：操作简便，快速，重复性好，灵敏度高，干扰因素较少（G-250）微管微丝中间纤维缺点：特异性不高三种比色法和紫外分光光度法测定蛋白质的比较第三节细胞调节因子细胞调节因子是一组小分子或中分子量的可溶性蛋白质（多肽）与糖方法间的误差灵敏度干扰程度蛋白质快速性、复杂性双缩脲100μg中等小快速简易蛋白，具有强大的和多方面的生物学效应。通过细胞内信号传导和第二信使介导，调节细胞生理活动等。按主要特征分类1、天然免疫的效应分子2、炎症反应的激活因子3、淋巴细胞活酚试剂GG250UV法比浊度1μg1μg10μg严重低较严重大大大较复杂快速简易快速简易化生长与分化的调节因子4、未成熟免疫细胞生长分化的刺激因子按生物学特性从临床病理分类炎症因子杀伤因子干扰素白介素类成血因子转化生长因子按分子结构及基因受体类型分类某些强酸能与生物碱结合而沉淀，称为生物碱试剂，它们也能与蛋白质结合产生沉淀。这是蛋白质的共性。优点：操作简便，试剂易得缺点：浊度影响因素多Libaiwa整理制作【临床生物化学和生物化学检验】(第二版)☆课堂笔记第3页共58页折光测定法溶解在溶液的固体可以增加溶液的光折射，通过测定血清的折射指数，可求总固体的含量。折射率=1.3353+蛋白浓度（g/dl）*0.00191血糖浓度恒定的意义：机体组织尤其是脑、肾、红细胞、视网膜等需不断从血液摄取葡萄糖以氧化功能。血糖的来源与去路精密度稍差，测定结果比化学方法稍高。白蛋白测定—盐析法在蛋白质溶液中加入大量中性盐，蛋白质表面的电荷被大量中和，水来源食物中的糖类肝糖原分解去路氧化供能合成糖原（肝、肌肉）化膜被破坏，蛋白质分子相互聚积而沉淀析出，此现象称为盐析。白蛋白测定—染料（色素）结合法在酸性环境下，带正电的蛋白质与带负电的阴离子产生颜色反应，可比色测定。操作简便，快速，重复性好，灵敏度高。非糖物质转化（糖异生作用）其他单糖转化（乳糖等）血糖转化为脂肪、AA等其他单糖及衍生物（组织结构成分等）1、BCG法2、BCP法球蛋白测定血糖