第1页临床生物化学与检验第一章临床生物化学的概念:临床生物化学与是在人体正常的生物化学代谢基础上,研究疾病状态下生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物的质与量的改变,从而为疾病的临床实验诊断,治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门学科。(选择题)第二章1.血浆蛋白质电泳区带顺序:前清蛋白、清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白、γ-球蛋白2.急性时相反应:当人体因感染、自身免疫性等组织损伤(如创伤、手术、心肌梗死、肿瘤等)侵害,诱导炎症,使单核细胞和巨噬细胞等细胞释放紧急反应性因子,再经血液循环,刺激肝脏细胞产生Hp、Cp、CRP等,使其血浆中浓度显著升高,而血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度则出现相应下降,此炎症反应过程,称之为急性时相反应(APR),该过程出现的蛋白质统称为急性时相反应蛋白(APP)。各APP升高的速度和幅度有所不同,C-反应蛋白首先升高,在12小时内α1-酸性糖蛋白也升高,尔后α1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4和纤维蛋白原升高,最后是C3和铜蓝蛋白升高,通常在2至5天内这些APP达到最高值。第2页3.M蛋白→多发性骨髓瘤4.清蛋白(Alb)的生理功能:①保持血浆胶体渗透压:以维持血管内外体液的平衡。②重要的营养蛋白:用于组织蛋白的补充和修复③血浆中主要的载体蛋白:许多水溶性差的物质,可以通过与Alb的结合而运输④具有缓冲酸碱的能力:蛋白质是两性电解质5.CRP的临床意义:CRP是第一个被认识的APP。CRP是非特异性指标,主要用于结合临床检测疾病:①筛查微生物感染;②评估炎症性疾病的活动度;③检测系统性红斑狼疮、白血病和外科手术后并发的感染(血清中浓度再次升高)④新生儿败血症和脑膜炎的监测;⑤监测肾移植后的排斥反应等(简答题)6.体液总蛋白测定的方法:凯氏定氮法是经典的蛋白质测定方法(参考方法);双缩脲法是常规方法。7.清蛋白可与阴离子染料溴甲酚绿(BCG)或溴甲酚紫(BCP)结合,而球蛋白基本不结合这些染料。8.前清蛋白(PA):在正常血清蛋白电泳(SPE)中显示在清蛋白前方故而得名,生理功能:PA为运载蛋白和组织修补材料。临床意义:①属负性APP;②作为营养不良的指标;③作为肝功能不全的指标。9.触珠蛋白(Hp)又称为结合珠蛋白,在SPE中位于α2区带,为α2β2四聚体。生理功能:主要能与红细胞中释放出第3页的游离血红蛋白结合,为机体有效的保留铁。临床意义:①溶血性疾病;②当烧伤和肾病综合征使Alb大量丢失时,大分子Hp常明显增加;③雌激素使Hp减少,多数急慢性肝病包括急性病毒性肝炎和伴黄疸的肝硬化患者,由于雌激素分解代谢减少,血浆Hp可降低。10.转铁蛋白(Tf)临床意义:①用于贫血的诊断,缺铁性贫血时,Tf代偿性合成增加;②作为营养状态的一项指标,在营养不良及慢性肝病时下降;③是负性APP,而妊娠和应用雌激素时则增高。11.简述测定体液总蛋白六种方法的性能特点及其适用范围。蛋白质测定一般利用下列四种蛋白质特有的性质或结构:①重复的肽链结构;②酪氨酸和色氨酸残基对酚试剂反应或紫外光吸收;③与色素结合能力;④沉淀后借浊度过光折射测定。以上这些原理不仅适合于生物样品总蛋白的测定,也可以用于分离出的蛋白质组分测定。第三章1.血糖:是指血液中的葡萄糖。正常情况下空腹血糖浓度相对恒定在3.89~6.11mmol/L(70~110mg/dl)2.降低血糖的激素:胰岛素(是由胰腺的胰岛B(β)细胞所产生的多肽激素)升高血糖的激素:胰高血糖素(是由胰岛A(α)细胞分泌的第4页一种多肽),肾上腺素(是肾上腺髓质分泌的儿茶酚胺类激素),生长激素,皮质醇3.糖尿病的定义:糖尿病是一组由于胰岛素分泌不足或(和)胰岛素作用低下而引起的代谢性疾病,其特征是高血糖症。糖尿病的典型症状为多食、多饮、多尿和体重减轻,有时伴有视力下降,并容易继发感染,青少年患者可出现生长发育迟缓。长期的高血糖症将导致多种器官的损害、功能紊乱和衰竭,尤其是眼、肾、神经、心血管系统。糖尿病可并发危及生命的糖尿病酮症酸中毒昏迷和非酮症高渗性昏迷。4.糖尿病的分型:根据病因分为四大类:1型糖尿病(病因:胰岛B细胞破坏,导致胰岛素绝对不足)、2型糖尿病(病因不明确,含胰岛素抵抗、胰岛素分泌不足等)、其他特殊类型糖尿病、妊娠期糖尿病(GDM).5.糖尿病的诊断标准(简答/论述):①DM的典型症状(如多食、多饮、多尿和无原因体重减轻等),同时随机血糖浓度≥11.1mmol/L(200mg/dl);②空腹血浆葡萄糖浓度(FPG)≥7.0mmol/L(126mg/dl);③口服葡萄糖耐量(OGTT)实验中2h血浆葡萄糖浓度(2h-PG)≥11.1mmol/L(200mg/dl).(注:以上三种方法都可以单独用来诊断DM,其中任何一种出现阳性结果,必须随后用三种方法中任意一种进行复查才能确诊。)6.什么是OGTT,其用途是什么?第5页口服葡萄糖耐量试验(OGTT):是在口服一定量葡萄糖后2h内做系列血浆葡萄糖浓度测定,以评价个体的血糖调节能力的标准方法,对确定健康和疾病个体也有价值。OGTT的用途:①诊断GDM;②诊断IGT;③有无法解释的肾病、神经病变或视网膜病变,其随机血糖7.8mmol/L,可用OGTT评价。在此时如有异常OGTT结果,不代表有肯定的因果关系,还应该排除其他疾病;④人群筛查,以获取流行病学数据。7.诊断DM应使用血浆或血清标本血浆标本专用抗凝剂:氟化钠-草酸(盐)钾混合物。8.糖化血红蛋白(GHb)反映的是过去6-8周的平均血糖浓度。糖化清蛋白浓度反映的是近2~3周血糖的情况。(所有糖化清蛋白都是果糖胺)9.糖尿病的早期筛查指标包括:①免疫学标志物(包括ICA、IAA、GAD抗体和IA-2抗体);②基因标志物(如HLA的某些基因型);③胰岛素分泌(包括空腹分泌、脉冲分泌和葡萄糖刺激分泌);④血糖(包括IFG和IGT)。10.糖尿病的临床诊断标准:(简答)DM的实验室诊断指标包括:血糖(包括空腹与随机);OGTT。DM的临床诊断并不困难,根据“三多一少”症状(多饮、多食、多尿、体重减轻)和血糖浓度升高(FPG≥7.0mmol/L或第6页随机血糖浓度≥11.1mmol/L)即可诊断。虽然OGTT试验2h血糖(2hPG)≥11.1mmol/L也可诊断DM,但是由于OGTT重复性差,操作繁琐,所以临床一般不用于DM诊断。11.DM慢性并发症的实验室监测指标包括:①血糖与尿糖;②糖化蛋白(如GHb与果糖胺);③尿蛋白(微量清蛋白尿与临床蛋白尿);④其他并发症评估指标(如肌酐、胆固醇和甘油三酯等);⑤胰腺移植效果评估指标(如C肽和胰岛素)。12.低血糖诊断标准:空腹血糖参考下限为2.78mmol/L(50mg/dl).第四章1.血浆脂类包括游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)、磷脂(PL)、甘油三酯或三酰甘油(TG)、糖酯、游离脂肪酸(FFA)等。(记缩写)2.血浆脂蛋白依据各种脂蛋白的水化密度及电泳迁移率的不同分为:①超速离心法②电泳法。超速离心法(是密度梯度离心法)将血浆脂蛋白按密度由低到高分为:CM(乳糜微粒)、VLDL(极低密度脂蛋白)、(IDL中间密度脂蛋白)、LDL(低密度脂蛋白)、HDL(高密度脂蛋白)。3.载脂蛋白:(简答)⑴其定义:脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白。第7页⑵其生理功能:①载脂蛋白构成并稳定脂蛋白的结构;②修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性;③作为脂蛋白受体的配体,参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体的结合及其代谢过程。⑶血浆载脂蛋白的特征:4.乳糜微粒(CM)运载外源性甘油三酯(TG)正常空腹血液中没有CM;CM脂质含量高。载脂蛋白脂蛋白载体功能AⅠHDL,CMLCAT的辅助因子,激活其活性AⅡHDL,CM激活HTGL,抑制LCAT,稳定HDLB100VLDL,IDL,LDL转运TG、TC,识别LDL受体CⅡCM,HDL,VLDLLPL的辅助因子,激活其活性第8页极低密度脂蛋白(VLDL)运载内源性甘油三酯(TG);低密度脂蛋白(LDL)将胆固醇(TC)从肝脏转运到外周组织;高密度脂蛋白(HDL)将胆固醇(TC)从外周组织转送到肝脏。5.降低血TC、TG、LDL和升高血HDL是防治动脉粥样硬化性心脑血管疾病的重要措施。6.脂蛋白代谢的关键酶有:脂蛋白脂肪酶(LPL)、卵磷脂胆固醇酯酰转移酶(LCAT)、肝脂酶(HTGL)或HL)、HMGCOA还原酶。第五章1.⑴酶催化化学反应的能力称为酶活性。(定义)⑵1976年对酶活性单位定义为:在特定的条件下,一分钟内使底物转变一微摩尔的酶量为一个国际单位。(3)各国学者几乎都习惯用U/L来表示体液中酶催化浓度。(4)LD(LD1、LD2、LD3、LD4、LD5)(5)最常用的同工酶分析方法:电泳法2.血清酶包括:(选择)⑴血浆特异酶:凝血酶原、ChE、铜氧化酶【铜蓝蛋白(Cp)】、脂蛋白酯酶等。⑵非血浆特异酶:①外分泌酶:胰淀粉酶(AMS/AMY);②细胞酶(大部分非血浆特异酶都是细胞酶):转氨酶、LD、CK第9页3.血清酶的来源与去路来源:①血浆特异酶②非血浆特异酶:外分泌酶、细胞酶去路:①尿排②肝或网状内皮系统的清除③在血管内失活和分解④转入其他体液4.血清酶变化的病理机制:(简答/论述)⑴酶合成异常:①合成减少:肝损害时合成酶的能力受损,血清中相应酶减少慢性肝病是更为显著。②合成增多:细胞对血清酶的合成增加或酶的诱导作用是血清酶活性升高的重要原因。⑵酶释放增加:酶从病变(或损伤)细胞中释放增加是疾病时大多数血清酶增高的主要机制,其影响因素有:①细胞内外酶浓度的差异;②酶的相对分子质量;③酶的组织分内;④酶在细胞内的定位和存在形式。⑶酶排出异常5.血清酶的生理差异:性别、年龄、进食、运动、妊娠、其他。(多选)6.血清酶活性浓度测定中,标本的采集、运输与保存的技术误差因素(解答,多选):①溶血:大部分酶在细胞内外浓度差异明显,且其活性远高于血清,少量血细胞的破坏就可能引起血清中酶明显升高,1-2小时内必须离心。②抗凝剂(用肝素影响最小):EDTA、草酸盐、柠檬酸盐可第10页抑制需Ca2+的AMY。肝素适用于急诊时迅速分离血浆进行测定,可使γ-GT升高,AMY降低。③温度:大部分酶在低温中比较稳定,有些酶冰冻时不稳定。7.试述酶促反应的动力学特征。主要研究酶催化的反应速度以及影响反应速度的各种因素。在探讨各种因素对酶促反应速度的影响时,通常测定其初始速度来代表酶促反应速度,即底物转化量5%时的反应速度。酶促反应动力学是研究酶促反应速率及其影响因素的科学。8.酶促反应的影响因素有哪些?(简答/论述)①酶浓度:在适宜的温度、PH和底物浓度恒定时,反应速度在初始阶段与酶浓度成正比。②底物的种类和浓度:有些酶专一性不强,可作用多种底物,则须根据需要选择合适的底物。其他条件恒定时反应速度取决于酶和底物的浓度,如酶的浓度保持不变,则反应速度随底物浓度增加而加快。③缓冲液的种类、离子强度和pH:酶与底物结合的能力,酶的催化活性,会受不同pH的影响,只有在最佳缓冲系统内才能充分表达。各种酶都具有使酶促反应速率最大时的pH,即最适pH④温度:随温度升高,反应速度升高至最大值,超过此温度反应速度随温度升高反而下降⑤激活剂和抑制剂第11页⑥其他:酶偶联法加指示剂或有些方法加辅酶,反应时间及产物等。9.⑴工具酶:通常把酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。(简答)⑵共通(或通用)反应途径:临床生化检验中许多项目的测定使用有工具酶的参与的类似的反应原理,即所谓共同(或通用)反应途径。最常用的有两类分光光度法:①利用较高特异性的氧化酶产生过氧化氢(H2O2),再加氧化发色剂比色;②利用氧化-还原酶反应使其连接到NAD(P)-NAD(P)H的正/逆反应后,直接通过分光光度法或其他方法测定NAD(P)H的变化量。10.在急性胰腺炎发病后2-3hAMY开始升高(也有延至12h升高者),多在12-24h达峰值,2-5d下降至正常